堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測(cè)定(文件)
【正文】 ； K為吸收系數(shù)； C為溶液濃度； L為溶液光程的厚度 2． 常用方法 （ 1） 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 OD或Ａ 濃度 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線與樣品的測(cè)定條件必須一致。 （ 2） 標(biāo)準(zhǔn)管法 CX/AX=CS/AS， 已知 CS， 測(cè)定 AS、 AX， 可求得 CX。 測(cè)定 Km和 Vm，可通過(guò)作圖法求得。 三、操作方法 （ 一 ） 對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 取 5支試管編號(hào) ,0號(hào)一支 ,1－ 7號(hào)各二支 ,按下表操作： 管 號(hào) 0 1 2 3 4 5 6 pNP含量 (?mol) 0 ?mol/mL pNP (mL) 0 H2O (mL) Na2CO3NaHCO3 (mL) 各管加入 mL 20 mmol/L MgCl2 (mL) 各管加入 mL mol/L NaOH (mL) 各管加入 mL OD 405 nm ? 以對(duì)硝基苯酚的絕對(duì)量 (?mol數(shù) )為橫坐標(biāo) ， OD405nm值為縱坐標(biāo)
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