維生素的測定(文件)
【正文】 A、 B兩個反應(yīng)瓶同時用力振搖，準確計時 。 二、維生素 B 2的測定 維生素 B2即核黃素，在食品中以游離形式或磷酸酯等結(jié)合形式存在。 原理 核黃素在 440500nm波長光照射下發(fā)生黃綠色熒光，在稀溶液中，熒光強度與核黃素濃度成正比。用 40mL瓷坩堝為蓋扣住瓶口 , 置于高壓鍋內(nèi)高壓水解， (15lb/in2)30min。此提取液在 4176。加 3%高錳酸鉀溶液 5mL，混勻，放置 2min，使氧化去雜質(zhì)。 過柱與洗脫： 將全部氧化后的央液及標準液通過吸附柱后，用約20mL的熱水洗去樣液中的雜質(zhì)，然后用 （丙酮：冰乙酸：水＝ 5： 2： 9） 將樣品中核黃素洗脫并收集于一帶蓋 10mL刻度試管中，再用水洗吸附柱，收集洗出液并定容至 10mL，混勻后待測熒光。在一定條件下，該細菌生長情況，以及它的代謝物乳酸的濃度是與培養(yǎng)基中該維生素的含量成正比的，因此可用酸度或混濁度的測定法來測定樣品中煙酸的含量。 。 重 點 維生素的分類及性質(zhì)。 待測品及標準的熒光值測定后，在各管的剩余液（約 57mL）中加 20%次亞硫酸鈉溶液，立即混勻，在 20s內(nèi)測出各管的熒光值，作為各自的空白值 計算 X=(AB/CD) S/m f 100/1000 式中： X —— 樣品中含核黃素的量 ,mg/100g A —— 樣品管熒光值 B —— 樣品管空白熒光值 C —— 標準管熒光值 D —— 標準管空白管熒光值 f —— 稀釋倍數(shù) m —— 樣品的質(zhì)量， g S —— 標準管中核黃素的含量 , μg 100/1000—— 將樣品中核黃素量由 μg/g折算 mg/100g的折算系數(shù)。劇烈震搖此管，使多余的氧氣逸出。 氧化去雜質(zhì) 視樣品中核黃素的含量取一定體積的樣品提取液及核黃素標準使用液（約含 110ug核黃素）分別于 20mL的帶刻度試管中，加水至 15mL。含高蛋白的水解液：加入 3ml 10%木瓜蛋白酶溶液 ,于 3740℃ 保溫 16h。試液再加入低亞硫酸鈉 (Na2S2O4),將核黃素還原成無熒光的物質(zhì)，然后再測定試液中殘余熒光雜質(zhì)的熒光強度，兩者之差即為食品中核黃素所產(chǎn)生的熒光強度。 分析方法： GB/T — 2022中第一法為熒光法。 4) 用黑布遮蓋 A、 B反應(yīng)瓶，靜置分層后下層堿性溶液，加入 2－ 3g無水硫酸鈉使溶液脫水。 5）將 20mL硫胺素標準使用液加入交換柱以代替樣品提取液，即得到標準凈化液。保持層析柱中液面始終高于活性人造沸石。 2）用 2mol/L乙酸鈉 調(diào)其 pH值為 （以 %溴甲酚綠為指示劑） 提取 3） 按每克試樣加入 20mg淀粉酶 的比例加入淀粉酶。 分析方法： GB/T — 2022中唯一的方法是熒光計法 此法檢出限 g 原理 硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中被氧化成硫色素（噻嘧色素），在紫外線下，硫色素發(fā)出熒光。 b 樣品維生素 C的測定 取上述獼猴桃液 10mL于錐形瓶中 ?加入 1mL淀粉液 ?用碘液滴定至藍色出現(xiàn) （ 30秒內(nèi)不褪色 ） ?記下碘液體積 V樣品 。 （三）碘量法 當用碘滴定維生素 C時，所滴定的碘被維生素 C還原為碘離子。這時如用草酸，低鐵離子可以還原 2， 6二氯靛酚，使測定數(shù)字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發(fā)生； ⑸ 整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化； ⑹ 在處理各種樣品時，如遇有泡沫產(chǎn)生，可加入數(shù)滴辛醇消除； ⑺ 測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。 試劑 ⑴ 1%草酸溶液：稱取 10g草酸，加水至 1000mL； ⑵ 2%草酸溶液：稱 20g草酸，加水至 1000mL； ⑶ 維生素 C標準液：準確稱 20mgVC溶于 1%草酸中，并稀釋至 100mL，吸 5mL于 50mL容量瓶中，加入 1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有 ； ⑷ % 2， 6二氯靛酚溶液：稱取 2， 6二氯靛酚50mg，溶于 200mL含有 52mg碳酸氫鈉的熱水中，冷卻后，稀釋至 250mL，過濾于棕色瓶中，貯存于冰箱內(nèi)，應(yīng)用過程中每星期標定一次。常用的測定方法有 （ 1） 2， 6二氯靛酚法 （還原型 VC） （ 2） 2， 4二硝基苯肼法 （總 VC） （ 3）碘酸法
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