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現(xiàn)代分子生物學(xué)筆記-全文預(yù)覽

  

【正文】 etheInitiation.notplaceAcids 主要分為五步 在大腸桿菌中合成一個(gè)100個(gè)氨基酸的多肽只需5分鐘。此外,有20種以上的AAtRNA及合成酶、10多種起始因子、延伸因子及終止因子,30多種tRNA及各種rRNA、mRNA和100種以上翻譯后加工酶參與蛋白質(zhì)合成和加工過(guò)程。acidDNA 七.在大腸桿菌內(nèi),Mg2+濃度在103mol/L以下時(shí),70S解離為亞基,濃度達(dá)102mol/L時(shí)則形成穩(wěn)定的70S顆粒。A位、P位、轉(zhuǎn)肽酶中心等主要在大亞基上。小亞基上擁有mRNA結(jié)合位點(diǎn),負(fù)責(zé)對(duì)序列特異的識(shí)別過(guò)程,如起始位點(diǎn)的識(shí)別和密碼子與反密碼子的相互作用。真核生物細(xì)胞核糖體大亞基含有49種蛋白質(zhì),小亞基有33種蛋白質(zhì)。 原核生物核糖體由約2/3的RNA及1/3的蛋白質(zhì)組成。它是由幾十種蛋白質(zhì)和幾種核糖體RNA(ribosomalonaincorrectisaminoacylAMP.andacidbindingfilter不同的tRNA有不同堿基組成和空間結(jié)構(gòu),容易被tRNA合成酶所識(shí)別,困難的是這些酶如何識(shí)別結(jié)構(gòu)上非常相似的氨基酸。+E+AMP3’末端腺苷殘基上,與其2’或3’羥基結(jié)合。 五.AA (2)同工tRNA 代表同一種氨基酸的tRNA稱(chēng)為同工tRNA,同工tRNA既要有不同的反密碼子以識(shí)別該氨基酸的各種同義密碼,又要有某種結(jié)構(gòu)上的共同性,能被AA 3.tRNA的功能 轉(zhuǎn)錄過(guò)程是信息從一種核酸分子(DNA)轉(zhuǎn)移至另一種結(jié)構(gòu)上極為相似的核酸分子(RNA)的過(guò)程,信息轉(zhuǎn)移靠的是堿基配對(duì)。這種結(jié)構(gòu)是靠氫鍵來(lái)維持的,tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)與AAtRNA的稀有堿基含量非常豐富,約有70余種。反密碼子臂是根據(jù)位于套索中央的三聯(lián)反密碼子命名的。tRNA合成酶。它不但為將每個(gè)三聯(lián)子密碼翻譯成氨基酸提供了接合體,還為準(zhǔn)確無(wú)誤地將所需氨基酸運(yùn)送到核糖體上提供了載體。如果數(shù)個(gè)密碼子同時(shí)編碼一個(gè)氨基酸,凡是第一、二位堿基不相同的密碼子都對(duì)應(yīng)于各自的tRNA。反密碼子第一位是A或C時(shí),只能識(shí)別一個(gè)密碼子。hypothesis ① 三.密碼子和反密碼子的相互作用 蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程中,tRNA的反密碼子通過(guò)堿基的反向配對(duì)與mRNA的密碼子相互作用。Synthetase)。 (3)氨基酸的“活化”與核糖體結(jié)合技術(shù)。AGU…3’由第二種讀碼方式產(chǎn)生的密碼子UAG是終止密碼,不編碼任何氨基酸,因此,只產(chǎn)生GUA(Val)或AGU(Ser)。UAG…3’ 或5’…AGUGUA…3’或5’…UAGCUU…3’分別產(chǎn)生UUC(Phe)、UCU(Ser)或CUU(Leu). 多聚三核苷酸為模板時(shí)也可能只合成2種多肽:5’…GUA5’…CUUUCUUUCGUG…3’,不管讀碼從U開(kāi)始還是從G開(kāi)始,都只能有UGU(Cys)及GUG(Val)兩種密碼子。GUG以poly(C)及poly(A)做模板分別得到多聚脯氨酸和多聚賴(lài)氨酸。 實(shí)驗(yàn)3: 以均聚物為模板指導(dǎo)多肽的合成。 (2)FrancisZameik等人證實(shí)細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。 mRNA中只有4種核苷酸,而蛋白質(zhì)中有20種氨基酸,若以一種核苷酸代表一種氨基酸,只能代表4種(41=4)。所謂翻譯是指將mRNA鏈上的核苷酸從一個(gè)特定的起始位點(diǎn)開(kāi)始,按每3個(gè)核苷酸代表一個(gè)氨基酸的原則,依次合成一條多肽鏈的過(guò)程。copies. 基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄(transcription)和翻譯(translation)兩個(gè)階段。duplicatedstrandedreplication(復(fù)制)ininformation非編碼鏈(anticodingDNA序列是遺傳信息的貯存者,它通過(guò)自主復(fù)制得到永存,并通過(guò)轉(zhuǎn)錄生成mRNA,翻譯生成蛋白質(zhì)的過(guò)程控制所有生命現(xiàn)象。