16基因工程和蛋白質(zhì)工程-wenkub
2023-02-02 23:56:29 本頁面
【正文】 基因工程的理論基礎(chǔ) 1）物質(zhì)基礎(chǔ) —— 脫氧核苷酸 2）結(jié)構(gòu)基礎(chǔ) —— 規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu) 3）中心法則，共用一套遺傳密碼 細(xì)胞工程 細(xì)胞工程的概念 利用細(xì)胞融合技術(shù)把含有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞合成雜種細(xì)胞。 細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ) —— 細(xì)胞全能性 依據(jù) —— 生物體的每一個干細(xì)胞都包含有 該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)。 酶工程用于食品工業(yè)很有效。 ? 種植業(yè)中的應(yīng)用 ? 用攜帶外源基因的農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化植物原生質(zhì)體 ，使外源 DNA與植物染色體 DNA整合 ， 通過原生質(zhì)體的培養(yǎng)分化成愈傷組織 ， 最后發(fā)育成具有新性狀的完整植株 — 轉(zhuǎn)基因植物 基因工程包括 DNA重組技術(shù)和其他使基因結(jié)構(gòu)得以定向改造的技術(shù)。 限制性內(nèi)切酶的命名 用細(xì)菌同名的第一個字母（大寫）和種名的前兩個字母（小寫）構(gòu)成酶的基本名稱。 ?限制性內(nèi)切酶切割 DNA的方式 （ 5’3’鏈）和對稱軸左邊（ 3’5’鏈）切開 從識別序列的中間切開產(chǎn)生平齊末端（ bluntends）， 如 HaeⅢ 即分別在 5’3’鏈和 3’5’鏈對稱軸的左右方切開 ，形成帶有凸出的 5’磷酸基團(tuán)的粘性末端（ Cohesive ends）， 如 EcoRⅠ （ 5’3’鏈）和對稱軸左邊（ 3’5’鏈）切開 形成帶有凸出的 3’羥基的粘性末端，如 pstI ——分離法及合成法 （ 1） DNA片段的直接提取 （ 2）用噬菌體或質(zhì)粒直接從宿主細(xì)胞中將目 的基因攜出 （ 3）使用相應(yīng)的 mRNA分離基因 二、基因載體 ——染色體以外的遺傳單元 ——感染細(xì)菌的病毒 質(zhì)粒是一種環(huán)狀雙鏈的 DNA分子。轉(zhuǎn)入的質(zhì)粒 DNA仍能進(jìn)行復(fù)制，這種性能為 DNA重組技術(shù)提供了重要的條件，即將一種外源基因與質(zhì)粒重組后，再轉(zhuǎn)入細(xì)菌中去復(fù)制繁殖，使外源基因得以增殖。但都是經(jīng)過了人工改造，更適宜運(yùn)用于DNA重組技術(shù)。即增加細(xì)胞膜的通透性才能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。 ?噬菌體感染大腸桿菌的途徑 +要插入的外來 DNA質(zhì)粒載體連接重組 DNA 分子經(jīng)轉(zhuǎn)化或病毒感染導(dǎo)入宿主細(xì)胞對含有重組 DNA分子的選擇無性繁殖（克?。┲亟M DNA 分子合成和克隆過程宿主染色體 ——從大量受體細(xì)胞選出帶有重組體 的細(xì)胞 （ 1）插入失活法 （ 2）放射性探針檢測法 （ 3） R環(huán)檢測法 （ 4）免疫測定法 （ 1）插入失活法 在現(xiàn)在的基因工
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