動物細胞工程—單克隆抗體制備復習策略-全文預覽
【正文】 B DNA有 D 和 S 兩條途徑，其中 D途徑能被氨基嘌呤阻斷。 ⑷繼植物組織培養(yǎng)之后，克隆綿羊培育成功，證明動物細胞也具有 。 （ 6）要獲得大量的單克隆抗體， 可對獲得的雜交瘤細胞進行 培養(yǎng)。 圖 10 （ 1）動物細胞融合（ 2）分泌特異性抗體 、無限增殖（ 3） PEG（滅活的病毒、電刺激） （ 4）細胞融合是隨機的過程，在 HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，要篩選出 細胞。 單克隆抗體 篩 選 雜交細胞 雜交瘤細胞 體外或體內(nèi) 細胞培養(yǎng) 篩選 骨髓瘤 細胞 誘導細胞融合 特異性雜交瘤細胞 雜交瘤細胞系 提取 經(jīng)過免疫的 B淋巴細胞 動物細胞融合技術(shù) 動物細胞培養(yǎng)技術(shù) 單克隆抗體的制備過程： 特點：既能產(chǎn)生專一抗體又能大量繁殖 特點：特異性強靈敏度高可大量制備 注射抗原 免疫 1975年 Kohler和 Milstein的單克隆抗體技術(shù)在生產(chǎn)和使用抗體方面開創(chuàng)了新紀元，圖 10示單克隆抗體制備流程階段示意圖。 ⑵用于治療疾病和運載藥物 ①特異性強、靈敏度高 生物導彈 —— 單克隆抗體＋抗癌藥物 ②療效高、毒副作用小 結(jié)合同位素的單抗 生物導彈 結(jié)合同位素的單抗 生物導彈 單抗 放射性同位素 項目 動物細胞融合 植物體細胞雜交 原理 細胞膜的流動性 細胞膜的流動性和植物細胞的全能性 融合前提 分散成單個細胞 去除細胞壁 誘導方法 聚乙二醇、離心、振動、電激、 滅活病毒 聚乙二醇、離心、振動、電激、 結(jié)果 獲得雜種細胞或細胞產(chǎn)物 獲得雜種植株 用途 制備單克隆抗體 培育作物新品種 意義 使遠緣雜交成為可能 克服遠緣雜交障礙 動物細胞工程小結(jié) ? 動物細胞培養(yǎng)： 原理、營養(yǎng)、條件、過程、細胞生長特點、結(jié)果、應(yīng)用 ? 動物細胞融合： 原理、誘導方法、過程、應(yīng)用 ? 單克隆抗體的制備： 原理、過程、特點、應(yīng)用 ? 核移植與克隆動物： 供體、受體、核移植方法、克隆動物的方法、克隆動物的遺傳特性、應(yīng)用 ? 動、植物細胞工程的比較： 植物組培技術(shù)與動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、植物體細胞雜交技術(shù)與動物細胞融合技術(shù) ⑶ 圖中 B為 ________過程， 常用 _________作為誘導劑 ，該細胞繼承 ___________的遺傳特性，既能__________,又能 ___________ 。怎么篩 ? 又是一個思路問題。最終選出分泌預定特異抗體的雜交細胞株進行擴大培養(yǎng)。 ② 人淋巴細胞中有這兩種 DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。 如果利用單個 B淋巴細胞進行無性繁殖（克隆），形成細胞群，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出 化學性質(zhì)單一 、 特異性強 的抗體 —— 單克隆抗體 。 抗體分布于血清中，也分布于組織液及外分泌液中。有時自身的組織或細胞也會成為抗原，如癌細胞等。 ②滅活病毒誘導細胞融合的原理 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。 條件 ？ 液體、營養(yǎng)物質(zhì)（ 血清 ）、 PH、溫度、氣體、無菌等 動物組織塊 細胞懸液 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 胰蛋白酶處理分散成單個細胞 幼齡動物的器官組織；動物胚胎 細胞貼壁 接觸抑制 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 加入培養(yǎng)液 用胰蛋白酶等處理貼壁細胞 適宜條件 不死性細胞 電激處理使供體核進入受體卵母細胞構(gòu)建重組胚胎 卵母細胞采集、培養(yǎng) MⅡ 期 卵母細胞 供體牛 供體細胞注入去核卵母細胞 代孕母牛 克隆牛 體細胞培養(yǎng) 去核卵母細胞 去核 胚胎 移植 體細胞核移植過程 （體細胞克隆動物） 體細胞核移植技術(shù)存在的問題 （ 1）成功率非常低 （ 2）克隆動物以表現(xiàn)早衰、生理缺陷等健康問題 1970年，有兩位科學家 做了一個著名的實驗： 人 — 鼠細胞融合的實驗， 以證明細胞膜上的蛋白 質(zhì)分子是運動的。？ ，對取材有何要求？ 實驗材料，藥性、毒性檢測，提取細胞分泌物等 選擇胚胎細胞或幼年動物組織，因為其 分裂增殖能力強 。 動物細胞培養(yǎng) 就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成 單個細胞 ，然后
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