分子生物學(xué)要點-全文預(yù)覽
【正文】 脫氧核苷三磷酸。（十）、藍(lán)白篩選的原理？答:某些質(zhì)粒帶有大腸桿菌的半乳糖苷酶基因片段，在半乳糖苷酶基因的 基因區(qū)外又另外引入了一段含多種單一限制酶位點的DNA序列。依賴DNA的RNA聚合酶:識別特異性啟動子，RNA轉(zhuǎn)錄。DNA聚合酶:催化單核苷酸鏈延伸。 v活化后的G蛋白激活PLC PLC水解PIP2生成IP3 和DGv 信號分子與受體結(jié)合，引起受體構(gòu)象變化 v 轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化及轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用:活化的ERK可以轉(zhuǎn)至細(xì)胞核內(nèi)，使某些轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子發(fā)生磷酸化，從而影響基因的轉(zhuǎn)錄。低分子量G蛋白Ras的活化:SOS可促進(jìn)Ras釋放GDP，結(jié)合GTP的反應(yīng)，使Ras激活。 （3）、mRNA運輸?shù)目刂疲ㄎ澹?、受體的特點？答:高度專一性；高度親和性；可逆性；可飽和性；特定的作用模式（六）、表皮生長因子介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑？答:表皮生長因子受體是一個典型的蛋白酪氨酸激酶受體，這個信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的主要步驟是:受體二聚化的形成及其磷酸化:表皮生長因子與受體的結(jié)合使受體發(fā)生二聚化，從而改變受體構(gòu)象，使蛋白酪氨酸激酶活性增強，受體自身的幾個蛋白酪氨酸殘基在激酶的作用下發(fā)生磷酸化。⑷反式作用因子的組合式調(diào)控作用:每一種反式作用因子結(jié)合順式作用元件后雖然可以發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用，但反式作用因子對基因調(diào)控不是由單一因子完成的而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。反式作用因子:一般具有三個功能域（DNA識別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄活性域和結(jié)合其他蛋白結(jié)合域）；能識別并結(jié)合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用元件；對基因的表達(dá)有正性或負(fù)性調(diào)控作用。（三）、真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機制？答:真核生物在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過反式作用因子、順式作用元件和RNA聚合酶的相互作用來完成的，主要是反式作用因子結(jié)合順式作用元件后影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過程。 阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié):沒有乳糖存在時，I基因編碼的阻遏蛋白結(jié)合于操縱序列O處，乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)，不能合成分解乳糖的三種酶；有乳糖存在時，乳糖 作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu)，不能結(jié)合于操縱序列，乳糖操縱子被誘導(dǎo)開放合成分解乳糖的三種酶。 種類單一；②單倍體基因組:每個基因組在病毒中只出現(xiàn)一次；③形式多樣；④大小不一；⑤基因重疊；⑥動物/細(xì)菌病毒與真核/原核基因相似:內(nèi)含子；⑦具有不規(guī)則的結(jié)構(gòu)基因；⑧基因編碼區(qū)無間隔:通過宿主及病毒本身酶切；⑨無帽狀結(jié)構(gòu)；⑩結(jié)構(gòu)基因沒有翻譯起始序列。核酸探針是指能識別特異堿基順序的帶有標(biāo)記的一段DNA或RNA分子。4 細(xì)胞全能性:指同一種生物的所有細(xì)胞都含有相同的DNA，即基因的數(shù)目和種類是一樣的，但在不同階段，同一個體的不同組織和器官中基因表達(dá)的種類和數(shù)目是不同的。4三鏈DNA:當(dāng)某一DNA或RNA寡核苷酸與DNA高嘌呤區(qū)可結(jié)合形成三鏈，能特異地結(jié)合在DNA的大溝中，并與富含嘌呤鏈上的堿基形成氫鍵。3基因治療:一般是指將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定的靶細(xì)胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的治療方法。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對病毒無復(fù)制作用，但是當(dāng)受到外界的條件激活時可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。包括病毒癌基因和細(xì)胞癌基因。3同義突變:堿基對的取代并不都是引起錯義突變和翻譯終止，有時雖然有堿基被取代，但在蛋白質(zhì)水平上沒有引起變化，氨基酸沒有被取代，這是因為突變后的密碼子和原來的密碼子代表同一個氨基酸的突變。2 DNA芯片：DNA芯片技術(shù)是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后與標(biāo)記的樣品雜 交，通過對雜交信號的檢測分析，即可獲得樣品的遺傳信息?？梢蕴岣逷CR的效率和特異性。2 DNA變性:在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價鍵則不受影響。1 轉(zhuǎn)化:指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過程。1 蛋白激酶:是指能夠?qū)⒘姿峒瘓F從磷酸供體分子轉(zhuǎn)移到底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。 信息分子:調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動的化學(xué)物質(zhì)。啟動子:是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列。4操縱子:是指數(shù)個功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)（包括啟動子和操縱基因）以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號所構(gòu)成的基因表達(dá)單位，所轉(zhuǎn)錄的RNA為多順反子。分子生物學(xué)要點一、名詞解釋：基因:能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，是決定遺傳性狀的功能單位。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細(xì)胞染色體末端存在。 反式作用因子:是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。 基因表達(dá):是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過程。1分子克隆:在體外對DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。1 載體:能在連接酶的作用下和外源DNA片段連接并運送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。 轉(zhuǎn)染:指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程。2筑巢PCR:先用一對外側(cè)引物擴增含目的基因的大片段，再用內(nèi)側(cè)引物以大片段為摸板擴增獲取目的基因。27基因打靶:是指通過DNA定點同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能。無義突變:由于堿基對的取代，使原來可以翻譯某種氨基酸的密碼子變成了終止密碼子的突變。當(dāng)癌基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)發(fā)生異常時，其產(chǎn)物可使細(xì)胞無限制增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。3病毒癌基因:存在于病毒（大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒）基因組中能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。若因此而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長度和數(shù)量發(fā)生變化，稱為RFLP。核酶:是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。4管家基因:在生物體生命的全過程都是必須的，且在一個生物個體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因。4核酸探針:探針是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用，并在相互作用之后可以檢測出來的生物大分子。50、順反子5結(jié)構(gòu)域二、 問答題（一）、病毒、
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