生化分離工程_蘇海佳_第三章細胞破碎-wenkub
2023-03-05 05:09:55 本頁面
【正文】 成原生質體，在滲透壓作用下，細胞膜破裂釋放胞內物質。 特點： 破壁阻力：壁結構交聯(lián)的緊密程度和壁厚。 特點： 破碎阻力：肽聚糖的網(wǎng)狀結構 網(wǎng)結構的致密程度和強度，與肽鍵的數(shù)量和交聯(lián)度有關。 ?所有細菌都含有肽聚糖的網(wǎng)狀結構。 胞外 胞內 細胞 細胞破碎是指：選用物理、化學、酶或機械的方法來破壞細胞壁或細胞膜。 有些目標產(chǎn)物存在于生物體中 。 尤其是由基因工程菌產(chǎn)生的多數(shù)蛋白質不會被分泌到發(fā)酵液中 ， 而是在細胞內沉積 。 胞外物質 胞內物質 發(fā)酵液預處理 —— 澄清液 收集菌體 —— 細胞破碎 ——轉入液相 —— 碎片分離 主要劃分為兩大類 : 化學法和機械法 3 ?革蘭氏陽性菌的細胞壁較厚，約 1550nm，肽聚糖含量占 40%一 90%。 Gramnegative procaryotes 革蘭氏陰性原核生物 （ ） 里層葡聚糖的細纖維 —— 細胞壁的剛性骨架； 覆蓋在細纖維上的是一層糖蛋白； 外層是由 1， 6— 磷酸二脂鍵共價連接而成的網(wǎng)狀結構的甘露聚糖； 其內部有甘露聚糖 — 酶的復合物。 植物細胞壁的主要組成成分是纖維素 在初生壁上還有半纖維素和果膠質 纖維素是由鏈狀結構的 ?D葡萄糖以 1， 4?葡萄糖苷鍵結合，纖維素分子束聚集 —— 微纖絲 —— 植物細胞壁的框架，而其他物質填充在微纖絲之間的空隙中 —— 植物細胞壁的基本結構。 化學法 壓縮力和剪切力 —— 高壓勻漿、珠磨、撞擊破碎、超聲波破碎 機械法 主要有：酸堿處理、化學試劑處理、酶溶 滲透壓沖擊法和凍結 — 融化法 物理滲透法 細胞破碎機理 ※ mechanical disruption 機械破碎 處理量大，破碎快，時間短，效率較高，工業(yè)規(guī)模的重要手段； 作用力： 擠壓，剪切和撞擊作用； 在許多情況下，細胞內含物全部釋放出來； 由于機械攪拌產(chǎn)生熱量，破碎要采用冷卻措施。 k為破碎速度常數(shù) 上述參數(shù)隨微生物種類和培養(yǎng)條件的不同而有所差異 壓力 P可用動能表達： ? ? baSn Nukl ???? )2(21?影響因素： 細胞破碎率用包內產(chǎn)物釋放率表示： m axRRS ?壓力、溫度和通過勻漿器閥的次數(shù)，操作壓力影響最大。 適用范圍： 適用于酵母和大多數(shù)細菌細胞； 細胞濃度可達 20%；
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