紅細(xì)胞檢驗(yàn)的基本方法-全文預(yù)覽
【正文】 還原成 NADPH，后者在紫外線照射下會(huì)發(fā)出熒光。 二、變性珠蛋白小體生成試驗(yàn) 原理： 正常人含 5個(gè)及以上珠蛋白小體的紅細(xì)胞， 一般＜ 30％。 第五節(jié) 紅細(xì)胞酶缺陷的檢驗(yàn) 一、高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn) 二、變性珠蛋白小體生成試驗(yàn) 三、葡萄糖－ 6－磷酸脫氫酶熒光斑點(diǎn)試 驗(yàn)和活性測(cè)定 四、丙酮酸激酶熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和活性測(cè)定 五、谷胱甘肽還原酶缺陷檢測(cè) 原理： 一、高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn) 在血液中加入亞硝酸鹽使紅細(xì)胞中的亞鐵血紅蛋白變成高鐵血紅蛋白，正常紅細(xì)胞的 G－ 6－PD催化戊糖旁路使 NADP變成 NADPH，其脫的氫通過亞甲藍(lán)試劑的遞氫作用而使高鐵血紅蛋白（ Fe3＋ ）還原成亞鐵血紅蛋白（ Fe2＋ ），通過比色可觀察還原的多少。 參考值： 各種膜蛋白組分百分率變化較大，多以正常紅 細(xì)胞膜蛋白電泳圖譜作比較；或以帶 3蛋白為 基準(zhǔn)，各膜蛋白含量以與帶 3蛋白的比例表示。 參考值： 9mmol／ L或 12mmol／ L蔗糖 最大溶血率 ％～ ％ 7mmol／ L蔗糖 最大溶血率 ％～ ％ 臨床評(píng)價(jià)： ① 遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥明顯增加。 原理 五、高滲冷溶血試驗(yàn) 在高滲狀態(tài)下，溫度驟然變化影響紅細(xì)胞膜脂質(zhì)的流動(dòng)性，并可能累及膜磷脂與膜骨架蛋白結(jié)合位點(diǎn)，紅細(xì)胞容易破裂而發(fā)生溶血。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜 脂質(zhì)減少。h－ 1 臨床評(píng)價(jià)： 遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥： Na＋ － K＋ － ATP酶活性增加， Ca2＋ － Mg2＋ － ATP酶活性減低。為測(cè)定酶的活性可分別測(cè)定酶作用于 ATP的水解產(chǎn)物無機(jī)磷含量，若在基質(zhì)中只加入 Ca2＋ － Mg2＋ －ATP酶可測(cè)定 Ca2＋ － Mg2＋ － ATP酶的活性，若在基質(zhì)中加入 Na＋ 、 K＋ 、 Mg2＋ 和 ATP，測(cè)定的為 Na＋ － K＋ － ATP酶和 Mg2＋ － ATP酶的共同含量，再在基質(zhì)中加入 Na＋ － K＋ － ATP酶的抑制劑，測(cè)定結(jié)果僅為 Mg2＋ － ATP酶活性，兩者的差為 Na＋ － K＋ － ATP酶活性。 ② G－ 6－ PD缺乏癥等戊糖旁路代謝缺陷的病人自身溶血率增加，能被葡萄糖糾正。 原理： 二、自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn) 紅細(xì)胞在 37℃ 孵育 48小時(shí)，其間由于膜異常 引起鈉內(nèi)流傾向明顯增加， ATP消耗過多； 或糖酵解途徑酶缺乏所引起 ATP生成不足等 原因可導(dǎo)致溶血，稱為自身溶血試驗(yàn)。 第四節(jié) 紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn) 一、紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn) 二、自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn) 三、紅細(xì)胞膜三磷酸腺苷活性測(cè)定 四、酸化甘油溶血試驗(yàn) 五、高滲冷溶血試驗(yàn) 六、紅細(xì)胞膜蛋白電泳分析 一、紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn) 滲透脆性試驗(yàn)（ osmotic fragility test）檢測(cè)紅細(xì)胞對(duì)不同濃度低滲鹽溶液的抵抗力。尿沉渣腎小管細(xì)胞內(nèi) 外可見直徑 1～ 3μm的藍(lán)色顆粒。 ②對(duì)缺鐵性貧血、鉛中毒、鐵粒幼細(xì)胞貧血和珠蛋白生成障礙性貧血等的診斷有一定價(jià)值。排除嚴(yán)重肝病及傳單。 參考值： 正常人呈陰性 血管內(nèi)溶血時(shí)，血漿中游離血紅蛋白大量增 加，血漿中可檢測(cè)出高鐵血紅素白蛋白。 （ 2）再生障礙性貧血，約為 15～ 29天。 陽性：比值 ≥ 陽性對(duì)照血清比值 177。 原理： 三、血清維生素 B12吸收試驗(yàn) 給受檢者口服放射性核素 57Co標(biāo)記的維生素 ， 2小時(shí)后肌注未標(biāo)記的維生素 B12 1mg，收集 24小時(shí)尿測(cè)定 57Co排出量。 葉酸減低：巨幼細(xì)胞貧血，紅細(xì)胞過度增生 （如溶貧、骨髓增生性疾病等）。 用于臨床觀察骨髓增生狀況和治療反應(yīng)。 +抗體 +酶抗體； ，其顏色的深淺與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的量成正比。 參考值： 免疫散射比濁法為 ～ mol／ L。 參考值： 臨床評(píng)價(jià)： 增加：見于 IDA，可高達(dá) 50％～ 80％。 三、 TIBC測(cè)定 原理： +血清 → SF PH↓+ 還原劑 → Fe2++顯色劑 → 有色絡(luò)合物 TIBC：男性 50～ 77μ mol／ L 女性 54 ～ 77μ mol／ L UIBC： ～ mol／ L 參考值： 臨床評(píng)價(jià)： ① 增高：見于 IDA和紅細(xì)胞增多癥等。 一、 SI(serum iron)的測(cè)定 SF PH↓+ 還原劑 → Fe2++顯色劑 → 絡(luò)合物 參考值： 成年男性 ～ mol／ L 成年女性 ～ mol／ L 臨床評(píng)價(jià)： 降低：見于缺鐵性貧血（ IDA）、慢性失血和 感染等。 ? (serum transferrin)。 ? 。 ? 、酶缺陷的檢驗(yàn)。 鐵指標(biāo)檢驗(yàn)的幾個(gè)概念 ? (serum iron )。 ? 。 ②增高：見于肝疾病、血色病、急性感染和惡 性腫瘤等。口服放射性 59Fe，測(cè)定體內(nèi) 59Fe 放射性量比率的變化，可推算出鐵吸收率。 正常值 :％～ ％ 四、鐵吸收率測(cè)定 五、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白測(cè)定 原理： 免疫散射比濁法 ：利用抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白血清與 待檢測(cè)的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物， 其光吸收和散射濁度增加，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較， 可計(jì)算出轉(zhuǎn)鐵蛋白含量。 臨床評(píng)價(jià) : 原理： 六、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白受體測(cè)定 雙抗體夾心法 。 降低：見于再障、慢性病貧血、腎
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