動(dòng)物微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)(文件)
【正文】 六 瓊脂擴(kuò)散沉淀反應(yīng)結(jié)果 ? 七 .思考題 ? （ 1）瓊脂雙相擴(kuò)散試驗(yàn)操作過程。 ? 原理 將可溶性抗原與相應(yīng)的抗體混合，在適量電解質(zhì)存在下，經(jīng)過一定時(shí)間，即可形成肉眼可見的沉淀物，稱為沉淀反應(yīng)。 ? +： 液體不透明，僅管底有少許凝集，其余無顯著的凝集塊（ 25％菌體被凝集）。 ? 牛、馬和駱駝的血清在 ，而綿羊、山羊和豬的血清在 ，判為陽性反應(yīng)；牛、馬和駱駝的血清在 ，綿羊、山羊和豬的血清在 。 ? +++：有明顯凝集塊、液體幾乎完全透明，即 75%凝集。 ? 2. 這些反應(yīng)對(duì)微生物的研究有何作用 ? 實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物試驗(yàn)法 ? 一、目的要求 ? 掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保定、接種、采血以及剖檢的方法 ? 二、操作步驟 ? （一）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保定法 ? ? ? ? (二 )、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種法 ? ? ? ? ? ? ? (三 )、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血法 ? ? ? ? ? ? (四 )、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體剖檢法 ? 思考題 : ? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須具備條件 ? ? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種方法及注意事項(xiàng) ? 實(shí)驗(yàn)八 凝集試驗(yàn) ? 一、目的要求 ? 二、操作步驟 ? 一、目的要求 ? 1. 熟悉平板凝集反應(yīng)和試管凝集反應(yīng)的操作技術(shù)，通過對(duì)凝集結(jié)果的觀察和記錄，了解凝集的判定和對(duì)被檢牲畜試驗(yàn)結(jié)果的判定。 ? 靛基質(zhì)試驗(yàn)原理 ? 某些微生物如大腸桿菌，變形桿菌，霍亂弧菌等含有色氨酸酶，能分解培養(yǎng)基中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì) (indolo)。脫羧而成為中性的乙酰甲基甲醇，該物質(zhì)在堿性條件下能被空氣中的氧氣氧化生成二乙酰。酸類增加愈多，則使培養(yǎng)基中的 pH值愈下降，當(dāng)降至 ，指示劑甲基紅則呈紅色，即為陽性反應(yīng)。絕大多數(shù)微生物能利用糖類作為碳源和能源，但是它們?cè)诜纸馓堑哪芰ι嫌泻艽蟮牟町?，有些?xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸 (如乳酸、醋酸、丙酸等 )和氣體 (如氫、甲烷、二氧化碳等 )；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。 ? 2. 簡(jiǎn)述細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌菌落形態(tài)的區(qū)別 ? ? 3. 將本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表 ? 4. 描述你所觀察到的酵母菌菌落特征。黑根霉 (+)和 ()各一管。與培養(yǎng)基結(jié)合不緊，易被挑取。 ? 酵母菌為不運(yùn)動(dòng)的單細(xì)胞真核微生物，細(xì)胞呈圓形、卵圓形或假絲狀等形態(tài)，菌體較細(xì)菌大。生長(zhǎng)到一定階段時(shí)，氣生菌絲中又可分化出繁殖菌絲。 ? 2．認(rèn)識(shí)真菌菌落的特征，比較與細(xì)菌菌落有何不同。 四 .操作步驟 ? 一 )．需氧性細(xì)菌分離培養(yǎng)法 ? 1. 平板劃線分離法 ? 2. 傾注平皿分離法 ? 3. 芽胞需氧菌分離培養(yǎng)法 ? 4．利用化學(xué)藥品的分離培養(yǎng)法 ? ? 6. 瓊脂斜面分離法 ? 7. 瓊脂平板涂布分離法 ? 8. 營(yíng)養(yǎng)肉湯分離法 ? 二 )、厭氧性細(xì)菌分離培養(yǎng)法 ? –厭氧肉肝湯法 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 三 )、兼性厭氧菌的分離培養(yǎng)方法 (二氧化碳培養(yǎng)法 ) ? 四 )、細(xì)菌的釣菌、純培養(yǎng)和移植 五 )、穿刺培養(yǎng) 六 )、細(xì)菌培養(yǎng)性狀的檢查 ? 五 注意事項(xiàng) ? 注意：細(xì)菌的培養(yǎng)特征隨培養(yǎng)基成分，培養(yǎng)時(shí)間和溫度的變化可能發(fā)生變化。在一定培養(yǎng)條件下，不同的微生物形成的菌落其性狀是不相同的，它是鑒別各種微生物的依據(jù)之一。 ? 二、基本原理 ? 將細(xì)菌經(jīng)過適度的稀釋 ,接種于培養(yǎng)基上 ,會(huì)出現(xiàn)典型的 培養(yǎng)特征 ,所謂培養(yǎng)特征是指微生物在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長(zhǎng)情況。 ? 牛肉粉或牛肉膏 3g,水 1000ml .— 15磅高壓 15鐘 . ? 2)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（普通瓊脂）的制法 ? 普通肉湯 1000ml 瓊脂粉 15g — ? 15磅高壓 15鐘 . ? 3)半固體培養(yǎng)基的制法 ? 4）鮮血瓊脂的制法 ? PH的滴定 : ? ? : ? 五 注意事項(xiàng) ? ? ? ? 六 作業(yè)與思考題 ? （ 1）為什么微生物實(shí)驗(yàn)室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞上一小段棉茬再用報(bào)紙包起來，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后
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