熒光定量pcr在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用-免費閱讀
【正文】 常見性傳播疾病病原體 ? 淋病雙球菌 (NG) ? 沙眼衣原體 (CT) ? 解脲支原體 (UU) ? 人類乳頭瘤病毒 (HPV) ? 人類免疫缺陷病毒 (HIV) 淋病雙球菌的傳統(tǒng)檢測方法 ? 涂片染色：對于女性患者檢出率低，易出現(xiàn)假陰性 ? 分離培養(yǎng)：培養(yǎng)較困難，生化鑒定復(fù)雜，時間長 ? ELISA抗原檢測法：存在交叉反應(yīng)，非特異反應(yīng)較嚴(yán)重 熒光定量 PCR檢測 NG的優(yōu)勢 ? 可在短時間內(nèi)快速、準(zhǔn)確地直接從臨床各種標(biāo)本中檢出含量極低的病原菌 ? 對女性疑似淋球菌引起的各種炎癥的診斷及鑒別診斷起決定性作用 ? 對癥狀輕者或無癥狀的淋球菌感染者做到早期診斷和鑒別診斷 ? 可用于療效考核 沙眼衣原體 沙眼衣原體感染與致病 ? 近年來在歐美等國，沙眼衣原體的感染率和危害性已超過淋球菌 ? 在我國，在非淋球菌性尿道炎中居首位 ? 泌尿生殖道感染，妨礙妊娠 ? 盆腔感染，可致生殖能力損害 傳統(tǒng)方法檢測沙眼衣原體的缺陷 ? “ 窗口期”檢測不出 ? 不能判定是現(xiàn)癥感染還是既往感染 熒光定量 PCR檢測衣原體的優(yōu)勢 ? 靈敏度 98%以上、特異性 100% ? 提高陽性檢出率 ? 適用于感染的早期診斷和無癥狀攜帶者的檢查 解脲支原體 ? UU難以分離，需特殊培養(yǎng)基培養(yǎng)，操作費時，需 13天才能得到初步結(jié)果。 HCV RNA熒光定量 PCR檢測的臨床意義 ? 早期診斷：在免疫學(xué)檢測的“窗口期”或一部分不產(chǎn)生抗體的丙肝病毒攜帶者，都可出現(xiàn) HCV RNA陽性，抗 HCV陰性的檢測結(jié)果。 ? 治療 1年后 HBeAg陰轉(zhuǎn)率約為 20%。 乙肝的治療 ? 目前尚無一種能迅速、直接殺死清除乙肝病毒的藥物，最好的抗病毒藥物療效也僅能達(dá)到 50％左右。 ? HBsAg陰性或 HBeAg陰性不能排除 HBV感染。 HBsAg和抗 HBs同時陽性： HBV感染恢復(fù)期，此時 HBsAg未消失，抗 HBs已產(chǎn)生。 ? Polymerase chain reaction(PCR)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種 DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)。只要 HBsAg陽性就可診斷 HBV感染，陰性則不能排除 HBV感染。 ? 但長期抗 HBe陽性者并不代表病毒復(fù)制停止或無傳染性，研究顯示 20%～ 50%仍可檢測到HBV DNA，部分可能由于前 C區(qū)基因變異，導(dǎo)致不能形成 HBeAg。 HBV DNA檢測方法 ? 斑點雜交（基本淘汰） ? 定性 PCR（基本淘汰） ? 熒光定量 PCR（主流） ? 基因芯片（將來？） 為什么建議病人要進(jìn)行 HBV DNA檢測？ 熒光定量 PCR方法檢測 HBV感染的各期 血清標(biāo)本 Copies/ml HBeAg陽性慢性乙型肝炎病人 x 108 經(jīng) α 干擾素治療后 HBeAg轉(zhuǎn)陰 x 103 非活動性 HBsAg攜帶者血清 x 103 原先血中 HBV DNA陽性，已痊愈超過 12個月的血清 103 HBsAg和 HBeAg均陽性而 HBV DNA陰性？ ? 干擾素或拉米夫定等治療后病毒復(fù)制受抑制。 ? 此外拉米夫定還能抑制肝
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