Length)=中基因密度明顯低于原核和病毒。Coli Eucaryotic=4639221DNARNA Qβsmall HIVDNA 整個(gè)染色體DNA幾乎全部由功能基因與調(diào)控序列所組成;NaCl和5mol/L尿素才能與DNA解離。 b.group非組蛋白的組織專(zhuān)一性和種屬專(zhuān)一性。 ⑵非組蛋白的一般特性 染色體上除了存在大約與DNA等量的組蛋白以外,還存在大量的非組蛋白。H3的保守性也很大,鯉魚(yú)與小牛胸腺的H3只差一個(gè)氨基酸,小牛胸腺與豌豆H3只差4個(gè)氨基酸。這些組蛋白都含有大量的賴(lài)氨酸和精氨酸,其中HH4富含精氨酸,H1富含賴(lài)氨酸;H2A、H2B介于兩者之間。 3.染色體中的蛋白質(zhì) 染色體上的蛋白質(zhì)包括組蛋白和非組蛋白。所準(zhǔn)確復(fù)制,它們一般在DNA復(fù)制完成以后由telomarase合成后加到染色體末端。bp左右不精確重復(fù)序列所組成。stabilizeeukaryoticatbp、方向相同的高度重復(fù)序列所組成。在酵母中,centromere的功能單位長(zhǎng)約130由于堿基的組成不同,在CsCl密度梯度離心中易與其他DNA分開(kāi),形成含量較大的主峰及高度重復(fù)序列小峰,后者又稱(chēng)衛(wèi)星區(qū)帶(峰)。 非洲爪蟾的18S、中間隔著不轉(zhuǎn)錄的間隔區(qū),這些單位在DNA鏈上串聯(lián)重復(fù)約5000次。 ⑵中度重復(fù)序列 2.染色體中的核酸組成 ⑴不重復(fù)序列八聚體在中間,DNA分子盤(pán)繞在外,而H1則在核小體的外面。 1.染色質(zhì)和核小體 Mutations:any(表現(xiàn)型):givengeneticusuallywherehavebacteriastructuresareinarereassociationtimeproductaseachisintotal他們發(fā)現(xiàn)被感染的細(xì)菌中帶有70%的噬菌體DNA,但只帶有20%的噬菌體蛋白質(zhì)。 美國(guó)冷泉港卡內(nèi)基遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室科學(xué)家Hershey和他的學(xué)生Chase在1952年從事噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)。當(dāng)他們將經(jīng)燒煮殺死的S型細(xì)菌和活的R型細(xì)菌混合再感染小鼠時(shí),實(shí)驗(yàn)小鼠每次都死了。具有光滑外表的S型肺炎鏈球菌因?yàn)閹в星v膜多糖而都能使小鼠發(fā)病,而具有粗糙外表的R型因?yàn)闆](méi)有莢膜多糖而失去致病力(莢膜多糖能保護(hù)細(xì)菌免受運(yùn)動(dòng)白細(xì)胞攻擊)。proofreadingThismostbeenwhichintobasepaircoulderrorwouldmatchingexample,templateproperiningstages: 1,It(orbasethegeneration. DNA106bacterialpercorrespondstoratebaseonaccuracy例如,某DNA分子的一條多核苷酸鏈有100個(gè)不同的堿基組成,它們的可能排列方式就是4100。這就是嘌呤與嘧啶配對(duì),而且腺嘌呤(A)只能與胸腺嘧啶(T)配對(duì),鳥(niǎo)嘌呤(G)只能與胞嘧啶(C)配對(duì)。DNA不僅具有嚴(yán)格的化學(xué)組成,還具有特殊的高級(jí)結(jié)構(gòu),它主要以有規(guī)則的雙螺旋形式存在,其基本特點(diǎn)是:這一物質(zhì)具有很強(qiáng)的生物學(xué)活性,初步實(shí)驗(yàn)證實(shí),它很可能就是DNA(誰(shuí)能想到?。NA的組成與結(jié)構(gòu) 一個(gè)生物大分子,無(wú)論是核酸、蛋白質(zhì)或多糖,在發(fā)揮生物學(xué)功能時(shí),必須具備兩個(gè)前提:首先,它擁有特定的空間結(jié)構(gòu)(三維結(jié)構(gòu));其次,在它發(fā)揮生物學(xué)功能的過(guò)程中必定存在著結(jié)構(gòu)和構(gòu)象的變化。研究發(fā)現(xiàn),有許多基因不是將它們的內(nèi)含子全部剪去,而是在不同的細(xì)胞或不同的發(fā)育階段有選擇地剪接其中部分內(nèi)含子,因此生成不同的mRNA及蛋白質(zhì)分子。 轉(zhuǎn)錄因子是一群能與基因5’端上游特定序列專(zhuān)一結(jié)合,從而保證目的基因以特定的強(qiáng)度在特定的時(shí)間與空間表達(dá)的蛋白質(zhì)分子。