細(xì)胞生物學(xué)系列常見問題及解決方法-全文預(yù)覽
【正文】 與游離的 Ca2+形成磷酸鈣沉淀。 4)、熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀分析只剩下很少的細(xì)胞 a)、在操作過程中丟失大量細(xì)胞：提高起始的細(xì)胞量。 b)、延長標(biāo)記時(shí)間至 2h，并適當(dāng)增加 TdT酶及 dUTP的含量。 c)、在操作過程中保持細(xì)胞濕潤；標(biāo)記反應(yīng)完成，載玻片在用 PBS洗一遍之后，可再用含 % Triton174。 b)、適當(dāng)減少 TdT酶及 dUTP的用量。m時(shí)，通透 10~30min即可，如果過厚則延長通透時(shí)間。在展片之前，用 3氨丙基三乙氧基硅烷包被顯微鏡載玻片比多聚賴氨酸效果更好。 b)、貼壁細(xì)胞消化不當(dāng)： AnnexinV跟 PS的結(jié)合需要 Ca2+離子，但大多數(shù)胰酶中含Ca2+的絡(luò)合劑 EDTA，從而影響染色，建議使用無 EDTA的胰酶。 2)、假陽性 a)、細(xì)胞本身活力差：建議用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)算細(xì)胞的活力，臺(tái)盼藍(lán)拒染的細(xì)胞應(yīng)大于 95%。 三、 Cell Cycle Assay Kit 1)、 G0/G1突然發(fā)生變化或漂移 a)、流式細(xì)胞儀管路中有氣泡或被阻塞：建議檢查管路是否通暢或是否有氣泡 b)、 PI濃度不夠：建議增加 PI的濃度 c)、與 PI孵育的時(shí)
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