動(dòng)物細(xì)胞工程—單克隆抗體制備復(fù)習(xí)策略(文件)
【正文】 作用小。 小鼠的脾臟 PEG、滅活的病毒等 利用 HAT選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選 否 用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，稀釋度要 保證每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞。 （ 2）圖 10中細(xì)胞 A體外培養(yǎng)不具有 分裂能力，但能分泌 ， 細(xì)胞 B體外培養(yǎng)能夠 。 （ 5）培養(yǎng) 2周后，即測(cè)定培養(yǎng)細(xì)胞 的特征，篩選出 細(xì) 胞置于不同孔內(nèi)（如圖所示）培養(yǎng)。 ⑵實(shí)施細(xì)胞工程ａ時(shí)，所需的受體細(xì)胞大多采用動(dòng)物卵細(xì)胞的原因是 ： 。 “ 多莉 ” 的培育等程序如圖所示。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有 S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。 制備單克隆抗體 常規(guī)抗體獲得的方法及其特點(diǎn) 單克隆抗體制備的原理 ◆ 利用 產(chǎn)生特異性抗體的功能。 B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 單克隆抗體的制備 單克隆抗體的應(yīng)用 （ 1）融合后的雜種細(xì)胞容易成活嗎？ （ 2）制備單克隆抗體的過(guò)程應(yīng)用了哪些細(xì)胞工程技術(shù)手段？ （ 3） 在整個(gè)制備的過(guò)程中要經(jīng)過(guò)幾次篩選？ 思考 ： 細(xì)胞的同源性越近，融合形成的雜種細(xì)胞越易成活 細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) Ⅰ .篩選得到雜交瘤細(xì)胞， Ⅱ .篩選先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有 一個(gè)雜交 瘤細(xì)胞 下培養(yǎng)篩選出特異抗體的細(xì)胞群 ⑷ 怎樣篩選出 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞間融合所形成的能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞？ 用抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)得到能分泌所需抗體的雜種細(xì)胞 —— 專(zhuān)一抗體檢測(cè) 。 將雜交瘤細(xì)胞稀釋?zhuān)枚嗫准?xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過(guò)一個(gè)，通過(guò)培養(yǎng)讓其增殖。 第二次篩選的原理和方法： 在實(shí)際免疫過(guò)程中，由于采用連續(xù)注射抗原的方法，且一種抗原決定簇刺激機(jī)體形成相對(duì)應(yīng)的一種效應(yīng) B淋巴細(xì)胞，因此，從小鼠脾臟中取出的效應(yīng) B淋巴細(xì)胞的特異性是不同的，經(jīng) HAT培養(yǎng)液篩選的雜交瘤細(xì)胞特異性也存在差異，所以必須從雜交瘤細(xì)胞群中篩選出能產(chǎn)生針對(duì)某一預(yù)定抗原快定簇的特異性雜交瘤細(xì)胞。 （ 4）隨“神六”太空旅行的種苗中，最受關(guān)注的是采油樹(shù)的試管苗。 ④⑤ f 人工種皮 。若利用此技術(shù)，將采油樹(shù)細(xì)胞培養(yǎng)到 ________過(guò)程即可（填字母編號(hào)） 6 e （ 5）若培育抗蟲(chóng)棉，將抗蟲(chóng)基因通過(guò)適當(dāng)?shù)耐緩綄?dǎo)入棉花受精卵，然后進(jìn)行組織培養(yǎng)，該過(guò)程相當(dāng)于 __________（填字母編號(hào)） （ 6）人工種子又稱(chēng)合成種子或種子類(lèi)似物，他是 20世紀(jì)生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用之一。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程要解決的問(wèn)題： 如何使機(jī)體產(chǎn)生能分泌抗體的 B淋巴細(xì)胞？ 從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的什么部位提取 B淋巴細(xì)胞？ 機(jī)體內(nèi)什么細(xì)胞能無(wú)限增殖？ 用什么方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合？ 雜交瘤細(xì)胞有幾種類(lèi)型？制備單克隆抗體需要哪種類(lèi)型？ 如何篩選雜交瘤細(xì)胞？ 根據(jù)下面植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖回答相關(guān)問(wèn)題： （ 1）若運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交（即用番茄、馬鈴薯雜交）能否得到雜種植株？為什么？ _________________________________ ____________________________________________________. 不能，不同種的植物存在生殖隔離 （ 2）在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段是________________，依據(jù)的原理是 _________________,其中過(guò)程②稱(chēng)為 ____________________，與過(guò)程③密切相關(guān)的具有單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器為 __________________，過(guò)程④相當(dāng)于 ______________，過(guò)程⑤ 涉及到的分裂方式為 ____________。 陽(yáng)性孔中的細(xì)胞還不能保證是來(lái)自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽(yáng)性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋?zhuān)话阈柽M(jìn)行 3～ 4次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。 ⑸ 如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測(cè)及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞。 ◆ 利用 技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得 雜交瘤細(xì)胞。 培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能 A．有選擇地繁殖某一性別的家畜 C．用于保存物種 D ，正確的是 （ ）
醫(yī)療健康相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1