生化分離工程_蘇海佳_第三章細(xì)胞破碎(存儲版)
【正文】 失活，常伴隨著蛋白的變性和降解。 化學(xué)滲透法的優(yōu)點(diǎn)：避免大量細(xì)胞碎片，核酸留在胞內(nèi)，處理后，溶液很容易澄清，簡化后處理步驟，簡單的攪拌容器代替了機(jī)械破碎設(shè)備。 特點(diǎn)： 缺點(diǎn)：存在著高鹽濃度對產(chǎn)品污染問題。 問題關(guān)鍵：了解目標(biāo)產(chǎn)物的性質(zhì)及其所在位置 （ 1）破壞或破碎存在目標(biāo)產(chǎn)物的位置。 生化集成：利用兩種以上的不同階段的分離過程同時進(jìn)行。 4. 細(xì)胞物理破碎方法 原理 最溫和的一種方法 選擇性高，釋放速度快，工藝簡單，易放大。 3).表面活性劑 能夠作用細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞壁膜，膜結(jié)構(gòu)中的脂蛋白成分被或多或少地溶解，使細(xì)胞滲透作用有利于某些蛋白的通過。 影響： 細(xì)胞種類、濃度、處理時間以及超聲波的聲頻 特點(diǎn)： 方法 技術(shù) 原理 效果 成本 舉例 機(jī)械法 研磨法 細(xì)胞被研磨物磨碎 適中 便宜 超聲波法 用超聲波的空穴作用使細(xì)胞破碎 適中 昂貴 細(xì)胞懸浮液小規(guī)模處理 勻漿法（孔型） 須使細(xì)胞通過的小孔，使細(xì)胞受到剪切力而破碎 劇烈 適中 細(xì)胞懸浮液大規(guī)模處理 珠磨破碎法 細(xì)胞被玻璃珠或鐵珠搗碎 劇烈 便宜 細(xì)胞懸浮液和植物細(xì)胞的大規(guī)模處理 細(xì)胞機(jī)械破碎法比較 ※ CHEMICAL METHODS 化學(xué)方法 利用酸堿調(diào)節(jié) pH值，可提高目標(biāo)產(chǎn)物溶解度。高 速載氣 (如氮?dú)猓魉偌s 300m/s)。 適用范圍： 適用于酵母和大多數(shù)細(xì)菌細(xì)胞； 細(xì)胞濃度可達(dá) 20%； 團(tuán)狀或絲狀真菌易造成堵塞，一些易損傷勻漿閥，質(zhì)地堅硬的亞細(xì)胞器一般不適用； 需設(shè)置冷卻裝置。 化學(xué)法 壓縮力和剪切力 —— 高壓勻漿、珠磨、撞擊破碎、超聲波破碎 機(jī)械法 主要有：酸堿處理、化學(xué)試劑處理、酶溶 滲透壓沖擊法和凍結(jié) — 融化法 物理滲透法 細(xì)胞破碎機(jī)理 ※ mechanical disruption 機(jī)械破碎 處理量大，破碎快，時間短，效率較高，工業(yè)規(guī)模的重要手段； 作用力： 擠壓，剪切和撞擊作用； 在許多情況下，細(xì)胞內(nèi)含物全部釋放出來； 由于機(jī)械攪拌產(chǎn)生熱量，破碎要采用冷卻措施。 Gramnegative procaryotes 革蘭氏陰性原核生物 （ ） 里層葡聚糖的細(xì)纖維 —— 細(xì)胞壁的剛性骨架； 覆蓋在細(xì)纖維上的是一層糖蛋白；
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