生化分離工程_蘇海佳_第三章細(xì)胞破碎(文件)
【正文】 團(tuán)狀或絲狀真菌易造成堵塞，一些易損傷勻漿閥，質(zhì)地堅(jiān)硬的亞細(xì)胞器一般不適用； 需設(shè)置冷卻裝置。 攪拌轉(zhuǎn)速 懸浮液進(jìn)料速率 微球大小 微球填充密度 細(xì)胞濃度 微球密度 溫度 攪拌槳設(shè)計(jì) 破碎室的幾何形狀 影響 操作簡便穩(wěn)定，破碎率可控制，易放大 在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)規(guī)模上已得到應(yīng)用 適用于絕大多數(shù)微生物細(xì)胞破碎， 特別 對(duì)于有大量菌絲體的微生物和一些有亞細(xì)胞器（質(zhì)地堅(jiān)硬）的微生物細(xì)胞。高 速載氣 (如氮?dú)?，流速約 300m/s)。 適用于大多數(shù)微生物細(xì)胞和植物細(xì)胞的破碎，通常處理細(xì)胞懸浮液濃度為 10%20%。 影響： 細(xì)胞種類、濃度、處理時(shí)間以及超聲波的聲頻 特點(diǎn)： 方法 技術(shù) 原理 效果 成本 舉例 機(jī)械法 研磨法 細(xì)胞被研磨物磨碎 適中 便宜 超聲波法 用超聲波的空穴作用使細(xì)胞破碎 適中 昂貴 細(xì)胞懸浮液小規(guī)模處理 勻漿法（孔型） 須使細(xì)胞通過的小孔，使細(xì)胞受到剪切力而破碎 劇烈 適中 細(xì)胞懸浮液大規(guī)模處理 珠磨破碎法 細(xì)胞被玻璃珠或鐵珠搗碎 劇烈 便宜 細(xì)胞懸浮液和植物細(xì)胞的大規(guī)模處理 細(xì)胞機(jī)械破碎法比較 ※ CHEMICAL METHODS 化學(xué)方法 利用酸堿調(diào)節(jié) pH值，可提高目標(biāo)產(chǎn)物溶解度。 2. 化學(xué)試劑法 化學(xué)滲透取決于試劑的類型和細(xì)胞壁、細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與形成。 3).表面活性劑 能夠作用細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞壁膜，膜結(jié)構(gòu)中的脂蛋白成分被或多或少地溶解，使細(xì)胞滲透作用有利于某些蛋白的通過。 3. 生物法 酶溶法是利用酶反應(yīng)分解破壞細(xì)胞壁上特殊的鍵而達(dá)到破壁的目的，以提高胞內(nèi)產(chǎn)物和通透性。 4. 細(xì)胞物理破碎方法 原理 最溫和的一種方法 選擇性高，釋放速度快，工藝簡單，易放大。 本法對(duì)于存在于細(xì)胞質(zhì)周圍靠近細(xì)胞膜的胞內(nèi)產(chǎn)物釋放較為有效，但由于本法成本高，只能進(jìn)行小規(guī)模應(yīng)用，且釋放速率慢、產(chǎn)量低，另外酶易失活也限制了它的更進(jìn)一步利用。 生化集成：利用兩種以上的不同階段的分離過程同時(shí)進(jìn)行。 （ 2）選擇性溶解目標(biāo)產(chǎn)物 當(dāng)目標(biāo)物處于與細(xì)胞膜或細(xì)胞壁結(jié)合的狀態(tài)時(shí)，調(diào)節(jié)pH值，離子強(qiáng)度或添加與目標(biāo)產(chǎn)物具有親和力的試劑使目標(biāo)物易于釋放，其他雜質(zhì)不易溶出。 問題關(guān)鍵：了解目標(biāo)產(chǎn)物的性質(zhì)及其所在位置 （ 1）破壞或破碎存在目標(biāo)產(chǎn)物的位置。 原理 冷凍的目的
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