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生物化學技術(shù)補充1-吸收光譜分析法-wenkub

2022-08-22 15:29:14 本頁面
 

【正文】 LB爾定律 (可見 紫外光區(qū)波長為 200~760nm,其中 200~400nm為紫外光) ① 對比法 ② 標準曲線法 lCEA cm ??? %11 當兩種或兩種以上的組分共存時,可出現(xiàn)吸收光譜重疊的情況;測定某一組分時,其他組分對它會有不同程度的干擾,此時可采用 雙波長法 排除雜質(zhì)的干擾 吸收光譜相互重疊的 a、 b兩組分。近年來由于新的、靈敏度高、選擇性好的顯色劑和掩蔽劑不斷出現(xiàn),一般不經(jīng)分離過程即可直接比色測定;還可采用聯(lián)立方程法、等吸收點法等解決定量中的干擾問題 bbbbbbbaaaaabaCCAACA????????????????????? )(,0)(212121因此上式可寫成,故 (1)光源檢查即波長的初步檢查 不論何種分光光度計在校正之前都要先檢查光源。如最常用的測定 鐠釹濾光片在 585nm的雜光水平應在 5%以內(nèi) ② 可利用某些標準溶液進行校正 如標準重鉻酸鉀溶液 (在1000ml的 / L的 KOH溶液中溶解 鉀. (K2CrO4)),在 25℃ 以 1cm比色皿在各波長測定其標準吸光度,如表 2~1。在火焰化法中,火焰的類型是影響原子化效率的主要因素。在一定條件下,熒光物質(zhì)的濃度愈大,發(fā)射的熒光強度也愈強(熒光分析的靈敏度比分光度法高,通常可達 1013g/ L,對特定物質(zhì)甚至可達到 1015g/ L ) (二 )影響熒光分析的因素 配制溶液的溶劑除水外,常用的乙醇、環(huán)己烷、四氯化碳、氯仿、丙酮等溶劑中常含有熒光雜質(zhì),影響測定,必須經(jīng)過重蒸餾等凈化處理才能使用 熒光強度與溶液的線性關(guān)系 只限于很稀的溶液 ,符合下列方程:F=kCI0,式中 F為熒光強度, C為溶液的濃度, I0為激發(fā)光
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