高產(chǎn)γ-氨基丁酸乳酸菌的等離子誘變選育畢業(yè)論文(文件)
【正文】 0 倍備用。 對乳酸菌 L1201進行 ARTP 誘變育種 菌種來源 L1201 是原始菌株 HX36 菌株經(jīng)過 ARTP 誘變處理后，篩選得到的遺傳性及產(chǎn)量穩(wěn)定的突變菌株。 乳酸菌 HX36致死率測定 葉楊：高產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的等離子誘變選育 圖 42 HX36 的誘變致死率曲線圖 由圖 42 可以看出： HX36 乳酸菌經(jīng)過 ARTP 誘變處理后，乳酸菌誘變致死率隨著菌株誘變時間的增長而增大。 乳酸菌 L1201 ARTP 誘變結(jié)果 L1201生長曲線的繪制 葉楊：高產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的等離子誘變選育 圖 44 L1201 的生長曲線和 pH值曲線 乳酸菌 L1201 生長曲線如圖 44 所示， 由圖可以看出，菌體在接種培養(yǎng)后經(jīng)過短暫的適應(yīng)期進入對數(shù)生長期，約在 14h 左右進入對數(shù)后期，此期間菌體生長代謝旺盛且穩(wěn)定是誘變的最佳時機。培養(yǎng)時間在 24h 之后培養(yǎng)菌液中 Ph 值基本保持不變 。 葉楊：高產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的等離子誘變選育 L1201誘變后在 90s GABA 含量測定 圖 46 L1201 誘變后菌株的 GABA含量和 OD值的曲線 圖 46中 90s低 1， 90s 代表誘變時間，低代表 GABA 低濃度（中代表中濃度，高代表高濃度 )， 1 代表菌落較大（ 2 代表菌落適中， 3 代表菌落較小）。而基因突變作為很重要的途徑之一，一直被廣泛應(yīng)用 [16]。經(jīng)誘變，對致死率達到 90%的突變進行篩選，最后篩選出突變菌 L1201 產(chǎn)量為 ，較出發(fā)菌株產(chǎn)量提高 18， 84%， （ 2）本次實驗所測得的乳酸菌 HX36 的生長曲線和乳酸菌 L1201 的生長曲線有所不同，可能是乳酸菌誘變后基因發(fā)生改變。 由于時間的不足本次實驗最終得到的產(chǎn) GABA 的乳酸菌提高率不是太理想，建議可以在以下方面開展進一步工作 ： 葉楊：高產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的等離子誘變選育 （ 1）對突變株進行紫外誘變育種和化學(xué)誘變育種相結(jié)合的復(fù)合育種育種，以期獲得高產(chǎn) GABA 乳酸菌突變菌株。 本論文從課題的選擇到項目的最終完成，從結(jié)果分析到最終成文，薛正蓮教授始終對我細(xì)心指導(dǎo)嚴(yán)格要求，并多次詢問實驗進程，為我答疑解難，幫助我開拓研究思路，熱忱鼓勵。在此，謹(jǐn)向老師們表示衷心的感謝！ 在此次畢業(yè)實驗的過程中，特別感謝梁慧學(xué)姐及其他幾位學(xué)長學(xué)姐對 我的指導(dǎo)和支持，還有實驗室的其他同學(xué)的熱心幫助，在此一并致謝！ 葉楊 2020 年 6 月 4 日 參考文獻 葉楊：高產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的等離子誘變選育 [1]楊勝遠，陸兆新，呂風(fēng)霞，別小妹 . γ 氨基丁酸的生理功能和研究開發(fā)進展 [J]. 食品科學(xué)， 2020， 09（ 04）： 528533 [2]溫博貴：國外醫(yī) 學(xué)參考資料 (中山醫(yī)學(xué)院 )， 2020， 11( 05)： 132134 [3]何熙璞，張敏，李俊芳，王邕 . γ 氨基丁酸的生理學(xué)功能及研究現(xiàn)狀 [J]. 廣西大學(xué)學(xué)報 (自然科學(xué)版， 2020， 7（ 02）： 464466 [4]李瑞芝，郭建友，李昌逸 .焦慮癥 γ 氨基丁酸受體機制與藥物干預(yù)研究進展 [J].中國藥理學(xué)報， 2020， 26（ 9）： 221223 [5]黃俊 . 利用短乳桿菌制備 γ 氨基丁酸相關(guān)過程研究 [D].浙江大學(xué)， 2020. [6]胡超 . 高產(chǎn) γ 氨基丁酸酵母菌株的誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化 [D].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2020. [7]梁金鐘，李雯，王風(fēng)青 . 產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的篩選及誘變育種 [J]. 食品科學(xué)， 2020， 23（ 06）： 228232 [8] B. Mandal ， K. Nath ， D. Das ， Improvement of biohydrogen production under decreased partial pressure of H2 by Enterobacter cloacae， Biotechnol. Lett. 2020， 12（ 04）： 831– 835 [9]林親錄，王婧，陳海軍 . γ 氨基丁酸的研究進展 [J]. 現(xiàn)代食品科技，2020， 21（ 05）： 496500 [10]顧振新，蔣振暉 .食品原料中 γ 氨基丁酸 (GABA)形成機理及富集技術(shù)〔 J〕 .食品與發(fā)酵工業(yè)， 2020， 28(10)： 6569 [11] Ondo J G， et al： Endoerinolgy ， 1998. [12]范杰，孫君社，張曉杰，張秀清，胡錦蓉，張京聲 . 高產(chǎn) γ 氨基丁酸乳酸菌的篩選及鑒定 [J]. 中國釀造， 2020， 13（ 04）： 3941 [13]林少琴，吳若紅，鄒開煌等 .米胚芽中 γ 氨基丁酸的分離提取及鑒定〔 J〕 .食品科學(xué)， 2020， 25(1)： 7678 [14].. Wang， . Li， . Chen， . Liu， . Xie， The development of physical mutation techniques in industrial microbe breeding， Biotechnol. Bull. 2 2020， 15（ 11）： 114– 118 [15]郭曉娜，朱永義，朱科學(xué) . 生物體內(nèi) γ 氨基丁酸的研究 [J]. 氨基酸和生物資源， 2020， 13（ 02）： 7072 安徽工程大學(xué)畢業(yè)論文 徽工程大學(xué)畢業(yè) 設(shè)計（論文） [16] 夏江，梅樂和，黃俊等 .產(chǎn) r氨基丁酸的乳酸菌株篩選及誘變 [J].核農(nóng)學(xué)報， 2020， 20(5)： 379382 附錄 本附錄中表格的表序與正文中的圖序相對應(yīng)。在此謹(jǐn)向薛老師致安徽工程大學(xué)畢業(yè)論文 徽工程大學(xué)畢業(yè) 設(shè)計（論文） 以誠摯的謝意和崇高的敬意！ 感謝生技專業(yè)各位專業(yè)課老師對我的悉心教導(dǎo)。 （ 3）對誘變后獲得的高產(chǎn)菌株與基因工程相結(jié)合，探討誘變導(dǎo)致高產(chǎn)的機制與原理。 （ 4）對出發(fā)乳酸菌菌株 L1201 進行誘變處理，誘變初篩后從梯度平板上的高、中、低三個濃度中挑選單菌落進行篩選
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