【正文】 相 異 點 小 鼠 大 鼠 兔 貓 狗 豬 老 齡肝變化 脾臟 ， 老齡胰變化 ， 老齡脾變化 脾臟血管 ， 脾臟 ， 免疫 ， 神經(jīng)分布 脾臟血管 ， 蝶骨竇 ， 表皮 ， 鎖骨 ，硬 膜外 ， 脂肪分布 ， 鼓膜張肌 垂體血管 ， 腎動脈 ， 脾臟 ， 脾臟血管 ， 蝶骨竇 ， 腎表血管 ， 肝臟 ， 表皮核酸代謝 ， 腎上腺神經(jīng)分布 ， 精神變化 心血管分支 ， 紅細胞成熟 ， 視網(wǎng)膜血管 ， 胃腸道 ， 肝臟 ， 牙齒 ， 腎上腺 ， 皮膚 ， 雄性尿道 肝臟 ， 脾臟 （ 雄比雌大 50%） ， 無汗腺 網(wǎng)膜循環(huán) ， 肝臟循環(huán) 、 無膽囊 、 汗腺 肝臟 ， 汗腺 ， 細支氣管 ， 肺 脾臟 ， 對異種蛋白的反應 ， 汗腺 ， 喉部中 隔 ， 性索的發(fā)育 ， 睡眠 ， 熱調節(jié) 腸道循環(huán) ， 網(wǎng)膜循環(huán) ， 腎動脈 ， 胰管 ， 熱調節(jié) ， 汗腺 ， 膈 ， 喉神經(jīng) ， 睡眠 脾臟 ， 肝臟 ， 汗腺 ， 丙種球蛋白 (新生 ) 標準化原則 ?選擇與研究內容相匹配的標準化實驗動物，以保證實驗的準確性與可重復性。第八章 醫(yī)學研究中實驗設計動物的選擇及應用 如何做好動物實驗 —— 動物實驗與動物實驗技術 田楓 “I’m so proud! All of my kids are going into research” 田楓 主要內容 ? 動物實驗中實驗動物的選擇 ? 實驗動物模型 ? 影響動物實驗的因素 ? 動物實驗基本技術 ? 如何做好動物實驗 ?動物實驗是根據(jù)研究目的，恰當?shù)剡x用標準的實驗動物品種、品系，進行各種科學實驗，觀察和記錄動物的反應過程或反應結果，以探討或檢驗生命科學中未知因素的一種活動。 ?標準化動物系指經(jīng)遺傳學、微生物學、環(huán)境及營養(yǎng)控制而繁育的動物。 經(jīng)濟性原則 無菌兔 人類疾病動物模型 What is the Animal Model? ? an animal model in which normative biology or behavior can be studied, or in which a spontaneous or induced pathological process can be investigated, and in which the phenomenon in one or more respects resembles the same phenomenon in humans or other species of animal. ?醫(yī)學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關材料。 Transplant tumor animal model 指將動物或人體腫瘤移植同種或異種動物 連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。 誘癌物 放射線局部照射、化學致癌物（ 烷化劑、亞硝胺類、芳香胺類 ）、生物毒素（ 黃曲酶毒素 ）、細菌（ 幽門螺桿菌 ）等。 有些腫瘤需要接種在特定的部位 （ 對雌激素依賴的人乳腺癌MCF7 細胞系 ， 接種乳腺脂肪墊才能成活 ） 。 血小板活性因子 (PAF)誘發(fā) ： 目前已知的唯一能引起氣道高反應性炎癥介質。 ? 手術切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。 ?1968年 ， Pantelouris解剖發(fā)現(xiàn)裸鼠失去了 正常的胸腺 。 ?裸鼠自發(fā)現(xiàn)以來 ， 廣泛應用于腫瘤學 、 免疫學和病毒學等多個學科的研究 。 Other Immune Deficiency Animal NZBW F1 野生色 WBB6F1—W/WV （ WB—W/+♀ XC5TBL/6—WV/+） F1 Anaemia, gastric ulcer， bone marrow failure model White,black eye 動物模型復制原則 ? 相似性 ? 可重復性 ? 可靠性 ? 適用性和可控性 ? 易行性和經(jīng)濟性 影響動物實驗的因素 ? R=(A+B+C) D + E ? R:實驗動物的總反應 ? A:動物種間的共同反應 ? B:動物品種，品系特有的反應 ? C:動物的個體反應 ? D:環(huán)境因素（包括實驗處理） ? E:實驗誤差 ? A,B,C是由實驗動物本身的遺傳因素決定的，被選擇的實驗動物， 在嚴格控制環(huán)境因素 D或改變其中某一條件后就可能得到一個理想的實驗結果 R。 環(huán)境因素的影響 ? 氣候因素：溫度、濕度、氣流、風速等； ? 理化因素：氧、二氧化碳、粉塵、臭味、噪音、照度、殺蟲劑、消毒劑、有害化學物質等； ? 居住因素：房屋、籠具、墊料等； ? 生物因素： ? 同種生物因素：社會地位、勢力范圍、咬斗和飼養(yǎng)密度等 ? 異種生物因素：微生物、人和其它動物的關系 實驗動物環(huán)境因素的分類 ?最適宜溫度 2024℃ ，溫差： 3或 4℃ 氣候因素對動物試驗的影響 溫 度 不同種類動物“熱平衡”區(qū)的范圍不同。 因此，環(huán)境溫度高于熱平衡區(qū)比低于它使動物的應激反應更強烈。