實驗52 高效毛細管電泳電導檢測法分離檢測水中陰離子(文件)
【正文】 ?? mm?V— 外加電壓； L— 毛細管總長度； （塔板數(shù)） 在 HPCE中，僅存在縱向擴散， σ 2=2Dt 22/1。分離度可按譜圖直接由下式計算： 1212 )(2WWttR???圖 1323 吸附等溫線的類型 圖 吸附等溫線的類型 電泳過程產(chǎn)生的焦耳熱可由下式計算： 22π EcΛLrIVQbm????m— 電解質(zhì)溶液的摩爾電導； I— 工作電流： cm— 電解質(zhì)濃度； 散熱過程中，在毛細管內(nèi)形成溫度梯度（中心溫度高），破壞了塞流，導致區(qū)帶展寬。 3. 擴散進樣方式 樣品中的組分通過擴散作用進入毛細管中。 正離子 ：兩種效應(yīng)的運動方向一致，在負極最先流出； 中性粒子 ：無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響，在陽離子后流出； 陰離子 ：兩種效應(yīng)的運動方向相反； ν 電滲流 ν 電泳 時 ,陰離子在負極最后流出 ,在這種情況下 ,不但可以按類分離 ,同種類離子由于 差速遷移 被相互分離。 蛋白質(zhì)、 DNA等的電荷 /質(zhì)量比與分子大小無關(guān)， CZE模式很難分離，采用 CGE能獲得良好分離， DAN排序的重要手段。 3. 膠束電動毛細管色譜（ MECC ， MEKC） 緩沖溶液中加入離子型表面活性劑，其濃度達到臨界濃度，形成一疏水內(nèi)核、外部帶負電的膠束。 4. 毛細管等電聚焦（ CIEF） 5. 毛細管等速電泳（ CITP） 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導離子 (充滿毛細管 )和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，并以同一速度移動。 3. 不同離子的淌度不同，所形成區(qū)帶的電場強度不同(ν =μ E)，淌度大的離子區(qū)帶電場強度?。? 沿出口到進口，將不同區(qū)帶依次排序 4? ? ? ?電場強度依次增大。 ? 毛細管數(shù)據(jù)工作站 （ 1） 0～ 30 kV 穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源； （ 2）具有恒壓、恒流、恒功率輸出； （ 3）電場強度程序控制系統(tǒng)； （ 4）電壓穩(wěn)定性： %； （ 5）電源極性易轉(zhuǎn)換 ； （ 1）材料：石英：各項性能好；玻璃：光學、機械性能差； （ 2）規(guī)格：內(nèi)徑 20～ 75μ m，外徑 350～ 400μ m；長度 =1m 毛細管是 CE分離的心臟。 ● 熟悉高效毛細管電泳法分析的基本原理和實驗方法。 實驗用的EDTA為乙二胺四乙酸 ， 而非其鈉鹽 。 ● 毛細管管中以及毛細管端口應(yīng)避免引入空氣泡 。 注意事項 預習要求 學習高效毛細管電泳的基本理論和基本知識。 學習和了解高效毛細管電泳的應(yīng)用范圍。 謝 謝 ！ 。 明確本實驗的關(guān)鍵步驟。 了解毛細管電泳中的參數(shù)及其關(guān)系式。 ● 檢測池和進樣瓶在使用前和使用后須在超聲波清洗器中超聲清洗5min， 并用超純水沖洗干凈 。 ● 配制標準溶液時 ， 須先配制較高濃度的溶液 ， 再稀釋至所需濃度 。 實驗目的 實驗內(nèi)容 本實驗采用四乙烯五胺作為毛細管電泳的電滲流抑制劑，以 10mmol/L Tris（三羥甲基氨基甲烷）+10mmol/L H3BO3（硼酸） + + %（ V/V) 四乙烯五胺為電泳運行液，分離電壓： － 15kV，電導檢測，對飲用水中的 Cl、 NO SO42三種陰離子進行了直接分離測定 。毛細管內(nèi)徑一般為 10～ 100μm，其截面結(jié)構(gòu)圖標意圖如圖 。 靈敏度高，要求有電活性。所有試樣都按前導離子的速度等速向陽極前進，逐漸形成各自獨立的區(qū)帶而分離。 中性分子在膠束相和溶液（水相）間分配，疏水性強的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時間長； 可用來分離中性物質(zhì)，擴展了高效毛細管電泳的應(yīng)用范圍； 1. 根據(jù)等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術(shù)； 2. 毛細管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)（合成的具有不同等電點范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物），當施加直流電壓（ 6～ 8V）時，管內(nèi)將建立一個由陽極到陰極逐步升高的 pH梯度； 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液 pH有關(guān)，在酸性溶液中帶正電荷，反之帶負電荷。 無膠篩分技術(shù) ： 采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺。 其具有多孔性，類似分子篩的作用，試樣分子按大小分離。 5. 注射器進樣方式 采用特殊裝置，
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1