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病理組織工作站(文件)

2024-11-05 01:18 上一頁面

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【正文】 的蘇木精配方,染色性能好,保持時(shí)間長,是世界上唯一的常規(guī)細(xì)胞核染料,2.蘇木精的配制蘇木精的配方很多,可根據(jù)不同需要選用,Harris配方最常用。(3)Gill改良蘇木精染液的配制 蘇木精2g無水乙醇250ml 硫酸鋁鉀17g 蒸餾水750ml 冰醋酸20ml先將蘇木精溶于無水乙醇,再將硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中。用乙醇性伊紅液染細(xì)胞漿后不可經(jīng)水洗直接用85%酒精脫水。(2)染色石蠟切片經(jīng)水洗后放入Harris蘇木精染色,一般情況下在新配的蘇木精溶液中只需要染1min左右,應(yīng)根據(jù)染片的多少,逐步把染色時(shí)間延長。(4)透明與封片石蠟組織切片染色經(jīng)過脫水后必須經(jīng)二甲苯處理,使切片透明,才能用樹膠封片。封片中不能對(duì)著切片呼氣。方法:選取2013年1月2015年1月我院收治的腫瘤患者50例,分別采用活檢穿刺和免疫組織化學(xué)技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn),比較兩種方法的檢測(cè)陽性率。 選取2013年1月2015年1月我院收治的腫瘤患者50例,分別采用活檢穿刺和免疫組織化學(xué)技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn),比較兩種方法的檢測(cè)陽性率。免疫組織化學(xué)技術(shù):取每例患者的一塊組織,采用10%的中性緩沖甲醛固定液固定兩小時(shí),固定完成后用脫水也脫水1個(gè)小時(shí),分別在透明液和浸蠟液中各放置一個(gè)小時(shí),然后用石蠟包埋,采用常規(guī)的切片方法切片,切片的厚度為2um。免疫組織化學(xué)顯色是一種酶促反應(yīng),抗原抗體的復(fù)合物的堿性磷酸酶和過氧化物與底物反應(yīng),就生產(chǎn)了一種由顏色的復(fù)合物,沉淀在組織或者細(xì)胞中的抗原位置。免疫組織化學(xué)技術(shù)是一門新興的技術(shù),還存在著一些不完善的地方,例如在檢查瘤細(xì)胞的時(shí)候,瘤細(xì)胞內(nèi)可能含有多種抗原,而抗體只會(huì)對(duì)特異性的抗原反應(yīng)表達(dá),所以很多時(shí)候會(huì)受到交叉反應(yīng)的干擾,所以免疫組織化學(xué)技術(shù)在病理診斷中也具有一定的局限性,但是由于技術(shù)人員在操作上的失誤導(dǎo)致的誤診是可以避免的。而突變型P2P53的表達(dá)的蛋白如果在多種腫瘤過度表達(dá)則說明腫瘤細(xì)胞的生長速度非常快,并且發(fā)生了轉(zhuǎn)移,惡性程度較高?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】[1]徐松,李海,陳芳,張陽,[J].中國實(shí)用醫(yī)刊,2013,40(2):114115.[2]蘭蕾,常小榮,張國山,[J].中華中醫(yī)藥雜志,2012,27(4):1042047.[3][J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè),2013,36(51):35.[4]趙亮,戴朝六,彭松林,[J].山東醫(yī)藥,2012,52(20):5456.[5]]周猜瑋,張永樂,李冰茄,黃從想,、HBeAg的關(guān)系[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2011,21(5):2071208.第五篇:組織病理技術(shù)名解病理學(xué):病理學(xué)是研究疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律的學(xué)科,主要的研究范圍是疾病發(fā)生發(fā)展過程中組織、細(xì)胞代謝、功能及結(jié)構(gòu)的變化。透明:組織經(jīng)酒精脫水后,還必須經(jīng)過一個(gè)媒劑透明過程浸蠟:經(jīng)過透明的組織塊,進(jìn)一步移入熔化的石蠟內(nèi)浸漬,稱為浸蠟。HE染色(常規(guī)染色):使用蘇木精hematoxlin和伊紅eosin染色,主要用以顯示各種組織、細(xì)胞的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)以及疾病過程中病變的發(fā)生、發(fā)展及修復(fù)的過程??乖迯?fù)能最大程度地恢復(fù)在制片等過程中損失的抗原性,使原來認(rèn)為不能在石蠟切片上進(jìn)行IHC的許多抗體獲得了良好的染色結(jié)果,成為一種有效的補(bǔ)救措 施,ARIHC已廣泛應(yīng)用于臨床的研究中。