【正文】 鼠 —每個細胞僅攜帶一個拷貝的小鼠 Trp53腫瘤 抑制基因。 這個模型適用于遺傳毒性和非遺傳毒性化合物 rasH2 轉(zhuǎn)基因小鼠 Trp 53+/ 小鼠 替代致癌性試驗 關于 Trp53+/和 rasH2的實驗設計 ? 25只 /性別，溶劑對照、低、中和高劑量組 ? 剛接收的小鼠小而脆弱 ? 處理 6個月 —通常同臨床給藥方式 ? 灌胃、添加至飼料中，或注射 ? 不認可局部給藥 ? 3個月后追蹤明顯的腫塊 ? 實驗中用野生型同窩出生動物做一次毒代動力學 替代致癌性試驗 野生型小鼠也應檢查嗎？ ? 建議對野生型同窩出生小鼠進行處理并進行顯微檢查，但不強制要求 能確認模型的敏感型，但該模型已被廣泛認可 如果野生型小鼠發(fā)生了更多與處理相關的腫瘤，那么該模型及研究 的可靠性都有問題 對委托方幫助不大 替代致癌性試驗 陽性對照 ? 目前每個實驗中都需要一個陽性對照以確認模型的易感性 ? 通常使用明顯誘變致癌物 對于 rasH2來說一般是 MNU或 尿烷 對 Trp53來說一般是 p甲酚啶 或 MNU或 尿烷 MNU組或尿烷組一般 1015只 /性別 僅檢查靶器官（ FDA） MNU：胸腺淋巴瘤（ 8090%），前胃乳頭瘤和癌 尿烷：支氣管腫瘤，血管肉瘤 p甲酚啶：膀胱上皮腫瘤 替代致癌性試驗 劑量選擇 ? 最大耐受劑量 死亡率升高 相對于對照組，體重增加值減少 ≥10% 顯著的靶器官毒性 降低預期壽命的臨床病理學發(fā)現(xiàn) ? 最大可行劑量 ? 最大暴露 ? 限定劑量（ 1500 mg/kg）？ ? 非無毒的人體暴露量的倍數(shù) 替代致癌性試驗 FDA審查 ? 在劑量范圍確定之前，通知審查部門打算使用致癌性替代模型 ? FDA致癌性咨詢委員會將劑量選擇及研究設計，基于以下幾點： 用該該模型的理由 確定劑量范圍研究的 TK數(shù)據(jù) 遺傳毒性信息 小鼠和人體代謝數(shù)據(jù) 藥物及代謝物在人體的暴露數(shù)據(jù) 為“可靠”的兩年大鼠試驗所作的實驗設計 ? 替代動物模型幾乎總被接受（除了 PPAR拮抗劑） 替代致癌性試驗 病理終點 ? 通常不評價臨床病理學 ? 無需器官稱重 ? 全組織采樣 ? 除了陽性對照組出現(xiàn)的靶器官外，所有處理組中的所有組織都進行顯 微檢查（有些檢查對照組，高劑量組及靶器官） ? 病理同行評審 —具有代表性的處理動物的所有靶器官的腫瘤 ? 對腫瘤統(tǒng)計分析 替代致癌性試驗 提交給 FDA的替代模型試驗 模型 已接收的試驗 陽性結果的試驗 Trp 53+/ 31 2 XPA/ p53 +/ 1 不充分的 0 Tg. AC 16 1 不充分的 5 Neonatal 1 遺傳毒性 0 rasH2 13 2 Note: 摘自 Abigail Jacobs的報告 , FDA, CDER, 2023 替代致癌性試驗 轉(zhuǎn)基因小鼠的優(yōu)勢 模型 傳統(tǒng)的 轉(zhuǎn)基因的 研究期限 2年 6個月 從開始到提交最終報告 4年 動物數(shù) 400 230 花費 $3M $1M 2023/1/16 104 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。因而， FDA認為該模型僅適宜評價遺傳毒性的化合物。 