熒光定量pcr在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用-全文預(yù)覽
【正文】 氨酸（ V）形成 YIDD變異株或 YVDD變異株 。 ? 此外拉米夫定還能抑制肝移植受體和 AIDS病人體內(nèi)的 HBV復(fù)制。 ? 目前國(guó)際醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的治療慢性乙肝有確切療效的抗病毒藥物主要有兩大類： ?干擾素：重組人 α 1b干擾素、 α 2a、 α 2b干擾素等。 HBV DNA檢測(cè)方法 ? 斑點(diǎn)雜交（基本淘汰） ? 定性 PCR（基本淘汰） ? 熒光定量 PCR（主流） ? 基因芯片（將來？） 為什么建議病人要進(jìn)行 HBV DNA檢測(cè)？ 熒光定量 PCR方法檢測(cè) HBV感染的各期 血清標(biāo)本 Copies/ml HBeAg陽性慢性乙型肝炎病人 x 108 經(jīng) α 干擾素治療后 HBeAg轉(zhuǎn)陰 x 103 非活動(dòng)性 HBsAg攜帶者血清 x 103 原先血中 HBV DNA陽性，已痊愈超過 12個(gè)月的血清 103 HBsAg和 HBeAg均陽性而 HBV DNA陰性？ ? 干擾素或拉米夫定等治療后病毒復(fù)制受抑制。 HBV DNA 是病毒復(fù)制和傳染性的直接標(biāo)志。 ? 但長(zhǎng)期抗 HBe陽性者并不代表病毒復(fù)制停止或無傳染性，研究顯示 20%～ 50%仍可檢測(cè)到HBV DNA，部分可能由于前 C區(qū)基因變異，導(dǎo)致不能形成 HBeAg。或者是亞型感染。只要 HBsAg陽性就可診斷 HBV感染，陰性則不能排除 HBV感染。 PCR技術(shù)通過兩個(gè)短的稱為引物的 DNA小片段和一種耐熱酶的作用，可在 3個(gè)小時(shí)內(nèi)把特定的 DNA片段擴(kuò)增 1000萬倍。 ? Polymerase chain reaction(PCR)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種 DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)。 熒光染料： SYBR Green I、 EVA Green 熒光探針： TaqMan、 Hybridization Probes 、 Molecular Beacon 熒光定量 PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) ? 特異性強(qiáng)：直接擴(kuò)增病原體的特異 DNA或異?；蚱? ? 靈敏度高：可檢測(cè)到極少量的 DNA，有效降低漏診率 ? 高效省時(shí)：擴(kuò)增周期短，有利于快速診斷 ? 取材范圍廣：血清、痰液、體液、毛發(fā)等多種樣本 ? 全封閉反應(yīng)：無需 PCR后處理，降低污染 ? 定量準(zhǔn)確：利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法，采用對(duì)數(shù)期分析 ? 自動(dòng)化程度高：操作安全，避免人為判斷 Roche LightCycler 熒光定量 PCR技術(shù)的臨床應(yīng)用 ? 病毒性 肝炎 （ HBV、 HBVYMDD、 HCV）的基因檢測(cè) ? 性病相關(guān)病原體（ CT、 NG、 UU、 HPV）的基因檢測(cè) ? 優(yōu)生優(yōu)育項(xiàng)目診斷：人巨細(xì)胞病毒（ HCMV） 、單純皰疹病毒 II型（ HSV） 、弓形蟲（ TOX）、風(fēng)疹病毒 ? 其它病原體檢測(cè)：結(jié)核桿菌、肺炎支原體、 EB病毒、傷寒桿菌、幽門螺旋桿菌等 乙型肝炎的病原檢測(cè) 乙肝病毒 P a rt i a l l y doub l e s t ra nded D N AA ( n)附著和侵入？( ) DNA分泌？m R N Acc cD NA 的形成
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