第六章基因的轉(zhuǎn)移技術(shù)-wenkub
2022-08-29 13:19:53 本頁(yè)面
【正文】 低聚核苷酸缺失 插入突變C CAAA ACC CA39。C39。退火 Pol IdNT P轉(zhuǎn)化大腸桿菌ABA39。B39。2 2 39。分組連接+ 人工接頭E x o I I I 或S 1第二節(jié) 基 因 置 換 體外突變的基因引入原生質(zhì)體內(nèi) ,檢查不同的突變對(duì)表型有何影響 ,因此就需要用突變基因?qū)⒁吧?基因置換 出來(lái) (原理見(jiàn) 載體 一章 ). 篩選方法 : 突變基因 DNA分子 (leu2, URA3) 轉(zhuǎn)化(Ura) Ura+轉(zhuǎn)化體 選擇 Ura重組體 影印篩選 leu突變體 核酸雜交 (pBR322探針 ) +U r a L e u +L E U 2l e u 2U R A 3同源重組L E U 2 l e u 2U R A 3U r a + L e u +U R A 3l e u 2L E U 2同源重組二次L E U 2U R A 3U r a L e u l e u 2+R E 1R E 2R E 2R E 1 R E 1U R A 3U R A 3T 4 D N AL i g a s e L E U 2R E 2L E U 2U r a + L e u U r a L e u +U R A 3第九章 信息技術(shù) 在基因工程中的應(yīng)用 第一節(jié) 計(jì)算機(jī)技術(shù) 在基因工程中的應(yīng)用 DNA序列的收集、整理和分析：堿基比例、限制酶圖、保守序列分析（調(diào)控序列、啟動(dòng)子序列、終止子序列等）、編碼區(qū)序列和多肽序列（氨基酸序列、分子量、同源序列分析、糖基化位點(diǎn)、抗原決定序列、分泌信號(hào)肽序列和高級(jí)結(jié)構(gòu)分析等） 基因組序列分析 SNP序列分析 PCR引物設(shè)計(jì) 、 DNA雜交探針設(shè)計(jì) 載體圖形繪制 第二節(jié) 網(wǎng)絡(luò)技術(shù) 在基因工程中的應(yīng)用 一 . DNA序列的查詢、收集、整理和分析 1．已測(cè)定的基因序列：按基因的種類查詢或物種種類查詢 2．基因序列的登錄 3．同源性分析 二 . 已發(fā)表論文查詢 三 . 方法學(xué)查詢 四 . Inter網(wǎng)的使用方法 1. 常用的查詢網(wǎng)點(diǎn) : EMBL DNA information and stock center(DISK) National center for biological information EMBLEuropean Bioinformation Institute BioMedNet The Institute for Genomic Research (TIGR) Nature Proceeding of National academic science Science Celera Genomics the Centre of BioInformatics at Peking University 2. 查詢方法 3. 查詢實(shí)例 NCBI網(wǎng)點(diǎn)的瀏覽 : 詳見(jiàn)資料和上機(jī)觀察 Invitrogen網(wǎng)點(diǎn)查詢 : 方法查詢 單擊 “ 打開 ” 錄入網(wǎng)點(diǎn)地址
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