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20xx-20xx年葡聚糖凝膠柱的使用方法-wenkub

2022-11-14 16:52:14 本頁面
 

【正文】 二級(jí)公路標(biāo)準(zhǔn),到 6 月 30 日止,工程全部完工,完成工程量 400 萬元。加強(qiáng)對(duì) “ 一法兩條例 ” 等有關(guān)文件精神的宣傳學(xué)習(xí),提高黨員遵守黨紀(jì)政紀(jì)的自覺性,調(diào)動(dòng)各方面的積極性,把工作做得更好。 一年來,還較好地完成了師直黨工委和機(jī)關(guān)事務(wù)管理局交辦的板報(bào)、櫥窗、社會(huì)公益勞動(dòng)等各項(xiàng)工作任務(wù)。在春夏播、田管、三秋等重點(diǎn)時(shí)期,根據(jù)全師統(tǒng)一安排,配合協(xié)助師農(nóng)業(yè)局等有關(guān)部門,組織進(jìn)行階段性生產(chǎn)檢查、觀摩和評(píng)比等,積極參加全師經(jīng)濟(jì)工作,效果比較理想。經(jīng)過支部民主評(píng)議,支部全體黨員的優(yōu)稱率都達(dá)到了 100%。今年共舉辦各種職工培訓(xùn)班或者以會(huì)代訓(xùn) 28 期次,參加職工 1700 多人次。在民主管理工作中,今年重點(diǎn)抓了政務(wù)公開、明白卡和明白包的發(fā)放和管理工作。支部要求黨員要在各項(xiàng)政治學(xué)習(xí)活動(dòng)、日常工作以及機(jī)關(guān)集體等活動(dòng)中起模范帶頭作用,特別強(qiáng)調(diào)全體黨員在工作中要以維護(hù)職工群眾根本利益為第一目標(biāo),處處為職工群眾著想。在支部?jī)?nèi)部,充分發(fā)揮領(lǐng)導(dǎo)干部和骨干黨員的先鋒模范作用,帶動(dòng)了支部工作躍上了一個(gè)新的臺(tái)階。支部堅(jiān)持 “ 三會(huì)一課 ” 制度,按時(shí)召開支委會(huì)、支部大會(huì)和黨課學(xué)習(xí), 堅(jiān)持黨支部委員范文最新推薦 7 經(jīng)常碰頭,有問題及時(shí)研究解決。堅(jiān)持嚴(yán)肅認(rèn)真地進(jìn)行黨員民主評(píng)議工作,切實(shí)解決黨支部、黨員中存在的問題和不足,努力提高全體黨員的思想認(rèn)識(shí),為圓滿完成全年的各項(xiàng)工作,提供思想保證。 范文最新推薦 6 工會(huì)黨支部工作總結(jié) [工會(huì)黨支部工作總結(jié) ] xxxx 年,我們工會(huì)黨支部在師直黨工委的正確領(lǐng)導(dǎo)下,認(rèn)真學(xué)習(xí)貫徹 “ 三個(gè)代表 ” 重要 思想,學(xué)習(xí)黨的十六屆四中全會(huì)精神,自覺用 “ 三個(gè)代表 ” 重要思想指導(dǎo)工作,進(jìn)一步加強(qiáng)黨支部的建設(shè),在工作中較好的發(fā)揮了政治核心和戰(zhàn)斗堡壘作用,工會(huì)黨支部工作總結(jié)。 為確保延長(zhǎng)層析柱的使 用壽命,所有的緩沖液都應(yīng)該離心或經(jīng)過 質(zhì)。 在室溫下,將凝膠溶脹于層析溶劑中至少三小時(shí),溶脹后膠體積的大小決定于所使用的溶劑系統(tǒng),請(qǐng)參考后頁之 干膠溶脹表計(jì)算特定柱體積所需要干膠的量。這對(duì)于長(zhǎng)柱(最高至 250cm)而言也是同樣的。 裝填的重要原則之一就是需要形成一個(gè)穩(wěn)定均一的柱床。 ( 5)鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重,如不在乎填料者,可用 Sephadex LH20 分鞣質(zhì) ( 6) Sephadex LH20 對(duì)黃酮類成分的分離效果極佳,方法很成型,有大量文獻(xiàn)參考。 ( 2)柱子盡可能長(zhǎng), Sephadex LH20 柱長(zhǎng)的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。 (5) 洗脫:控制流速,一般 1drop/s以下,可參見廠家的一些參數(shù) 。至少半小時(shí)打開開關(guān),流出幾個(gè)柱體種的洗脫劑,目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。極性在的用甲醇水系統(tǒng) 。如果樣品極性小,這選用正相溶劑洗脫(氯仿--甲醇),樣品用最少體積的氯仿--甲醇溶解,過濾后,濕法上樣。用得最多的是反相溶劑洗脫,以甲醇--水系統(tǒng)最為常見,先用水,逐漸增加甲醇比例,最后用100%甲醇沖柱。如果使用反相溶劑洗脫, Sephadex LH20 對(duì)化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強(qiáng),后出柱。 :將樣品完全洗脫下來后,繼續(xù)用三倍柱床體積的洗脫液沖洗凝膠后,將柱下口放在小燒杯中,慢慢打開,再將上口慢慢松開,使凝膠全部回收至小燒 杯中,備用。最后在凝膠表面上加入洗脫液,保持高度為 3— 4cm。取溴酚藍(lán)及藍(lán)色葡聚糖 — 2020 混合液 毫升,小心地加于凝膠表面上,切勿攪動(dòng)層析柱床表面。裝 柱過程中嚴(yán)禁產(chǎn)生氣泡,盡可能一次裝完,避免出現(xiàn)分層。再用傾瀉法除去凝膠上層水及細(xì)小顆粒,用蒸餾水反復(fù)洗 滌幾次,再以緩沖溶液 ( 的 Tris— 醋酸溶液 )洗滌 2— 3 次,使 pH和離子強(qiáng)度達(dá)到平衡,最后抽去溶液及凝膠顆粒內(nèi)部氣泡,凝膠可保存在緩沖液內(nèi)。 (2) 溴酚藍(lán)溶液:稱取溴酚藍(lán) 10毫克,溶于 5毫升乙醇中,充分?jǐn)嚢枋蛊淙芙猓缓笾鸬渭尤?Tris— 醋酸緩沖液 ()至溶液呈深藍(lán)色。若被分離物的分子量介于完全排阻和完全進(jìn)入網(wǎng)孔物質(zhì)的分子量之間,則在兩者之間從柱中流出,由此就可以達(dá)到分離目的。凝膠顆粒中網(wǎng)孔的大小可 通過調(diào)節(jié)葡聚糖和交聯(lián)劑的比例來控制,交聯(lián)度越大,網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)越緊密; 交聯(lián)度越小,網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)就越疏 松,網(wǎng)孔的大小決定了被分離物質(zhì)能夠自由出入凝膠內(nèi)部的分子量范圍。 2.學(xué)習(xí)葡聚糖凝膠層析的基本操作技術(shù) 。若使用數(shù)次,就需要再生處理。洗脫液的收集采用分管連續(xù)順序收集,每管收集 3ml,共收集 10管。 (3) 加樣 加樣前,首先把柱內(nèi)凝膠上面多余的蒸餾水放出,直到柱內(nèi)液面與凝膠表面相齊(或留一極薄液層)為止。然后將柱垂直安裝好,先加入 1/3柱體積蒸餾水,接著將溶脹好的凝膠邊攪勻邊連續(xù)裝入,使它們?cè)谥鶅?nèi)自然沉降。