在個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中生物遺傳信息的表達(dá)按一定的時(shí)序發(fā)生變化(時(shí)序調(diào)節(jié)),并隨著內(nèi)外環(huán)境的變化而不斷加以修正(環(huán)境調(diào)控)。keyword=%BF%CB%C2%A1amp。CLASS=’CHANNEL_KEYLINK’amp。DNA重組技術(shù)還被用來(lái)進(jìn)行基礎(chǔ)研究。嚴(yán)格地說(shuō),DNA重組技術(shù)并不完全等于基因工程,因?yàn)楹笳哌€包括其他可能使生物細(xì)胞基因組結(jié)構(gòu)得到改造的體系。生物體內(nèi)一切有機(jī)大分子的建成都遵循著各自特定的規(guī)則; 3.element)而獲得Nobel獎(jiǎng)。此外,他們還首次推測(cè)存在一種與DNA序列相互補(bǔ)、能將它所編碼的遺傳信息帶到蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所(細(xì)胞質(zhì))并翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)的mRNA(信使核糖核酸)。 1959年,美國(guó)科學(xué)家Uchoa第一次合成了核糖核酸,實(shí)現(xiàn)了將基因內(nèi)的遺傳信息通過(guò)RNA翻譯成蛋白質(zhì)的過(guò)程。Watson和Crick所提出的脫氧核糖酸雙螺旋模型,為充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律鋪平了道路。序論 二、現(xiàn)代分子生物學(xué)中的主要里程碑 分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等所有生物大分子的形態(tài)、結(jié)構(gòu)特征及其重要性、規(guī)律性和相互關(guān)系的科學(xué),是人類(lèi)從分子水平上真正揭開(kāi)生物世界的奧秘,由被動(dòng)地適應(yīng)自然界轉(zhuǎn)向主動(dòng)地改造和重組自然界的基礎(chǔ)學(xué)科。第一講孟德?tīng)柕倪z傳學(xué)規(guī)律最先使人們對(duì)性狀遺傳產(chǎn)生了理性認(rèn)識(shí),而Morgan的基因?qū)W說(shuō)則進(jìn)一步將性狀與基因相耦聯(lián),成為分子遺傳學(xué)的奠基石。 1910年,德國(guó)科學(xué)家Kossel第一個(gè)分離了腺嘌呤,胸腺嘧啶和組氨酸。 1965年,法國(guó)科學(xué)家Jacob和Monod提出并證實(shí)了操縱子(operon)作為調(diào)節(jié)細(xì)菌細(xì)胞代謝的分子機(jī)制。Berg(美)第一次進(jìn)行了DNA重組。gene或稱(chēng)mobileMullis由于發(fā)明PCR儀而與加拿大學(xué)者Smith(第一個(gè)設(shè)計(jì)基因定點(diǎn)突變)共享Nobel化學(xué)獎(jiǎng)。20世紀(jì)60年代、70年代和80年代,我國(guó)科學(xué)家相繼實(shí)現(xiàn)了人工全合成有生物學(xué)活性的結(jié)晶牛胰島素,解出了三方二鋅豬胰島素的晶體結(jié)構(gòu),采用有機(jī)合成與酶促相結(jié)合的方法完成了酵母丙氨酸轉(zhuǎn)移核糖核酸的人工全合成,在酶學(xué)研究、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及生物膜結(jié)構(gòu)與功能等方面都有世所矚目的建樹(shù)。構(gòu)成生物體有機(jī)大分子的單體在不同生物中都是相同的; 2. 生物大分子結(jié)構(gòu)功能結(jié)構(gòu)分子生物學(xué) DNA重組技術(shù)(又稱(chēng)基因工程) 這是20世紀(jì)70年代初興起的技術(shù)科學(xué),目的是將不同DNA片段(如某個(gè)基因或基因的一部分)按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來(lái),在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá),產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新的遺傳性狀。上千倍的地提高。NBSP。ClassID=amp。 因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子參與并控制了細(xì)胞的一切代謝活動(dòng),而決定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和合成時(shí)序的信息都由核酸(主要是脫氧核糖核酸)分子編碼,表現(xiàn)為特定的核苷酸序列,所以基因表達(dá)實(shí)質(zhì)上就是遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯?;虮磉_(dá)調(diào)控主要表現(xiàn)在信號(hào)傳導(dǎo)研究、轉(zhuǎn)錄因子研究及RNA剪輯3個(gè)方面。