基本的實驗設計 組別 劑量（ mg/kg） 動物 中期剖檢 毒代 1 對照組 * 0 64M/64F 10M/10F 4M/4F 2 低劑量組 X 64M/64F 10M/10F 4M/4F 3 中劑量組 Y 64M/64F 10M/10F 4M/4F 4 高劑量組 Z 64M/64F 10M/10F 4M/4F 傳統(tǒng)兩年致癌性試驗 ―最高劑量或最大耐受劑量用來預測在致癌性試驗過程中會產(chǎn)生的最低毒性作用” ICH S1C(R2) 在最高推薦人用劑量時，嚙齒類與人類血清 AUC（無毒藥物）的暴露比大于 25:1 吸收飽和 — 最大暴露 限制劑量藥理學 — 鎮(zhèn)靜，食欲不振，血壓過低，影響實驗數(shù)據(jù)的癲癇 如果以下情況發(fā)生，采用限制劑量（藥物）： 1500 mg/kg 人用劑量 500 mg/d；無遺傳毒性；暴露水平高于最高推薦人用劑量的 10倍 最大可行劑量 飼料量的 5%；最大灌胃量；局部耐受性 高劑量的選擇 傳統(tǒng)兩年致癌性試驗 展示不同劑量組藥物代謝動力學、藥理學、毒理和致癌性范圍 —各組間暴露不同很重要 展示不產(chǎn)生毒性或未出現(xiàn)藥物相關腫瘤的劑量水平（定義閾值） 通常使用給藥劑量或人類暴露的幾何或線性倍數(shù) 通常低劑量接近臨床暴露水平 低劑量和中劑量的選擇 傳統(tǒng)兩年致癌性試驗 對于藥品， FDA的 CAC特別提出了一套評估方案，包括 給藥原理 和實驗設計 客戶必須提交與實驗計劃給藥途徑一致的 預試驗結果 ，此外還需提交遺傳毒理學數(shù)據(jù)，人類給藥和暴露劑量，蛋白結合信息，人體和動物中代謝物的數(shù)據(jù) 在試驗開始前，無任何其他機構定期審查方案 如果 FDA與客戶意見一致或客戶同意接受美國 FDA的建議，無論研究結果如何， FDA都認為劑量的選擇適當 美國 FDA致癌評估委員會（ CAC） 傳統(tǒng)兩年致癌性試驗 毒理學監(jiān)測 攝食量 體重 臨床癥狀 六個月后進行觸診腫塊，一般每周一次，但可以低于此頻率。 基本原理 體內(nèi) Piga基因突變試驗 體內(nèi) Piga基因突變試驗 體內(nèi) Piga基因突變試驗 藥物遺傳毒性評價的指導原則 1 遺傳毒性試驗方法的研究 2 藥物致癌性評價的概要 3 傳統(tǒng)和替代致癌試驗的研究 4 4 主要內(nèi)容 藥物致癌性評價的概要 藥物致癌性試驗的指導原則 2. ICH 指導原則 S1A：藥物致癌試驗的必要性 S1B：藥物致癌試驗 S1C：藥物只要試驗的劑量選擇 S1C(R)：藥物致癌試驗劑量選擇的附件 1. SFDA指導原則（國食藥監(jiān)注 [2023]129號） 《 藥物致癌試驗必要性的技術指導原則 》 Technical guidance on the need for carcinogenicity studies for pharmaceuticals （等同于 ICH S1A） 藥物致癌性評價的概要 致癌性試驗指南 藥物致癌性評價的概要 ICH S1A 和 SFDA指導原則 致癌試驗要求 持續(xù)使用 6個月以上的藥物或頻繁、周期性、間歇性使用的藥物； 如果有致癌傾向，一些短期使用藥物也要做致癌試驗， 某些劑型或輸藥系統(tǒng)會導致體內(nèi)藥物長期暴露的 時間窗要求 批準上市 之前要做致癌試驗； 一些特殊關注的群體（如嬰幼兒）則需要在批準（ IV期臨床）前做 用于嚴重甚至威脅生命的疾病的藥物可以在臨床批準（ IV期臨床） 后做（沒滿意的可替代療