實(shí)驗(yàn)52高效毛細(xì)管電泳電導(dǎo)檢測(cè)法分離檢測(cè)水中陰離子-展示頁(yè)
2025-04-22 23:28本頁(yè)面
【正文】 /米 ， 特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬(wàn) 。 高效毛細(xì)管電泳在技術(shù)上采取了兩項(xiàng)重要改進(jìn)： 一是采用了 50微米 （ mm)內(nèi)徑的毛細(xì)管 ,； 二是采用了高達(dá)萬(wàn)伏的分離電壓 。 按 形狀分類(lèi) ： U型管電泳、柱狀電泳、板電泳； 按 載體分類(lèi) ：濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳； 傳統(tǒng)電泳分析：操作煩瑣，分離效率低，定量困難，無(wú)法與其他分析相比。 引 言 1937年， 蒂塞利烏斯 （ Tiselius，瑞典 )將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳，第一次將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和α 、 β 、 γ 球蛋白； 1948年， 獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)： 高效毛細(xì)管電泳 /電導(dǎo)檢測(cè)法 測(cè)定飲用水中陰離子 實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)： 5 實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 主講教師：謝天堯 副教授 ? 引言 ? 毛細(xì)管電泳基本理論 ? 毛細(xì)管電泳中的電滲流 ? 參數(shù)與關(guān)系式 ? 進(jìn)樣方式 ? 檢測(cè)器及數(shù)據(jù)工作站 ? 毛細(xì)管電泳儀結(jié)構(gòu) ? 應(yīng)用示例 ? 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 ? 預(yù)習(xí)要求 內(nèi)容 在電解質(zhì)溶液中，位于電場(chǎng)中的帶電離子在電場(chǎng)力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象，稱(chēng)之為 電泳 。 由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷移速率不同，可實(shí)現(xiàn)分離。 利用 電泳 現(xiàn)象對(duì)某些化學(xué)或生物物質(zhì)進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫 電泳法 或 電泳技術(shù) 。 1981年， Jenson和 Luckas，用 75m內(nèi)徑石英毛細(xì)管進(jìn)行電泳分析，柱效高達(dá) 40萬(wàn) /m，促進(jìn)電泳技術(shù)發(fā)生了根本變革，迅速發(fā)展成為可與 GC、 HPLC相媲美的嶄新的分離分析技術(shù) —— 高效毛細(xì)管電泳 （ high performance capillary electrophoresis ， HPCE） 。 ? 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā) ， 大大減小了溫度效應(yīng) ， 使電場(chǎng)電壓可以很高 。 高效毛細(xì)管電泳分析的特點(diǎn) 、易自動(dòng)化 電源、毛細(xì)管、檢測(cè)器、溶液瓶 、分離效率高 在 36種無(wú)機(jī)及有機(jī)陰離子， 24種陽(yáng)離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔板數(shù)； 、消耗少 進(jìn)樣量極少，水介質(zhì)中進(jìn)行 ； 有機(jī)物、無(wú)機(jī)物、生物、中性分子；生物大分子等； 分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料等； 高效毛細(xì)管電泳 (HPCE)基本理論 basic principles of HPCE 電泳是指帶電離子在電場(chǎng)中的定向移動(dòng)，不同離子具有不同的遷移速度， 遷移速度與哪些因素有關(guān)？ 當(dāng)帶電離子以速度 ν 在電場(chǎng)中移動(dòng)時(shí)，受到大小相等、方向相反的電場(chǎng)推動(dòng)力和平動(dòng)摩擦阻力的作用。 淌度 μ ：?jiǎn)挝浑妶?chǎng)強(qiáng)度下的平均電泳速度。 當(dāng)充滿(mǎn)液體的毛細(xì)管兩端施加電壓時(shí)，就會(huì)發(fā)生管中液體相對(duì)于毛細(xì)管管壁表面作整體移動(dòng)的現(xiàn)象， 稱(chēng)之為 電滲流 （ electro osmotic flow ，簡(jiǎn)稱(chēng) EOF）。 在高壓電場(chǎng)的作用下，帶正電荷的溶液表面及擴(kuò)散層向陰極移動(dòng)，由于這些陽(yáng)離子實(shí)際上是溶劑化的，故將引起柱中的溶液整體向負(fù)極移動(dòng)，速度 ν 電滲流 。即 ν 電滲流 = μ E 電滲淌度取決于電泳介質(zhì)及雙電層的 Zeta電勢(shì)，即 μ = ε 0εξ ε 0— 真空介電常數(shù)； ε — 介電常數(shù)； ξ — 毛細(xì)管壁的 Zeta電勢(shì)。 孔隙率與孔徑： 電滲流的方向取決于毛細(xì)管內(nèi)表面電荷的性質(zhì)： 內(nèi)表面帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極； 內(nèi)表面帶正電荷，溶液帶負(fù)電荷，電滲流流向陽(yáng)極； 石英毛細(xì)管；帶負(fù)電荷，電滲流流向陰極； 改變電滲流方向的方法： （ 1）毛細(xì)管改性 表面鍵合陽(yáng)離子基團(tuán)； （ 2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑 內(nèi)充液中加入大量的陽(yáng)離子表面活性劑，將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷，溶液表面帶負(fù)電荷。 4. 電滲流的流型 電荷均勻分布，整體移動(dòng)， 電滲流的流動(dòng)為平流 ， 塞式流動(dòng) （譜帶展寬很小）； 液相色譜中的溶液流動(dòng)為層流， 拋物線(xiàn)流型 ， 管壁處流速為零，管中心處的速度為平均速度的 2倍（引起譜
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