PAP法(PeroxidaseAntiperoxidase Method):一抗 + 二抗 + PAP復(fù)合物(HRP + 抗HRP抗體[與一抗統(tǒng)一種屬])+ HRP底物顯色LAB法(Labelled AvidinBiotin Method):一抗 + 生物素標(biāo)記二抗 + HRP標(biāo)記抗生物素 + HRP底物顯色SP法(StreptavidinPeroxidase Methed):一抗 + 生物素標(biāo)記二抗 + HRP標(biāo)記鏈霉親和素 + HRP底物顯色ABC法(AvidinBiotinperoxidase Complex Method):一抗 + 生物素標(biāo)記二抗 + ABC復(fù)合物(抗生物素 + HRP標(biāo)記生物素)+ HRP底物顯色SABC法(StreptavidinBiotinperoxidase Complex Methed):一抗 + 生物素標(biāo)記二抗 + SABC復(fù)合物(鏈霉親和素+ HRP標(biāo)記生物素)+ HRP底物顯色非特異性染色nonspecific staining:染色過程中出現(xiàn)的不屬于特異性抗原抗體反應(yīng)的著色(假陽性,背景著色)。陰性對(duì)照還有空白對(duì)照,替代對(duì)照,吸收對(duì)照,抑制實(shí)驗(yàn)等自身對(duì)照:在同一標(biāo)本切片上,靶抗原的陽性反應(yīng)與其他無關(guān)結(jié)構(gòu)或成分的陰性結(jié)果形成鮮明對(duì)照。熱修復(fù):消除甲醛固定形成的蛋白分子的交聯(lián)(共價(jià)鍵分子引力),削弱或打斷鈣離子化學(xué)鍵,恢復(fù)抗原分子的自然構(gòu)象和抗原性。吸收對(duì)照:用相應(yīng)的純化抗原(過量)中和吸收特異性第一抗體,使其結(jié)合點(diǎn)全部被外源性抗原結(jié)合,不能再與組織內(nèi)的靶抗原反應(yīng),用這種吸收后的第一抗體作免疫組化染色,結(jié)果應(yīng)為陰性。陽性對(duì)照 positive control用已知抗原陽性的標(biāo)本與待檢測(cè)標(biāo)本同時(shí)免疫組化染色,結(jié)果陽性者。抗體:受抗原刺激后B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的與相應(yīng)抗原反應(yīng)的球蛋白Envision法:EnVision法又稱為ELPS法(enhance labeled polymer system),抗原—抗體反應(yīng)結(jié)合后,第二抗體上標(biāo)記有多聚化合物(葡聚糖)酶復(fù)合物(EnVision復(fù)合物),與第一抗體結(jié)合,進(jìn)而由酶作用底物進(jìn)行顯色定位??乖迯?fù):組織在制作過程中,由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來,為了解決上述的問題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復(fù)。組織芯片:又稱組織微列陣,是將數(shù)十個(gè)、數(shù)百個(gè)、乃至上千個(gè)小的組織片整齊的排列在某一載體上(通常是載波片)而成的微縮組織切片。組織的固定:將各種組織浸入某些化學(xué)試劑內(nèi),使細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)能盡量保持其生活狀態(tài)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置,叫做固定。免疫組織化學(xué)技術(shù)通過觀察抗體對(duì)特異性抗原的顏色反應(yīng)來對(duì)組織的抗原進(jìn)行診斷,與傳統(tǒng)的病理診斷相比具有優(yōu)越性。免疫組織化學(xué)技術(shù)在腫瘤患者的預(yù)后中也發(fā)揮著非常重要的作用,可以提供很多有效的預(yù)后信息[4]。值得注意的是,在整個(gè)染色過程中,切片應(yīng)該一直保持濕潤,在孵育的過程中,孵育盒中的蒸餾水量要合理的放置,孵育盒要放平,保證抗體液體在組織上的均勻性,避免抗體流到組織的一旁造成假陰性的結(jié)果。兩組檢驗(yàn)方法的統(tǒng)計(jì)方法為:采用 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P50例患者,經(jīng)穿刺活檢,AFP、Glypican3陽性的有32例,%,經(jīng)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢驗(yàn),47例患者的細(xì)胞組織呈現(xiàn)變異性,%,免疫組織化學(xué)技術(shù)檢驗(yàn)的陽性率明顯高于穿刺活檢的陽性率,比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P免疫組織化學(xué)染色是近年來發(fā)展起來的一種病理技術(shù),是病理診斷中的一種常見方法,尤其在腫瘤的診斷中具有較高的實(shí)際價(jià)值。)歲;其中轉(zhuǎn)移性腫瘤26例,肝細(xì)胞肝癌19例,血管瘤8例,子宮癌13例
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