【正文】 學(xué)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，器件表面的缺陷與旋轉(zhuǎn)部件對光的散射 分析的檢測限 （一）光學(xué)系統(tǒng)對光度計(jì)性能的影響 儀器性能 主要決定因素 對分析影響 準(zhǔn)確度 檢測器、放大器、信號處理與顯示器的非線性 準(zhǔn)確度 信噪比 光源、放大器、檢測器產(chǎn)生的噪聲及環(huán)境噪聲 準(zhǔn)確度與精度 分析速度 儀器的響應(yīng)速度、 整機(jī)的結(jié)構(gòu) 分析效率，準(zhǔn)確度與精確度 （二）整機(jī)對光度計(jì)性能的影響 波長的準(zhǔn)確度是指儀器所指示的波長值和單色器實(shí)際輸出單色光的波長值之間相符合的程度 。 紫外－可見分光光度計(jì) 光電二極管陣列測定原理 第三節(jié) 結(jié)束 第四節(jié) 紫外～可見分光光度計(jì)的性能 二、儀器分析條件的設(shè)定 一、 分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)性能及其對分析的影響 由于樣品的光學(xué)特征與測試目的不同 ， 對測試結(jié)果的準(zhǔn)確度 、 精確度與檢測限的要求也不同 。 紫外－可見分光光度計(jì) 雙波長分光光度計(jì) 單色器 1 單色器 2 樣品池 檢測器 光源 斬光器 它是一種高檔的用光電二極管陣列作為多通道檢測器 ， 由微型計(jì)算機(jī)控制的單光束紫外可見分光光度計(jì) ，具有快速掃描吸收光譜的特點(diǎn) 。 紫外－可見分光光度計(jì) 雙光束光度計(jì)工作原理 雙波長分光光度計(jì)是用兩個(gè)不同波長 (λ 1和 λ 2)的單色光交替通過樣品溶液 (不需使用參比溶液 )后到達(dá)檢測系統(tǒng)，得到樣品溶液在兩波長處的吸光度的差值 ΔΑ＝ Α λ 1－ Α λ 2。 使用時(shí) ， 如在不同的波長范圍內(nèi) 、用不同的吸收池 ， 則每換一次波長都必須用參比溶液校正 ， 操作麻煩 ， 不適于作定性分析 。 紫外－可見分光光度計(jì) 顯示器 按光路結(jié)構(gòu) ， 常見紫外分光光度計(jì)可分為下列幾種類型：單光束 、 雙光束 、 雙波長以及光電二極管陣列分光光度計(jì) 。 在光照射時(shí) ，由于電子和空穴的增加 ， 硅片的導(dǎo)電性增加 。 光電倍增管的線性范圍較寬 ， 并可通過倍增極的負(fù)反饋使輸出信號穩(wěn)定 ， 通過調(diào)節(jié)外加電壓的大小可調(diào)節(jié)光電倍增管的輸出電流大小 。 將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?。 由一個(gè)陰極和一個(gè)陽極構(gòu)成 ， 裝在抽成真空的玻璃或石英管內(nèi) 。 紫外－可見分光光度計(jì) 光電檢測器 光電池的特性 當(dāng)外電路的電阻不大時(shí) ， 光電流與照射的光強(qiáng)具有線性關(guān)系 ， 一般可達(dá) 10100μΑ。 ② 、光電池 又稱光生伏打電池；有硒光電池和硅光電池。 多通道檢測器：是多個(gè)單通道檢測器的集合 ，能同時(shí)檢測空間不同位置光的強(qiáng)度 。光譜儀器中信號的傳輸主要是光強(qiáng)度特征的傳送，受檢測器影響很大。 紫外－可見分光光度計(jì) 單色器的波長分辨率 絕對分辨率越小 ， 光譜儀分辨譜線的能力越大 。 指單色光光譜中 1/2峰高處的波長寬度 ， 稱為半高寬或半寬 。 色散作用：用光柵公式表示 d(sinα +sinθ )=nλ ，式中： α、 θ分別為入射角和衍射角 ， 整數(shù) n為光譜級數(shù) ， 波長 λ。 平行的復(fù)合光經(jīng)色散后 ，就按波長順序被分解為不同波長的 “ 單色光 ” ， 得到按波長順序展開的光譜 。 