【正文】 （國(guó)際臨 床化學(xué)聯(lián)合會(huì) IFCC參考方法） →乳酸丙酮酸底物法（ P→ L） 中性條件下，乳酸脫氫酶催化丙酮酸生成 L乳酸，同時(shí)將 NADH（還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸）氧化成 NAD+（氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸）。 一、適用范圍 乳酸脫氫酶測(cè)定試劑盒是指基于分光光度法原理，利用全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀或分光光度計(jì)，對(duì)血清、血漿或其他體液中的乳酸脫氫酶活性進(jìn)行體外定量分析的試劑。 本指導(dǎo)原則是對(duì)乳酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。 （六）臨床試驗(yàn)采用的樣本類(lèi)型是否滿足產(chǎn)品聲稱(chēng)的預(yù)期用途，樣本量及臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇、對(duì)比試劑的選擇、統(tǒng)計(jì)方法及研究結(jié)果、臨床方案及報(bào)告撰寫(xiě)的格式等是否符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》 （國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 16 號(hào)）或《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（試行）》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 179 號(hào)）對(duì)相關(guān)內(nèi)容的規(guī)定。 （二）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的編寫(xiě)內(nèi)容及格式是否符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2021 年第 17 號(hào)）的要求。 18.【醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào) /產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)】注明該產(chǎn)品的注冊(cè)證編號(hào) /產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)。參考文獻(xiàn)的格式參考論文規(guī)范要求。 、樣本保存及處理等其他注意事項(xiàng)。 14.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容： 。 。 11.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】對(duì)所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋?zhuān)? 本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不得作為患者病情評(píng)價(jià)的唯一指標(biāo)，對(duì)患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀 /體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及 治療反應(yīng)等情況綜合考慮。對(duì)適用于具有校準(zhǔn)曲線保存功能檢測(cè)儀器的產(chǎn)品，應(yīng)注明校準(zhǔn)周期。 試劑準(zhǔn)備及配制方法、注意事項(xiàng)。 樣本處理、運(yùn)送及保存：明確樣本處理方法、樣本的保存條件及期限（短期、長(zhǎng)期）等。 7.【適用儀器】說(shuō)明可適用的儀器及型號(hào)，應(yīng)寫(xiě)明具體適用儀器的型號(hào)，不能泛指某一系列儀器。 對(duì)于可以冷凍的試劑盒應(yīng)注明凍融次數(shù)限制。質(zhì)控品的靶值范圍如為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值單。如可互換，應(yīng)提交相關(guān)驗(yàn)證材料。注：臨床適應(yīng)癥相關(guān)信息應(yīng)提供文獻(xiàn)出處（標(biāo)注并在【參考文獻(xiàn)】列出）。如僅單一包裝規(guī)格，其后可以不加標(biāo)點(diǎn)符號(hào)。 2.【包裝規(guī)格】（ 1）應(yīng)與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格及型號(hào)一致。 1.【產(chǎn)品名稱(chēng)】（ 1）通用名稱(chēng)：試劑盒名稱(chēng)由三部分組成：被測(cè)物名稱(chēng)、用途、方法或原理。 （十一）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)說(shuō)明書(shū)承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本要求、檢驗(yàn)方法、檢測(cè)結(jié)果的解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo) 使用者正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。 （十）產(chǎn)品注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告根據(jù)《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件 格式的公告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021 年第 44 號(hào)）的要求，首次申請(qǐng)注冊(cè)的第二類(lèi)產(chǎn)品應(yīng)該在國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門(mén)認(rèn)可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行樣品的注冊(cè)檢測(cè)。若有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品、參考品，準(zhǔn)確度首選國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品、參考品進(jìn)行評(píng)估。 ：風(fēng)險(xiǎn)管理小組下達(dá)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)審結(jié)論。 ：對(duì)風(fēng)險(xiǎn)控制措施的有效性進(jìn)行驗(yàn)證分析。 ：明確風(fēng)險(xiǎn)可接受的準(zhǔn)則。具體撰寫(xiě)內(nèi)容應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 16號(hào)）的要求。醫(yī)學(xué)決定水平處相對(duì)偏倚應(yīng)不大于允許誤差（建議參照1/2CLIA’ 8 1/2 室間質(zhì)評(píng)可接受范圍、 1/2 來(lái)源于生物變異的總允許誤差、衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、準(zhǔn)確度相對(duì)偏差等相關(guān)要求設(shè)定允許誤差）。 /偏態(tài)分布情況選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，如離群值判斷、相關(guān)分析、線性回歸、 BlandAlraman分析（如絕對(duì)偏倚 /偏差及相對(duì)偏倚 /偏差分析）等。 各種類(lèi)型的樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑線性范圍，盡可能均勻分布。 應(yīng)考慮樣本量的分布，各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)樣本量和樣本分布應(yīng)相對(duì)均衡。在試驗(yàn)操作過(guò)程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法及樣本隨機(jī)分配以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。 ，研究人員應(yīng)從臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。對(duì)比試劑盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍、參考區(qū)間及精密度等性能接近的同類(lèi)產(chǎn)品。 （七）臨床評(píng)價(jià)資料根據(jù)《關(guān)于公布新修訂免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)醫(yī)療器械目錄的通告》（國(guó)家藥品監(jiān)督管理局通告 2021 年第 94 號(hào)），抗甲狀腺過(guò)氧化物酶（ TPO）抗體檢測(cè)試劑可免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)，申請(qǐng)人可依照《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（試行 ）》開(kāi)展評(píng)價(jià)。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論，應(yīng)涵蓋產(chǎn)品中受穩(wěn)定性影響的性能指標(biāo)（如準(zhǔn)確度、線性、重復(fù)性、檢出限等）。 參考值研究結(jié)果應(yīng)在說(shuō)明書(shū)【參考區(qū)間】項(xiàng)中進(jìn)行相應(yīng)說(shuō)明。 （五）參考區(qū)間確定資 料參考區(qū)間確定所采用的樣本來(lái)源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。方法為對(duì)比線性范圍內(nèi)的同一病人的血清和血漿樣本，樣本濃度應(yīng)均勻分布且包含醫(yī)學(xué)決定水平以及低值濃度，以驗(yàn)證申報(bào)試劑盒對(duì)于血清和血漿樣本檢測(cè)結(jié)果的一致性。 （如適用）參照 GB/T21415— 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度計(jì)算相關(guān)資料，提供質(zhì)控品賦值及其質(zhì)控范圍確定的相關(guān)資料。 （ HOOK）效應(yīng)（如適用）說(shuō)明不會(huì)產(chǎn)生 HOOK 效應(yīng)的濃度上限或相關(guān)研究，如需稀釋?zhuān)瑧?yīng)注明對(duì)稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例。干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體樣本生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度。 CV=SD/M 100%????????（ 3） 3 個(gè)批號(hào)的試劑盒分別檢測(cè)濃不同濃度（建議與重復(fù)性樣本濃度的選擇一致）的樣本，各重復(fù) 10 次，計(jì)算每個(gè)濃度樣本 30 次測(cè)量結(jié)果的平均值（ M）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），根據(jù)公式（ 3）得出變異系數(shù)（ CV），應(yīng)不大于 15%。 ，兩個(gè)濃度都應(yīng)在試劑的測(cè)量范圍內(nèi) ，且有一定的臨床意義，通常選用該檢測(cè)指標(biāo)的正常參考值附近樣本和病理高值樣本，建議采用濃度為（ 30177。建立一種定量測(cè)定方法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇 7— 11 個(gè)濃度水平。建議使用國(guó)際參考品 /國(guó)家參考品進(jìn)行梯度稀釋并進(jìn)行至少 60 次檢測(cè) ， 95%以上的檢測(cè)結(jié)果高于空白限作為檢出限。 （ LOD）申請(qǐng)人應(yīng)評(píng)估空白限（ LOB）和檢出限（ LOD）。 方法：選擇接近參考區(qū)間的常規(guī)檢測(cè)樣本，分為體積 相同的 3— 4份，在其中 2— 3份樣本中加入不同濃度相同體積的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的 10%，制成 2— 3 個(gè)不同濃度的待回收分析樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。 比對(duì)試驗(yàn)參考體外診斷試劑分析性能評(píng)估相關(guān)技術(shù)審查指導(dǎo)原則的要求完成準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對(duì)）評(píng)估。如果大于等于 2 次的結(jié)果不合格，即判為不合格。 對(duì)于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)【適用儀器】項(xiàng)中所列的所有型號(hào)儀器的性能評(píng)估資料。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測(cè)，申請(qǐng)人還應(yīng)對(duì)可用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過(guò)試驗(yàn)確定樣本稀釋基質(zhì)或處理方法。 。明確校準(zhǔn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并提供校準(zhǔn)品的溯源性文件，校準(zhǔn)品應(yīng)溯源至現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品。如抗原 /抗體為申請(qǐng)人自制，則應(yīng)詳述抗原 /抗體的名稱(chēng)及生物學(xué)來(lái)源，申請(qǐng)人對(duì)該抗原 /抗體技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價(jià)等），且其生產(chǎn)工藝必須相對(duì)穩(wěn)定，并對(duì)其工藝有相關(guān)的驗(yàn)證。目前認(rèn)為， AntiTPO 抗體為人類(lèi)自身免疫性甲狀腺炎較理想的標(biāo)志抗體，陽(yáng)性結(jié)果可用于自身免疫性甲狀腺疾病的輔助診斷。 TPO 也是自身免疫性甲狀腺疾病一種重要的自身抗 原 ， 可 以 刺 激 機(jī) 體 免 疫 系 統(tǒng) 產(chǎn) 生 抗 TPO 抗體（ Antibodiestothyroidperoxidase， AntiTPO）。 （二）化學(xué)發(fā)光免疫分析法原理之外的其他抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體測(cè)定試劑盒。