葡聚糖凝膠柱的使用方法: (1) 預(yù)處理 稱取 Sephadex G25( 50- 100目)約 5g,加入蒸餾水 100ml,置室溫下 3h進(jìn)行溶脹。同時(shí)大開下口慢速流出蒸餾水。然后,由柱的上端加水解液 2ml,注意不要讓溶液把凝膠沖松浮起,加完樣品后,打開下口緩慢放出液體至液面與凝膠面相齊,再用少量蒸餾水沖洗原來盛樣品的容器 2- 3次,待全部進(jìn)入層析柱后,即可進(jìn)行洗脫。據(jù)經(jīng)驗(yàn), 4或 5號(hào)管核苷酸濃度最大,可作為層析鑒定的樣品液。用 ,然后用蒸餾水洗至中性備用。 【實(shí)驗(yàn)原理】 凝膠層析又稱分子排阻層析或凝膠過濾,是以被分離物質(zhì)的分子量差異為基礎(chǔ)的一種層析分離技術(shù),這一技術(shù)為純化蛋白質(zhì)等生物大分子提供了一種非常溫和的分離方法。 可分離的分子量范圍從幾百到幾十萬不等。 本實(shí)驗(yàn)以葡聚糖凝膠 G— 25 作為固定相載體,來分離藍(lán)色葡聚糖 — 2020 和溴酚藍(lán)。 (3) 藍(lán)色葡聚糖 — 2020 溶液: 稱 取藍(lán)色葡聚糖 — 2020 10毫克,溶于 2 毫升 Tris— 醋酸緩沖液 ()中即成。 :將層析柱洗凈,垂直固定在鐵支架上,選擇有薄膜端作為層析柱下口,將下口接上乳膠管并用螺旋夾夾緊。再用洗脫液平衡 l至 2 個(gè)柱床體積,凝膠面上始終保持有一定的洗脫液。打開下端出口,使樣品溶液進(jìn)入凝膠內(nèi),并開始收集流出液。 :連接好凝膠柱層析系統(tǒng),調(diào)節(jié)洗脫液流速為每分鐘 1毫升,進(jìn)行洗脫。 2 Sephadex LH20 的原理。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。正相系統(tǒng)以氯仿--甲醇最為常見,先用 50%氯仿--甲醇,逐漸增加甲醇比例,最后用 100%甲醇沖柱。 5 Sephadex LH20 的步驟。極性小者一般用不含水的系統(tǒng)。 (3) 樣品處理:用盡量少的洗脫劑溶解樣品,常壓過濾。必要時(shí)更改極性(很多時(shí)一個(gè)極性就可以將樣品洗脫完畢)。所謂集中優(yōu)勢(shì)兵力,打擊敵人。 ( 7)填料反復(fù)使用,每次用完,一般可用 甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。膠顆粒越均一(粒徑分布越窄),越容易獲得穩(wěn)定均一的 柱床。在裝柱前,層析柱和儲(chǔ)槽都必須進(jìn)行徹底的清洗。使溶脹膠體積沉淀之后占總體積的 75%,上層溶劑占 25%,這時(shí),懸浮液從一個(gè)容器倒入另一容器時(shí)膠??梢苿?dòng)。 樣品體積應(yīng)該占柱總體積的 12%,同樣在使用之前樣品應(yīng)該離心或經(jīng)過 。現(xiàn)將 xxxx 年的支部工作情況總結(jié)匯報(bào)如下。同時(shí)開好領(lǐng)導(dǎo)班子民主生活會(huì),認(rèn)真征集職工意見,認(rèn)真開展批評(píng)與自我批評(píng),找差反思,并進(jìn)行認(rèn)真整改,進(jìn)一步完善領(lǐng)導(dǎo)班子的工作。努力提高組織生活質(zhì)量,發(fā)揮黨支部戰(zhàn)斗力。經(jīng)支部考核評(píng)議,推薦經(jīng)濟(jì)工作部部長(zhǎng)唐志剛同志為 “ 優(yōu)秀黨員 ” 和 “ 優(yōu)秀公務(wù)員 ” 。支部要求全體黨員在日常工作中以周到的服務(wù)、熱情的態(tài)度、高效的工作和清潔優(yōu)雅的環(huán)境,使各項(xiàng)工作讓職工群眾滿意、基層滿意。 (二)積極投身經(jīng)濟(jì)建設(shè)主戰(zhàn)場(chǎng),大力實(shí)施職工 “ 經(jīng)濟(jì)技術(shù)創(chuàng)新工程 ” ,廣泛開展一系列富有成效的勞動(dòng)競(jìng)賽、豐產(chǎn)攻關(guān)和爭(zhēng)先創(chuàng)優(yōu)活動(dòng),突出發(fā)展職工自營(yíng)經(jīng)濟(jì),以庭院養(yǎng)殖業(yè)為重點(diǎn),借助貼息貸款、科技服務(wù)等一系列優(yōu)惠政策和服務(wù)措施,促進(jìn)經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)調(diào)整和增加職工收入目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)。 范文最新推薦 9 (四)進(jìn)一步加強(qiáng)工會(huì)組織自身建設(shè),積極探索新形勢(shì)下基層工會(huì)工作的新思 路,因地制宜創(chuàng)造性地開展工作,不斷提高工會(huì)干部自身素質(zhì),提升工作能力,拓展工作空間,進(jìn)一步夯實(shí)工會(huì)組織的群眾基礎(chǔ),最大限度地把職工群眾的積極性和創(chuàng)造性引導(dǎo)好、保護(hù)好、發(fā)揮好。 (五)工會(huì)財(cái)務(wù)管理工作進(jìn)一步規(guī)范化、制度化。結(jié)合各項(xiàng)業(yè)務(wù)工作的開展,經(jīng)常組織黨員干部深入基層團(tuán)嘗連隊(duì)或車間進(jìn)行調(diào)研,了解職工隊(duì)伍基本情況,幫助那些生活中遇到困難的職工克服困難,度過難關(guān)。 三、大力開展部門黨風(fēng)廉政建設(shè) 范文最新推薦 10 一年來,工會(huì)黨支部認(rèn)真執(zhí)行黨風(fēng)廉政建設(shè)責(zé)任制,加強(qiáng)黨風(fēng)廉政建設(shè)的宣傳教育,增強(qiáng)全體黨員干部抵制腐朽思想的能力,不斷推進(jìn)黨風(fēng)廉政建設(shè)。 范文最新推薦 11 / 33 工程公司年度工作總結(jié) [工程公司年度工作總結(jié) ]回望過去的 2020 年,我們可以清晰看到那一份份令人奮進(jìn)的收獲,工程公司年度工作總結(jié)。 市茅圣公路一期工程,全長(zhǎng) km,路基寬 ,路面寬 5m,瀝青砼路面,三級(jí)公路標(biāo)準(zhǔn),工程已于 12 月中旬全部結(jié)束,完成工程量 850 萬元??傆?jì)全年已完成工程量為 1805 萬元。在工程施工中,領(lǐng)導(dǎo)班子親臨現(xiàn)場(chǎng)指 揮,統(tǒng)籌安排,精心組織,科學(xué)管理,堅(jiān)持吃住在工地,同施工員工擰成一股繩,同甘苦、共命運(yùn)。重新調(diào)整了安全生產(chǎn)領(lǐng)導(dǎo)小組,將安全責(zé)任落實(shí)到人。完成了各類機(jī)械、車輛的年檢工作。 2020 年是全國(guó) “ 安全生產(chǎn)年 ” , 為加強(qiáng)教育公司全體職工關(guān)注健康、關(guān)愛生命,切實(shí)將 “ 安全第一、預(yù)防為主、綜合治理 ” 的方針落到實(shí)處,促進(jìn)企業(yè)安全生產(chǎn)狀 況的持續(xù)穩(wěn)定好轉(zhuǎn)
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