出射狹縫：使分析所需波長的單色光通過。 紫外－可見分光光度計(jì) 入射狹縫：只許光源分一束光進(jìn)入。 與氫燈相比 ，氘燈的能量輸出和波長范圍均顯著的提高 。白熾鎢燈的燈絲溫度約 2850K，工作波長范圍約為 350～ 2500nm，所發(fā)出的光大部分在近紅外區(qū)。 光源的數(shù)量特征 ， 要求光源有足夠高和穩(wěn)定的強(qiáng)度 。 π→π* 躍遷的吸收峰向長波方向移動(dòng)，稱為長移或紅移效應(yīng)。 助色效應(yīng)：使助色團(tuán)的 n電子于發(fā)色團(tuán)的 π電子共軛 ， 也可使吸收峰的波長向長波方向移動(dòng) ， 吸收強(qiáng)度也隨之增加 。 吸收帶 紫外－可見吸收光譜主要取決于分子中電子軌道的能級躍遷 ， 但分子的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和外部環(huán)境也會對其產(chǎn)生影響 。 當(dāng)苯環(huán)上有取代基且與苯環(huán)共軛 ， 或在極性溶劑中測定時(shí) ， 這些精細(xì)結(jié)構(gòu)會簡化或消失 。 吸收波長隨共軛體系的加長而向長波方向移動(dòng) ， 吸收強(qiáng)度也隨之增加 。 吸收強(qiáng)度較弱 k102， 吸收峰位于 200～ 400nm。 助色團(tuán)：含有未成鍵 n電子 ， 本身不產(chǎn)生吸收峰 、 但與發(fā)色團(tuán)相連 ， 能使發(fā)色團(tuán)吸收峰向長波方向移動(dòng) ， 吸收強(qiáng)度增加的雜原子基團(tuán)稱為助色團(tuán) ，如：－ NH2， － OH， － OR， － SR， － X等 。 分子軌道與能級 n→π* 躍遷： 主要是既含有 C=C雙鍵 ，又含有 C＝ O、 C=S、 N=O、 N=N等雜原子的有機(jī)分子 ， 由于 n與 π*這兩種分子軌道的能量間距較小 ， 因此 ， 產(chǎn)生這種躍遷需要吸收的光子在石英紫外區(qū) ， 其波長范圍較寬 ， 能被普通的紫外可見光譜分析所利用 。 產(chǎn)生這類躍遷的幾率較高 ， 其摩爾吸光系數(shù)約 104。躍遷的能量間距較大，產(chǎn)生躍遷需要的激發(fā)光波長在真空紫外區(qū)，約 150nm左右，普通的紫外可見光譜分析不能利用。 電子傾向于優(yōu)先排在能量較低的成鍵軌道上 。 前三種軌道電子云形狀對于鍵軸具有圓柱對稱性 ， 稱為 σ分子軌道； 后兩種對于通過鍵軸的平面具有反對稱性 ， 稱為 π分子軌道 。 二、紫外 — 可見吸收光譜分析譜區(qū)： 普通紫外可見分光光度計(jì)（ UVVIS）的波長范圍為：200～ 800nm，光子的能量范圍是 ～ 。 方法簡便 、 操作容易 、 分析速度較快 。第三章 第三章 紫外 — 可見吸收光譜分析 (分子 ) 第一節(jié) 概述 : 第二節(jié) 紫外－可見吸收光譜 與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系 第三節(jié) 紫外－可見分光光度計(jì)的 基本組成與結(jié)構(gòu) 第四節(jié) 紫外－可見分光光度計(jì)的性能 第五節(jié) 紫外－可見吸收光譜法的應(yīng)用 紫外～可見吸收光譜分析 ， 簡稱 UVVIS。 準(zhǔn)確度比較高 ， 相對分析誤差可控制在 1％ ～ 5％ 以內(nèi) 。 紫外－可見吸收光譜分析 一、特點(diǎn)： 紫外區(qū) ：為石英紫外區(qū)，是指可以通過石英 (SiO2)、且不為氧所吸收的 200～ 420nm譜區(qū)； 可見光區(qū) ：波長范圍約為 420～ 760 nm 。 分子軌道與能級 一、 分子外層電子的分子軌道與能級 原子通過化學(xué)鍵組成分子后 ， 形成分子軌道的兩個(gè)原子的電子軌道