【正文】 ，共一百零二頁(yè)。,熒光免疫分析法(FIA) 克服了放射免疫法中的核輻射缺點(diǎn)。 缺點(diǎn)是對(duì)溫度的強(qiáng)烈依賴性和熒光強(qiáng)度取決于激發(fā)波長(zhǎng)，因此在藥物分析方面應(yīng)用較少。最大特點(diǎn)是單份測(cè)定、簡(jiǎn)單快速、特異敏感，10min左右就可以看到顏色鮮明(xiānm237。,膠體金免疫(miǎny236。,7.2.2 抗生素,廣義抗生素包括微生物的抗生素〔抗細(xì)菌、抗真菌、抗立克次體、抗衣原體和抗病毒等〕和抗腫瘤抗生素。,抗生素的分類(fēn l232。 β內(nèi)酰胺類是破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的繁殖期殺菌性抗生素。但是青霉素類會(huì)使一些敏感個(gè)體產(chǎn)生十分劇烈的過(guò)敏反響?？诜妆晃杆崞茐?，吸收(xīshōu)極少；肌肉注射吸收(xīshōu)快而全，分布于細(xì)胞外液，腦膜炎時(shí)可透入腦脊液；由腎小管主動(dòng)分泌而排泄，此過(guò)程受丙磺舒影響。 抗菌作用：青霉素G主要對(duì)G+細(xì)菌和G球菌有效，特別是繁殖旺盛(w224。,臨床應(yīng)用：主治G+菌感染，對(duì)G球菌感染如淋病、流腦也有良效；對(duì)梅毒、回歸熱、鉤端螺旋體感染也有特效。,第七十頁(yè)，共一百零二頁(yè)。ng)大氣壓電離源(APCI、ESI等〕HPLCMS具有測(cè)定小于109級(jí)β內(nèi)酰胺類殘留的能力。取上清液與等體積的0.1M磷酸緩沖溶液〔pH9.2〕混勻。 質(zhì)譜：錐體電壓為1820V，碰撞能量1024ev。其作用機(jī)制主要是抑制細(xì)菌(x236。其中米諾環(huán)素的抗菌作用最強(qiáng)，多西環(huán)素其次，四環(huán)素和土霉素最差。,第七十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)。 在HPLCMS分析時(shí)，常用于控制酸度的是甲酸、乙酸、草酸等具有一定揮發(fā)性的酸性物質(zhì)。 由于氯霉素對(duì)造血系統(tǒng)的不良反響，臨床上僅限用于其它抗生素?zé)o效或不適用的病例。n)可患再生障礙性貧血，這是一種潛在的致死的血液失調(diào)，并可能開展成為白血病。 歐盟的96/23指令中把氯霉素列入禁用藥。所用溶劑有乙酸乙酯、乙腈、10％三氯乙酸溶液。)凈化的提取液往往達(dá)不到測(cè)定要求的純度，需經(jīng)柱層析凈化。,測(cè)定：目前國(guó)內(nèi)外主要使用的方法有：HPLCUV, HPLC/MS, GCECD, GC/MS, HPTLC, ELISA和放射免疫法等。用非極性或弱極性色譜柱，ECD、MSEI、陰離子化學(xué)電離〔NCI〕檢測(cè)器。ng)相：乙酸乙酯－己烷〔2：1〕，熒光衍生化；測(cè)定波長(zhǎng)366nm。 s249。,7.3.1 真菌(zhēnjūn)毒素,真菌毒素〔Mycotoxins〕是某些絲狀真菌產(chǎn)生的具有生物毒性的次級(jí)(c236。然而，對(duì)真菌毒素的真正研究卻是從1962年黃曲霉毒素的發(fā)現(xiàn)開始的。)〔Aflatoxin) 黃曲霉和寄生曲酶是產(chǎn)生黃曲霉毒素的主要菌種，其他曲霉、毛霉、青霉、根霉等也可以產(chǎn)生黃曲霉毒素。,黃曲霉毒素是已被證實(shí)的致癌物，其中黃曲霉毒素BM1是強(qiáng)致癌物。)病癥無(wú)特異表現(xiàn)，臨床可表現(xiàn)為發(fā)育緩慢、腹瀉、肝腫大、肝出血、肝硬化、肝壞死、脂肪滲透和膽道增生等。,黃曲霉毒素(d)的測(cè)定，主要有TLC, ELISA, HPLC等方法。在反相色譜中，B1和G1兩種異構(gòu)體熒光強(qiáng)度很弱，需進(jìn)行(j236。