當(dāng)基因轉(zhuǎn)錄成premRNA后,除了在5’端加帽及3’端加多聚A[polyA]之外,還要將隔開(kāi)各個(gè)相鄰編碼區(qū)的內(nèi)含子剪去,使外顯子(編碼區(qū))相連后成為成熟mRNA。 生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究(又稱(chēng)結(jié)構(gòu)分子生物學(xué))最常見(jiàn)的研究三維結(jié)構(gòu)及其運(yùn)動(dòng)規(guī)律的手段是X射線衍射的晶體學(xué)(又稱(chēng)蛋白質(zhì)晶體學(xué)),其次是用二維核磁共振和多維核磁研究液相結(jié)構(gòu),也有人用電鏡三維重組、電子衍射、中子衍射和各種頻譜學(xué)方法研究生物高分子的空間結(jié)構(gòu)。染色體與DNA 一、溶解纖維狀物質(zhì)并重復(fù)數(shù)次,可提高其純度。核苷酸序列對(duì)DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)的形成有很大影響,如BDNA中多聚(GC)區(qū)易出現(xiàn)左手螺旋DNA(ZDNA),而反向重復(fù)的DNA片段易出現(xiàn)發(fā)卡式結(jié)構(gòu)等。 兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵相結(jié)合,形成堿基對(duì),它的組成有一定的規(guī)律。組成DNA分子的堿基雖然只有4種,它們的配對(duì)方式也只有A與T,C與G兩種,但是,由于堿基可以任何順序排列,構(gòu)成了DNA分子的多樣性。DNA聚合酶與DNA的合成 ThereliesofactualseemsThiserror1000orperimproveplementaryeithertwothethetheforrecongnizingThispresyntheticitbasenewaddedand,inhasthebase.a細(xì)菌的毒性(致病力)是由細(xì)胞表面莢膜中的多糖所決定的。再用活的粗糙型細(xì)菌(R型)來(lái)侵染小鼠,也不能使之發(fā)病,因?yàn)榇植谛图?xì)菌天然無(wú)致病力。principle)將無(wú)致病力的細(xì)菌轉(zhuǎn)化成病原細(xì)菌。噬菌體侵染細(xì)菌的過(guò)程可以分為以下5個(gè)步驟:①噬菌體用尾部的末端(基片、尾絲)吸附在細(xì)菌表面;②噬菌體通過(guò)尾軸把DNA全部注入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),噬菌體的蛋白質(zhì)外殼則留在細(xì)胞外面;③噬菌體的DNA一旦進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),它就能利用細(xì)菌的生命過(guò)程合成噬菌體自身的DNA和蛋白質(zhì);④新合成的DNA和蛋白質(zhì)外殼,能組裝成許許多多與親代完全相同的子噬菌體;⑤子代噬菌體由于細(xì)菌的解體而被釋放出來(lái),再去侵染其他細(xì)菌。Cvalue和Cot1/2 TheDNAgenomeofknowntheand50%nucleotidemolesmoleculesmacromoleculesandintomostviruseschromosomecells 任何一條染色體上都帶有許多基因,一條高等生物的染色體上可能帶有成千上萬(wàn)個(gè)基因,一個(gè)細(xì)胞中的全部基因序列及其間隔序列統(tǒng)稱(chēng)為genomes(基因組)。Thea Phenotypeof(某個(gè)特定生物體中可觀察到的物理或生理現(xiàn)象)。染色體的組成 核小體是由H2A、H2B、HH4各兩個(gè)分子生成的八聚體和由大約200bpDNA組成的。但是,109堿基對(duì),其理論長(zhǎng)度應(yīng)是180cm,這么長(zhǎng)的DNA被包含在46個(gè)51μm長(zhǎng)的圓柱體(染色體)中,其壓縮比約為104。單拷貝基因通過(guò)基因擴(kuò)增仍可合成大量的蛋白質(zhì),如一個(gè)蠶絲心蛋白基因可作為模板合成104個(gè)絲心蛋白mRNA,每個(gè)mRNA可存活4d,共合成105個(gè)絲心蛋白,這樣,在幾天之內(nèi),一個(gè)單拷貝絲心蛋白基因就可以合成109個(gè)絲心蛋白分子及組蛋白基因等都屬這一類(lèi)。這類(lèi)DNA只在真核生物中發(fā)現(xiàn),占基因組的10%—60%,由6—100個(gè)堿基組成,在DNA鏈上串聯(lián)重復(fù)幾百萬(wàn)次。 %是
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