【正文】 TFⅢ B定位結(jié)合 3型啟動(dòng)子 OCT1 結(jié)合 八聚體 OCT元件 ，增加轉(zhuǎn)錄效率 1 型內(nèi)部啟動(dòng)子 2 型內(nèi)部啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) boxA boxC boxA boxB TFIIIA TFIII C TFIII C TFIII B TBP TFIII C TFIII B pol III pol III 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) OCT PSE TATA OCT1 PBP TFⅡ D TFⅢ B RNA pol Ⅲ 3型基因外部啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng) TBP RNA pol II TFIID TAFs TBP Pol III 啟 動(dòng) 子 TFIIIB TFIIIC TBP RNA pol III Pol I 啟 動(dòng) 子 RNA pol I SL1 UBF1 TBP Pol II 啟 動(dòng) 子 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) TATA ? TBP 的作用 ★ TBP是 Ⅲ B,Ⅱ D,SL1的亞基，和特異 DNA序列及 RNA Pol結(jié)合，使 Pol 結(jié)合在正確的位點(diǎn)上 ? TBP ，又稱定位因子， 類似于原核的 ζ因子 。 2 轉(zhuǎn)錄的延伸 原核生物： ★ 酶與產(chǎn)物 RNA不解離 ★ 第一個(gè)堿基加上后延伸，聚合酶不斷前移， ★ 底物 NTP不斷加到 RNA鏈的 3’ OH 端，RNA鏈不斷延伸 。 2） 拓?fù)鋵W(xué)問(wèn)題 Φ RNA合成過(guò)程中，轉(zhuǎn)錄泡兩端要發(fā)生拓?fù)滢D(zhuǎn)變； Φ 由 DNA旋轉(zhuǎn)酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶 I完成； Φ RNADNA雜交鏈也作旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。 轉(zhuǎn)錄的機(jī)制 1 起始： 2 延伸： 3 終止 ： 3 轉(zhuǎn)錄終止 終止過(guò)程： 酶停止添加底物 →→釋放 RNA鏈 →→酶解離 ? 原核生物的轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制 ? 抗終止作用 原核生物的轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制 終止子 ? 強(qiáng)終止子 ，也稱為 內(nèi)部終止子 。 （ 2） 轉(zhuǎn)錄終止 ? 說(shuō)明： AT富含區(qū)在轉(zhuǎn)錄的終止和起始中均起重要作用。 3） ρ因子對(duì)終止子的作用 a、 ρ因子與 RNA結(jié)合 b、 ρ因子沿 RNA從 5’→3’移動(dòng)（ ATP水解供能）， （終止子處的較長(zhǎng)時(shí)間的暫停給 ρ因子追趕的機(jī)會(huì)） c、 ρ因子與 RNApol 相互作用而造成轉(zhuǎn)錄的終止。 5 RNA合成與 DNA合成異同點(diǎn) 相同點(diǎn)： 1）都以 DNA鏈作為模板 2） 合成的方向均為 5’ →3’ 3）聚合反應(yīng)均是通過(guò)核苷酸之間形成的 3’ ,5’ 磷酸 二酯鍵，使核苷酸鏈延長(zhǎng)。 原核生物轉(zhuǎn)錄后的加工 ? rRNA的加工 ? tRNA的加工 ? mRNA的加工 rRNA的加工 ? 的 rRNA有三種： 16S， 23S和 5S。 （ 2） RNAaseD： 外切核酸酶，使 Ⅰ 型 tRNA露出 CCA端 ? RNAaseP 存在時(shí) RNAaseD可達(dá)最大活性， ? RNAaseQ、 RNAaseY、 RNAaseP3與此酶功能相同。 原核前體 mRNA的加工 Translation Transcription mRNA DNA Protein Promoter Gene 3′ 5′ (2) 單順?lè)醋?mRNA 真核生物的一個(gè)編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個(gè) mRNA。 1 剪切位點(diǎn) 5 ’ 3 ’ 1 8 S 5 . 8 S 2 8 S 人類 H e L a 細(xì)胞途徑： 小鼠 L 細(xì)胞途徑： 4 5 S 4 1 S 4 1 S 3 2 S 3 6 S 2 0 S 1 8 S 1 8 S 3 2 S 2 8 S － 5 . 8 S 2 8 S － 5 . 8 SHela（人類）細(xì)胞和 L（鼠）細(xì)胞中 rRNA的加工途徑 ? rRNA前體的加工有多種途徑。 ④ 剪接內(nèi)含子； 1 加野生型酵母 細(xì)胞提取物 凝膠電泳 前體 t RN A 內(nèi)含子 圖 1 3 酵母 t RN A 在體外的剪切 真核 mRNA的加工和成熟 ? 5’加帽 ? 3’加尾 ?特殊堿基的修飾 ?內(nèi)含子的切除 1） 5’端加帽 ? 帽子的三種類型 ： 帽子 0（ Cap0） m7GpppX（共有） m7G N7— 甲基鳥(niǎo)苷 帽子 1 （ Cap1） m7GpppXm 第一個(gè)核苷酸的 2’ O 位上產(chǎn)生甲基化 帽子 2（ Cap2） m7GpppXmYm 第二個(gè)核苷酸的 2’ O 位上產(chǎn)生甲基化 ? 5’端帽子結(jié)構(gòu)的功能： a. 翻譯起始 的必要結(jié)構(gòu)，為 IFⅢ （起始因子）和核糖體對(duì) mRNA的識(shí)別提供信號(hào)， b. 增加 mRNA的穩(wěn)定性 ，保護(hù) mRNA 免遭 5’外切核酸酶的攻擊。 (2) 真核 tRNA基因比原核 tRNA基因多得多； (3) 5’端全有單磷酸核苷酸，表明已被加工過(guò)； (4) tRNA的前體分子中含有內(nèi)含子。 ? 但在少數(shù)情況下多順?lè)醋?mRNA先被內(nèi)切酶切成較小的單位再作為翻譯的模板。 ? 識(shí)別 tRNA的空間結(jié)構(gòu)，無(wú)種屬特異性 （ 4） RNA甲基轉(zhuǎn)移酶 修飾酶，使得 RNA分子出現(xiàn)稀有堿基。 t R N AIl e t R N AA l a t R N AA s p t R N AT rp 1 6 S 2 3 S 5 S R N a s e I I I R N a s e I I I R N a s e I I I R N a s e I I I R N a s e R R N a s e R R N a s e R R N a s e R R N a s e R 圖 1 3 r R N A 的加工