動物微生物學(xué)實驗(文件)
【正文】 六 瓊脂擴散沉淀反應(yīng)結(jié)果 ? 七 .思考題 ? （ 1）瓊脂雙相擴散試驗操作過程。 ? 原理 將可溶性抗原與相應(yīng)的抗體混合，在適量電解質(zhì)存在下，經(jīng)過一定時間，即可形成肉眼可見的沉淀物，稱為沉淀反應(yīng)。 ? +： 液體不透明，僅管底有少許凝集，其余無顯著的凝集塊（ 25％菌體被凝集）。 ? 牛、馬和駱駝的血清在 ，而綿羊、山羊和豬的血清在 ，判為陽性反應(yīng)；牛、馬和駱駝的血清在 ，綿羊、山羊和豬的血清在 。 ? +++：有明顯凝集塊、液體幾乎完全透明，即 75%凝集。 ? 2. 這些反應(yīng)對微生物的研究有何作用 ? 實驗七 動物試驗法 ? 一、目的要求 ? 掌握實驗動物的保定、接種、采血以及剖檢的方法 ? 二、操作步驟 ? （一）、實驗動物保定法 ? ? ? ? (二 )、實驗動物接種法 ? ? ? ? ? ? ? (三 )、實驗動物采血法 ? ? ? ? ? ? (四 )、實驗動物尸體剖檢法 ? 思考題 : ? 實驗動物必須具備條件 ? ? 實驗動物接種方法及注意事項 ? 實驗八 凝集試驗 ? 一、目的要求 ? 二、操作步驟 ? 一、目的要求 ? 1. 熟悉平板凝集反應(yīng)和試管凝集反應(yīng)的操作技術(shù)，通過對凝集結(jié)果的觀察和記錄，了解凝集的判定和對被檢牲畜試驗結(jié)果的判定。 ? 靛基質(zhì)試驗原理 ? 某些微生物如大腸桿菌，變形桿菌，霍亂弧菌等含有色氨酸酶，能分解培養(yǎng)基中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì) (indolo)。脫羧而成為中性的乙酰甲基甲醇，該物質(zhì)在堿性條件下能被空氣中的氧氣氧化生成二乙酰。酸類增加愈多，則使培養(yǎng)基中的 pH值愈下降，當降至 ，指示劑甲基紅則呈紅色，即為陽性反應(yīng)。絕大多數(shù)微生物能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖的能力上有很大的差異，有些細菌能分解某種糖并產(chǎn)酸 (如乳酸、醋酸、丙酸等 )和氣體 (如氫、甲烷、二氧化碳等 )；有些細菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。 ? 2. 簡述細菌、放線菌、酵母菌、霉菌菌落形態(tài)的區(qū)別 ? ? 3. 將本次實驗結(jié)果填入下表 ? 4. 描述你所觀察到的酵母菌菌落特征。黑根霉 (+)和 ()各一管。與培養(yǎng)基結(jié)合不緊，易被挑取。 ? 酵母菌為不運動的單細胞真核微生物，細胞呈圓形、卵圓形或假絲狀等形態(tài)，菌體較細菌大。生長到一定階段時，氣生菌絲中又可分化出繁殖菌絲。 ? 2．認識真菌菌落的特征，比較與細菌菌落有何不同。 四 .操作步驟 ? 一 )．需氧性細菌分離培養(yǎng)法 ? 1. 平板劃線分離法 ? 2. 傾注平皿分離法 ? 3. 芽胞需氧菌分離培養(yǎng)法 ? 4．利用化學(xué)藥品的分離培養(yǎng)法 ? ? 6. 瓊脂斜面分離法 ? 7. 瓊脂平板涂布分離法 ? 8. 營養(yǎng)肉湯分離法 ? 二 )、厭氧性細菌分離培養(yǎng)法 ? –厭氧肉肝湯法 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 三 )、兼性厭氧菌的分離培養(yǎng)方法 (二氧化碳培養(yǎng)法 ) ? 四 )、細菌的釣菌、純培養(yǎng)和移植 五 )、穿刺培養(yǎng) 六 )、細菌培養(yǎng)性狀的檢查 ? 五 注意事項 ? 注意：細菌的培養(yǎng)特征隨培養(yǎng)基成分，培養(yǎng)時間和溫度的變化可能發(fā)生變化。在一定培養(yǎng)條件下，不同的微生物形成的菌落其性狀是不相同的，它是鑒別各種微生物的依據(jù)之一。 ? 二、基本原理 ? 將細菌經(jīng)過適度的稀釋 ,接種于培養(yǎng)基上 ,會出現(xiàn)典型的 培養(yǎng)特征 ,所謂培養(yǎng)特征是指微生物在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長情況。 ? 牛肉粉或牛肉膏 3g,水 1000ml .— 15磅高壓 15鐘 . ? 2)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（普通瓊脂）的制法 ? 普通肉湯 1000ml 瓊脂粉 15g — ? 15磅高壓 15鐘 . ? 3)半固體培養(yǎng)基的制法 ? 4）鮮血瓊脂的制法 ? PH的滴定 : ? ? : ? 五 注意事項 ? ? ? ? 六 作業(yè)與思考題 ? （ 1）為什么微生物實驗室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞上一小段棉茬再用報紙包起來，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后
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