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生物化學(xué)技術(shù)補(bǔ)充1-吸收光譜分析法-文庫(kù)吧

2025-07-10 15:29 本頁(yè)面


【正文】 2a– A2b =Δ Aa +Δ Ab 因組分 a在 λ 1和 λ 2處的吸光系數(shù)相等,即 欲測(cè)組分 b在兩波長(zhǎng)處的吸光系數(shù)相差愈大,則靈敏度愈高。用雙波長(zhǎng)法還能消除樣品溶液背景吸收的干擾和混濁的干擾,提高測(cè)定的準(zhǔn)確性。近年來(lái)由于新的、靈敏度高、選擇性好的顯色劑和掩蔽劑不斷出現(xiàn),一般不經(jīng)分離過(guò)程即可直接比色測(cè)定;還可采用聯(lián)立方程法、等吸收點(diǎn)法等解決定量中的干擾問(wèn)題 bbbbbbbaaaaabaCCAACA????????????????????? )(,0)(212121因此上式可寫(xiě)成,故 (1)光源檢查即波長(zhǎng)的初步檢查 不論何種分光光度計(jì)在校正之前都要先檢查光源。檢查方法是將波長(zhǎng)選定在 580nm處,將狹縫開(kāi)到最大 (或打開(kāi)光門(mén) ),打開(kāi)鎢燈,在比色皿內(nèi)插一白紙片。光源正常時(shí),應(yīng)看到 均勻的黃色光斑 ,邊緣清晰整齊;如果明暗不勻,形狀異常,則應(yīng)調(diào)節(jié)光源燈的位置 常用的方法有 ① 用含某些特定元素的玻璃來(lái)較正 最常用的有 鐠釹玻璃 、鈥玻璃等。校正時(shí)將這種玻璃放在比色皿座上,以空氣調(diào) 0,測(cè)定幾個(gè)吸收峰值的波長(zhǎng)是否相符。如最常用的測(cè)定 鐠釹濾光片在 585nm的雜光水平應(yīng)在 5%以內(nèi) ② 可利用某些標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校正 如標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀溶液 (在1000ml的 / L的 KOH溶液中溶解 鉀. (K2CrO4)),在 25℃ 以 1cm比色皿在各波長(zhǎng)測(cè)定其標(biāo)準(zhǔn)吸光度,如表 2~1。重鉻酸鉀溶液的優(yōu)點(diǎn)是在紫外區(qū) 270nm及 370nm處有兩個(gè)最大吸收 (2)波長(zhǎng)校正 (二 )原子吸收分光光度法 基于光源輻射出具有待測(cè)元素特征譜線的光,通過(guò)原子化器被其中待測(cè)元素的基態(tài)原子所吸收,根據(jù)吸收而導(dǎo)致輻射特征譜線光被減弱的程度來(lái)測(cè)定待測(cè)元素的含量
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