【正文】 O N O 先麻醉，之后放血致死 O O O O O O O 先麻醉，之后靜脈注射KCl(2mmol/kg) O O O O O O O 先麻醉，之后斷頭 O O M N N N N 先麻醉，之后頸椎脫臼 O O N N N N N 動物清醒中直接斷頭 M M M N N N N 動物清醒中直接頸椎脫臼 M N N N N N N 電昏后放血致死 N N N N N N O 說明： O:建議使用方法； N:不得使用方法； M:一般情況不推薦使用，除非實驗需要。 ?用過的廢墊料要裝入垃圾袋中或專用的墊料容器內，注意防蠅、防滲漏，并及時焚燒處理。 Memorial Tower for Laboratory animal 如何做好動物實驗？ 明確目的及必要性 首先 要弄清其目的是什么 ,動物實驗也不例外。動物質量許可證： 京 SCXK 2022008。 動物名稱 遺傳背景 動物數量和體重 性別 動物來源 實驗飼養(yǎng)條件 處死方法 動物質量資料 論文中關于動物描述舉例 Materials and methods . Animals Male and female breeder mice of SAMP and SAMR strains were a gift from the Biologic Laboratory of Takeda Chemical Industries (Osaka, Japan). The offspring of these breeders were used in the current study. Because of the low yield of pups (average of and pups/litter for SAMP8 and SAMR1, respectively) from each mating, both males and females were included in the experiments. A total of 164 mice were used in these studies. The Animal Research Committee of the Kochi Medical School approved all research protocols. Mice were housed under conditions free of specific pathogens at a temperature of 24 176。 實驗方法： ****************************************。 確認必要性 “ 3R” 原則 動物實驗倫理和動物福利 作好實驗設計 對照原則 隨機化原則 重復原則 均衡性原則 如何做好動物實驗？ 選擇適宜的實驗動物 實驗動物遺傳特性的選擇 實驗動物微生物等級的選擇 實驗動物數量、規(guī)格和性別的選擇 做好實驗操作和實驗條件保障工作 作好動物實驗結果的統計、分析和資料的 整理、歸檔工作 研究論文中有關實驗動物的描述 (1)品種、品系描述清楚； (2)來源明確； (3)體重明確； (4)等級明確； (5)飼養(yǎng)環(huán)境和實驗環(huán)境明確； (6)性別明確； (7)有對飼養(yǎng)方式的描述 (如飼料類型、營養(yǎng)水平、 照明方式、溫度、濕度要求 )； (8)所用動物數量準確； (9)對動物的健康狀況的描述詳細； (10)對動物實驗的處理方式有單獨清楚的交代； (11)動物福利倫理審查情況。其他放射性廢棄物，應進行中、長期安全包裝后送放射性廢物處理站處理。 ?一次性使用的注射器、針頭、手套等物品使用后經消毒劑浸泡清洗，毀形后按要求統一進行無害化處理。 簡單，價廉，易操作。 。 麻醉的意義：第一是善待動物，第二是提高動物實驗的 效率。 tail cliping Bleeding (cont.) ? Maximum amount of blood that can be safely removed for blood collection = 1% of body blood volume is approximately 6% of body weight – kg rabbit X 1% = 50 ml blood ? Animal produce ml/kg/day of blood – 5 kg rabbit, 1ml/kg = X ml/5kg, X = 5 ml/day – It will takes 