【正文】 ...5 ..............................................................................................6 ....................................................................................6 ............................................................7 聯系 ....................7 ...........................................................8 ....................................................9 ...................... 10 第二部分 課程設計部分 .........................................................錯誤 !未定義書簽。 成熟的生理機理 .........................................錯誤 !未定義書簽。通過本次設計，擬定探討卵丘細胞的存在和不同形態(tài)對豬卵母細胞的成熟率的影響。 年 月 日 燕山大學 課程設計 成績評定表 設計者姓名 : 學號 : 設計題目 : 說明書成績評定（滿分 100分）： 得分 設計內容的切題程度：滿分 20分 （ ） 設計內容立題合理性：滿分 10分 （ ） 設計內容的規(guī)范程度：滿分 10分 （ ） 設計書前后內容完整：滿分 20分 （ ） 設計說明說排版成績：滿分 20分 （ ） 設計說明書的工作量：滿分 10分 （ ） 設計過程平時成績： 滿分 10分 （ ） 總分成績： 指導教師： 年 月 日 答辯成績評定：（滿分 100分） 得分 儀表成績：滿分 20分 （ ） 口語表達：滿 分 20分 （ ） 幻燈質量：滿分 20分 （ ） 設計分析：滿分 40分 （ ） 總分 ： 教師： 年 月 日 設計撰寫成績 （ 70%） 答辯成績 （ 30%） 合計 教師簽字： 年 月 日 20202020 秋 季學期 生物工程專業(yè)課程設計 結題論文 卵丘細胞對豬卵母細胞體外成熟影響的設計 學院（系）： 年級 專業(yè)： 學 號： 學生 姓名： 指導 教師： 教師 職稱： 摘 要 卵丘細胞是影響卵母細胞成熟的重要因素，尤其是包裹在卵母細胞周圍的卵丘細胞。本設計主要探討卵丘細胞對牛卵母細胞體外成熟的影響。為提高卵母細胞的質量，使體外受精、細胞核移植、轉基因及胚胎干細胞等技術研究的順利進行，而作為這些研究基礎環(huán)節(jié)的卵母細胞體外成熟技術尤為重要。 ............................................................................1 2. 影響豬卵母細胞體外成熟的因素 ..................................................................2 ...........................錯誤 !未定義書簽。 ................................................................................錯誤 !未定義書簽。 ........................................................................................錯誤 !未定義書簽。 燕 山 大 學 課 程 設 計 說 明 書 卵母細胞的成熟觀察 ................................................錯誤 !未定義書簽。 ............................................................................錯誤 !未定義書簽。 參考文獻 .......................................................................................錯誤 !未定義書簽。卵母細胞的體外成熟包括細胞核的成熟、細胞質的成熟、卵丘細胞的成熟、透明帶的成熟以及其卵丘 卵母細胞復合體的發(fā)育成熟等一系列復雜的變化過程，主要表現在細胞核成熟和細胞質成熟兩個方面。高爾基復合體最初位于核的周圍，成熟過程中移向皮質，皮質顆粒完全形成后，高爾復合體在皮質中消失。燕 山 大 學 課 程 設 計 說 明 書 2 有些細胞質成熟過程依賴于細胞核成熟。 2. 影響豬卵母細胞體外成熟的因素 卵巢來源豬的年齡、品種及健康狀況 同一種動物在不同年齡段其卵母細胞在體外成熟的情況也有所不同。反之，取自仔豬、處女豬、老母豬及老弱病殘豬的卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)效果則較差。彭輝等研究表明，在牛卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)中，有著同樣的燕 山 大 學 課 程 設 計 說 明 書 3 結果，即卵泡期卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)結果要高于黃體期 [xxvi]。相對于其他哺乳動物而言，豬卵母細胞對溫度的敏感度較高，較高或較低都會直接影響到體外成熟的效果，一般來講，豬卵巢的保存溫度在 28~35℃ ，文國藝等研究表明，當卵巢的保存溫度低于 25℃ ，豬卵母細胞體外成熟收到明顯的影響并進而影響到受精的結果 。但在特別大的卵泡中有些卵母細胞有嚴重退化的現象。 A 級 ： 卵丘細胞在 3 層或 3層以上。 目前，常用的采集豬卵母細胞的方法有三種即抽吸法、切割法和刺破法，相對于刺破法和切割法而言，抽吸法較為常用，但是所獲得的卵母細胞質量較差，甚至出現較多的裸卵，進而間接地影響了體外培養(yǎng)的效果。此外，培養(yǎng)箱所用的水的純度和高度無菌也是培養(yǎng)成功的關鍵性因素。另外，要保證所用氣體的無毒。相對于普通的單皿培養(yǎng)法而言，微滴培養(yǎng)法和套皿培養(yǎng)法可以更好的保持細胞發(fā)育所需要的微環(huán)境，同時減少微生物的污染。s medium， NCSU23， TCM199NCSU37。s 液中 Lalantha等人認為在不添加蛋白質添加物的情況下 TCM199 更有利于卵母細胞的核成熟，而在Waymouth基礎液中成熟的卵母細胞其核成熟率雄原核形成率和囊胚發(fā)育率較低。在豬卵 母細胞體外成熟研究中，許多學者都選擇添加 PMSG,有人還認為添加 PMSG 和 hCG 的組合對豬卵母細胞核成熟的促進作用優(yōu)于添加 FSH 和 LH。蔡令波等在培養(yǎng)后期去除促性腺激素也得出了相似結果。近年來，許多研究者又在豬的卵母細胞成熟培養(yǎng)液中添加一定比例的豬血清，其中包括 :新生仔豬血清，母豬發(fā)情的血清等。 豬卵泡液 (pig follicular fluid， pFF)是豬卵母細胞發(fā)育的微環(huán)境，對卵母細胞的成熟有著重要的調節(jié)作用，主要表現在提高豬卵母細胞成熟的質量并增加胚胎的發(fā)育能力。 與卵母細胞體外成熟相關的細胞生長因子主要包括表皮生長因子(Epidermal growth factor， EGF)，胰島素樣生長因子 (insulinlike growth factors，IGF)、成纖維細胞生長因子 (Fibroblast Growth Factor， FGF)、轉化生長因子(transforming growth factor， TGF )及神經生長因子 (nerve growth factor， NGF)等，這些細胞生長因子之間相互作用，對卵母細胞的成熟、受精與