,第八十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)。 pǔ)柱C18； 流動(dòng)相：甲醇－乙腈－水〔1：1：3〕 柱后衍生試劑：碘液 衍生化溫度和時(shí)間：70℃，55s 激發(fā)波長(zhǎng)：360nm 發(fā)射波長(zhǎng)：大于520nm,第八十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)。xiē)毒素通常是通過(guò)海洋貝類或魚類等生物媒介造成人類中毒的，因此這些(zh232。,第九十頁(yè)，共一百零二頁(yè)。 主要病癥表現(xiàn)為面部、肢端麻木，嚴(yán)重的會(huì)因呼吸肌麻痹而導(dǎo)致死亡。,記憶(j236。 神經(jīng)性貝毒 神經(jīng)性貝毒是到目前為止危害范圍較小的一類毒素。xi232。目前HPLCMS技術(shù)已用于DSP的分析，成為DSP液相色譜法的重要補(bǔ)充。)檢測(cè) 麻痹性貝毒〔PSP〕是一類四氫嘌呤化合物，這類毒素通常是非結(jié)晶、高極性、難揮發(fā)的物質(zhì)，檢測(cè)方法主要采用液相色譜法。,神經(jīng)性貝毒檢測(cè) 神經(jīng)性貝毒〔NSP〕色譜分析包括薄層層析(c233。近年來(lái)，HPLCMS聯(lián)用技術(shù)開始應(yīng)用于神經(jīng)性貝毒分析。ngdī)和脈搏快而弱，如不及時(shí)治療可出現(xiàn)死亡。 應(yīng)用吸附劑減少毒物的吸收。 對(duì)癥治療：防治呼吸衰竭。n)離子檢測(cè)法 TLC/快原子轟擊質(zhì)譜法 HPLC HPLC/MS,第九十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)。洗脫液經(jīng)濃縮后用活性炭?jī)艋?，用乙醇－乙酸－水?0：1：79〕洗脫。d236。ng)總結(jié),第七章 食品中有害有毒物質(zhì)。目前國(guó)外已有很多RIA試劑盒投放市場(chǎng)，這些試劑盒可檢測(cè)一種或多種β興奮劑。加速電壓：20kV,第一百零二頁(yè)，共一百零二頁(yè)。HPLCMS測(cè)定河豚魚中河豚魚毒素。)電離某些β興奮劑的碎片如下：。,內(nèi)容(n232。,第一百頁(yè)，共一百零二頁(yè)。ngy232。,第九十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)。 使用(shǐy242。,Tetrodotoxin,第九十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)。,河豚毒素(Tetrodotoxin) 河豚(Spheroides vermicularis)又名鈍魚，它的某些臟器及組織中均含有毒素，是一種神經(jīng)毒，其毒性穩(wěn)定〔220℃〕，經(jīng)炒煮、鹽淹和日曬等均不能被破壞，可使神經(jīng)中樞和神經(jīng)末梢發(fā)生麻痹。TLC不夠靈敏，目前已很少應(yīng)用。LC/MS和毛細(xì)管電泳/質(zhì)譜〔CE/MS〕聯(lián)用技術(shù)已用于麻痹性貝毒分析。,麻痹性貝類毒素(d由于ADAM不穩(wěn)定，而且不易獲得，因此又有了一些改進(jìn)的方法，包括采用不同的衍生劑和提取方法。,第九十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)。)缺失性貝毒 記憶缺失性貝毒的活性成分為軟骨藻酸。 主要病癥為嘔吐和腹瀉，長(zhǎng)期毒性效應(yīng)可能導(dǎo)致癌癥。)最廣，危害最大的一類毒素。 常見(jiàn)的貝毒有麻痹性貝毒， 腹瀉性貝毒，記憶缺失性貝毒，神經(jīng)性貝毒等。