國家標準： 40%70% 氣候因素對動物試驗的影響 空氣相對濕度（ Relative air humidity） 高濕： ?80%85%人和動物都將停止生長； ?高濕容易引起代謝紊亂； ?利于微生物滋生； ?氨易溶于水，濕度高，室內氨濃度增加。籠具中的氣體理想情況應該是盡可能地與新鮮空氣接近，符合空氣中氣體組分的正確混合 (nitrogen, %。 氣候因素對動物試驗的影響 光照條件 （ Lighting Conditions） 光照對實驗動物的生理功能有著重要的調節(jié)作用，研究得最多的是對動物生理活性和繁殖性能的影響。 大鼠、小鼠和家兔是夜行性動物，強光對它們是有害的。強光可使雄性大鼠腎上腺的重量增加，給小鼠超過 500 lux的光照，會導致哺乳母鼠忽視其新生幼仔和它們的死亡。引起動物緊張，導致不安和騷動。 此外，在塑料和金屬籠具中動物的反應也會不同。 動物每天 24小時與墊料密切接觸，墊料質量對動物有著巨大影響。 墊料的物理條件也可能影響試驗 ， 如 ， 小的粒子和灰塵可刺激粘膜 ， 鋒利的顆粒可刺破皮膚 。 社會學因素 （ Sociological factors） 生物因素對動物試驗的影響 我們提供動物標準的環(huán)境、標準的飼料、清潔的水、清潔的墊料，并遠離它們自然的天敵。 群養(yǎng)的實驗動物會形成社會層級，如果從群體中移出一個動物，則社會結構將被擾亂，需要進行調整，這個調整將影響動物的激素系統(tǒng)和影響實驗。 粗暴的捉拿操作和新的員工可再激活動物逃跑的本能 ， 并可能影響到實驗結果 。老鼠們反復地做著同一動作。 勢力范圍 Male mice will fight when first comingled in a cage, and they need to be observed very closely during this time of establishing a social dominance hierarchy within the group. Weak and nonaggressive animals might be injured or killed if not removed from the cage. 實驗動物與設備和試劑同樣重要 實驗動物的影響 生物學穩(wěn)定性 ? 動物具有保持其主要機體功能在一定界限內工作的體內固有機制，這些機制在外界條件可能改變機體功能的情況下開始發(fā)揮作用 ,稱為生物學穩(wěn)定性。 ?選用實驗動物時應注意到實驗動物之間，實驗動物與人之間的年齡對應，以便進行分析和比較。 2. 對生長發(fā)育的影響 ? 動物生長發(fā)育常為實驗的衡量指標。 4. 對免疫功能的影響 ? VitA不足，免疫功能明顯下降。 2. 動物實驗時的營養(yǎng) 動物體內各營養(yǎng)素間的復雜關系對營養(yǎng)研究至關重要。 細菌感染的影響 ? 人畜共患病原菌和動物致病菌 ? 條件性致病菌 ? 正常菌群 ? 真菌感染對動物實驗結果的影響 寄生蟲感染的影響 ? 掠奪宿主的營養(yǎng) ? 體外寄生蟲對動物的騷擾 ? 對動物機體產(chǎn)生機械性損傷 ? 對宿主產(chǎn)生毒性反應 ? 對宿主生理生化和免疫系統(tǒng)的影響 ? 實驗動物的選擇 ? 實驗季節(jié) ? 晝夜過程 ? 麻醉 ? 手術技巧 ? 實驗藥物 ? 對照問題 技術因素的影響 ?許多生物學功能的活性是周期性的。 ?例如，由于在一天中的不同時間給予動物，一種藥物的陽性和陰性（毒性的）反應可能發(fā)生變化。玻璃管動物標簽閱讀器的最佳閱讀距離為 712CM， 不要太近或太遠 動物體內色素標簽 ? 熒光標記是不易溶于水，經(jīng)過分解的植物材料，性能穩(wěn)定，與蛋白質可以保持良好的平衡。 ? 一般可按下列比例換算：人用藥量為 1；小鼠、大鼠為 2550；豚鼠、家兔為 1520；犬、貓為 510。 ? 導尿法：適用于雄性兔、犬等。 。 。 Euthanasia (cont.)Rodents ? Acceptable – Inhalant anesthetic overdose – CO – CO2 – Barbiturate overdose – Microwave irraditation ? Conditionally acceptable – N2 (sedated or anesthetized) – Argon – Cervical dislocation (BW200g) – Decapitation Euthanasia (cont.)Unacceptable ? Humane concerns – Depression – Drowning – Strychnine ? For use in conscious animals – Exsanguination – Rapid freezing – Air embolism ? Sole method – Nicotine – Magnesium sulfate – Potassium chloride – All curariform agents – Stunning ? Hazardous to humans – Chloroform – Cyanide 常用脊椎動物安樂死方法 小于125g嚙齒動物 125g—1kg嚙齒動物 /兔 15kg嚙齒動物 /兔 狗 貓 非人靈長類 反芻動物、馬、豬 二氧化碳 O O O N N N NX Barbiturate 注射液，靜脈注射 O O O O O O O Barbiturate 注射液，腹腔注射 O O O N