化學(xué)發(fā)光免疫分析法主要有直接化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光、酶促間接化學(xué)發(fā)光等。 本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。 本指導(dǎo)原則是對(duì)抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體測(cè)定試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。 一、適用范圍從方法學(xué)考慮，在本文中抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體測(cè)定試劑盒是指采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，利用全自動(dòng)、半自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，對(duì)人血清或血漿等樣本中抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體的含量進(jìn)行體外定量分析的試劑。 本指導(dǎo)原則不適用于： （一）單獨(dú)申請(qǐng)注冊(cè)的抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。該酶可與甲狀腺球蛋白（ Thyroglobulin， Tg）協(xié)同作用將 L酪氨酸碘化，并將一碘酪氨酸和二碘酪氨酸聯(lián)結(jié)成為甲狀腺激素 T T3 和 rT3。 AntiTPO抗體主要以 IgG 類(lèi)為主，該抗體主要見(jiàn)于自身免疫性甲狀腺病，如橋本甲狀腺炎（陽(yáng)性率 85%~100%）、 Graves ?。?yáng)性率 65%）、原發(fā)性黏液性水腫患者； 也見(jiàn)于其他器官特異性自身免疫病，如 1型糖尿?。?yáng)性率 14%）、Addison ?。?yáng)性率 31%）、惡性貧血（陽(yáng)性率 55%） 及產(chǎn)后甲狀腺炎（陽(yáng)性率 15%）等。 （二）主要原材料研究資料（如需提供） /抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料。 GB/T21415— 2021/ISO17511： 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來(lái)源、賦值過(guò)程和相應(yīng)指標(biāo)、以及不確定度等內(nèi)容。 ，可以流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。 ：申請(qǐng)人應(yīng)考慮樣本加樣方式、加樣量以及試劑添加順序、添加量對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定最佳的樣本及試劑的添加方式和添加量。建議選擇不少于 3 批產(chǎn)品對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究，包括檢出限、線性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性、批間差、特異性等指標(biāo)。如果 3 次結(jié)果都符合要求，即判為合格。 注：優(yōu)先考慮使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品、參考品。 回收實(shí)驗(yàn)參考體外診斷試劑分析性能評(píng)估相關(guān)技術(shù)審查指導(dǎo)原則要求完成準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）評(píng)估。 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告： 用公式（ 2）計(jì)算回收率： ??（ 2）式中： R— 回收率； V— 加入待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液的體積； V0— 基礎(chǔ)樣本的體積 C— 基礎(chǔ)樣本加入待測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后的檢測(cè)濃度； C0— 基礎(chǔ)樣本的檢測(cè)濃度； Cs— 待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液的濃度。 檢出限的確立可采用系列稀釋參考品的方法進(jìn)行。 測(cè)的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的人血清 /血漿，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對(duì)樣本基質(zhì)的影響。按試劑說(shuō)明書(shū)操作，對(duì)每一濃度的樣本均重復(fù)檢測(cè)不少于 2 次，計(jì)算其平均值，將結(jié)果平均值和稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，計(jì)算線性相關(guān)系數(shù) r，應(yīng)不低于，線性區(qū)間應(yīng)不窄于 [12， 400]IU/mL。 分別用不同濃度的樣本各重復(fù)檢測(cè) 10 次，計(jì)算 10 次測(cè)量結(jié)果的平均值（ M）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），根據(jù)公式（ 3）得出變異系數(shù)（ CV）。 干擾物質(zhì)：樣本中常見(jiàn)干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如血紅蛋白、高脂、黃疸、類(lèi)風(fēng)濕因子、抗核抗體、嗜異性抗體、總蛋白以及說(shuō)明書(shū)中聲稱(chēng)其他的干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。方法為對(duì)模擬添加樣本分別進(jìn)行驗(yàn)證，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明樣本的制備方法及干擾試驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo) 準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度，被測(cè)物濃度至少應(yīng)包括其醫(yī)學(xué)決定水平的濃度。 過(guò)度稀釋可能影響樣本基質(zhì)，研究過(guò)程應(yīng)注意基質(zhì)效應(yīng)影響，必要時(shí)應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。 （如適用）如果試劑盒適用樣本類(lèi)型包括血漿樣本，應(yīng)采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究 ，樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體研究方法建議參考相關(guān)國(guó)內(nèi)外有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件進(jìn)行。建議參考 CLSIC28A3c或 WS/T4022021《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》進(jìn)行相應(yīng)研究。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有