ng)藻類毒素,海洋藻類毒素是由海洋中的微藻或海洋細(xì)菌產(chǎn)生的一類生物活性物質(zhì)的總稱。取濾液加適量水，再次過(guò)濾后，上免疫親和柱，用水洗柱，最后用甲醇洗脫黃曲霉毒素，用水定容，供HPLC測(cè)定。ng)衍生化，提高其熒光強(qiáng)度，靈敏度才能滿足一般食品法規(guī)的限量。,第八十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)。)分析,食品中黃曲霉毒素(d它是致癌力最強(qiáng)的生物毒素，人類原發(fā)性肝癌的主要致病因素之一。 中毒(zh242。其中以黃曲霉毒素B1存在量最大且毒性最大。,黃曲霉毒素(d)代謝產(chǎn)物，這些毒性真菌包括曲霉、青霉、鐮刀霉、鏈格孢酶、棒孢酶和毛殼酶等。 生物毒素已經(jīng)(yǐ jing)對(duì)食品平安和人類健康構(gòu)成了威脅，因此，食品/飼料中生物毒素的研究也日益顯現(xiàn)出其必要性和迫切性。 放射免疫法：靈敏度高 蛋、奶、肉：GCECD 牛奶、牛組織：LC/MS 蛋：HPLC 肉：ELISA篩選，LC定量，GC/MS確認(rèn),第八十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)。,HPTLC法：薄層板：Si60；流動(dòng)(li HPLC/MS法：HPLC條件同上 GC法：包括GCECD法和GC/MS法。洗脫液有乙腈－水〔80：20〕、乙醚－甲醇〔70：30〕、丙酮－己烷〔2：1〕等。 凈化：提取液經(jīng)濃縮后參加水后，用己烷洗滌除去脂肪等脂溶性雜質(zhì)。,第七十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)。,FAO/WHO在1994年的第四十二屆食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)會(huì)議上作出：“由氯霉素引起的再生障礙性貧血與劑量無(wú)關(guān)，因此不能通過(guò)制定最高殘留量來(lái)加以限制〞的結(jié)論，因此建議是“不設(shè)定〞。 當(dāng)使用CAP時(shí)，易感人群(r233。,氯霉素是一種廣譜抗生素藥。 值得注意的是，四環(huán)素類在高pH值條件下，極易與金屬離子結(jié)合，給色譜分析(s232。,對(duì)于四環(huán)素類化合物的檢測(cè)，主要采用液相色譜法，如EEC方法中采用金屬螯合物形式純化樣品，經(jīng)液相色譜分析的技術(shù)路線，即用0.5g/L CuSO4溶液對(duì)瓊脂糖樹脂進(jìn)行螯合反響后，用pH4.0琥珀酸溶液沖洗制得。jūn)細(xì)胞膜通透性改變，從而抑制DNA的復(fù)制。,第七十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)。洗脫液經(jīng)氮?dú)鉂饪s，用甲酸(jiǎ suān)調(diào)節(jié)pH值至67，用水定容至1ml。,第七十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)。 中國(guó): 牛奶中氨芐青霉素的MRL為 4ng/g。過(guò)敏反響重在預(yù)防，過(guò)敏性休克一旦發(fā)生要積極(jīj237。ng)的細(xì)菌；此外，對(duì)螺旋體、防線菌也有很強(qiáng)的作用。,作用機(jī)制：青霉素類的β內(nèi)酰胺環(huán)與抗菌活性有關(guān)，而噻唑環(huán)與過(guò)敏反響有關(guān)。,青霉素,青霉素G penicillin G,又名芐青霉素 benzyl penicillin 具有青霉素的根本結(jié)構(gòu),其側(cè)鏈為芐基，故稱芐青霉素。uy,7.2.2.1 β內(nèi)酰胺類抗生素,β內(nèi)酰胺類抗生素包括了種類繁多的天然和半合成化合