10 days for the animals to replace the 50 ml that were with drawn Adult Blood Volume A n ima l A d u lt t o t a lb lo o dv o lu m e ( m l)S in g le s a m p lev o lu m e ( 1 0 %B V , m l)E x s a n g u in a t io nv o lu m e ( m l)R a b b it 1 6 0 4 8 0 2 0 4 0 6 0 1 6 0G u in e a p ig 4 0 8 0 4 8 1 5 3 0H a m s t e r 6 . 8 1 2 0 . 5 1 . 2 3 5G e r b il 4 . 4 8 0 . 5 1 2 4Mo u s e 1 . 6 3 . 2 0 . 2 0 . 3 1 1 . 5R a t 2 0 4 0 2 3 8 1 2Ophthalmic venous plexus Cardiac puncture 實驗動物的采尿方法 ? 代謝籠法：能將尿液和糞便分開而達到收集動物尿液目的的特殊裝置。通過注射將熒光材料植入到動物皮下，可以區(qū)分動物 動物體內色素標簽效果 動物體內色素標簽 顏色 ? HT201 RED 紅 ? HT202 BLUE 藍 ? HT203 YELLOW 黃 ? HT204 GREEN 綠 ? HT205 PURPLE 紫 紋身 皮下注射 腹腔注射 肌肉注射 Vein Injection of Mouse Vein Injection of Rabbit Vein Injection of Dog Gavaging Method of Mouse Gavaging Method of Rabbit Injection volume in milliliters Animal SC IM IV IP Rat 58 510 Mouse 23 23 Hamster 34 34 G. P. 510 58 Rabbit 3050 15 50100 人與動物的給藥量換算方法 ? 人與動物對同一藥物的耐受性相差很大。 ? 原則： ? 動物背部朝上 頭頂 右前肢 右側腰部 右后肢 4 、 尾跟部 左后肢 左側腰部 左前肢 背部 不標號 0或 10 ? 后面的數字永遠大于前 面的數字，如 1 2 5 8 12 345等等；而 沒有 1 2 4 65等等。這些周期的長度可為數毫秒、數小時、數天、或數年。如 Pb在純養(yǎng)分日糧中比天然組分日糧表現較強的毒性。 5. 對動物疾病發(fā)生、發(fā)展和轉歸的影響 6. 對動物麻醉反應的影響 7. 其它 如：抗營養(yǎng)因子、農藥殘留、重金屬污染、毒素等。 對非營養(yǎng)研究的影響 營養(yǎng)因素的影響 3. 對生理生化指標的影響 ? 低蛋白水平降低血紅蛋白、血清總蛋白、血清白蛋白和血清肽類激素水平。 1. 對采食量的影響 ? 飼料組成不同導致的能量濃度差異，直接影響采食。 影響動物生物學穩(wěn)定性的因素 ?物理化學的因素 ?心理的因素 ?飼養(yǎng)管理因素 ?動物本身的遺傳特性 年齡和體重 ?動物的解剖生理特征和反應性隨年齡而有明顯的變化。而另一只老鼠則在不停地翻跟斗，每秒鐘一個，一口氣能翻 40分鐘。 飼養(yǎng)密度 —— 每籠動物數 （ Number of animals per cage） 飼養(yǎng)密度 飼養(yǎng)密度 ? 身處狹小籠中，實驗小鼠精神失常。 大多數動物已經形成了對人類的不信任 ， 傾向于逃離人類 。例如： 一個雌性大鼠每 4? 5天一個發(fā)情期 ， 在發(fā)情期每天的夜晚它要跑 10? 15 km。動物幾乎沒有選擇的權利，這也是一個明顯的應激因素。此外，木材也可能已被多種化學物質污染，進而可能轉染動物，從而影響試驗結果。不透明籠具可能最適于動物生長，盡管這些籠具給實驗觀察帶來不便，而且觀察在不透明籠具中的動物可能會打擾它們。 理化因素對動物試驗的影響 實驗動物在籠具中排泄，有機物質分解產生過多的二氧化碳、氨氣和其他氣體。 黑暗時即使短暫的曝光也對動物產生顯著的影響。在籠架底部的動物能夠找到陰影區(qū)域，而處于籠架頂端的動物只能擠在食槽底下避免過多的光照。一些品系的大鼠每天的光照低于 8小時就不發(fā)情，如果每天光照時間超過 14小時 它們將持續(xù)發(fā)情而不排卵。 carbon dioxide, %。 氣候因素對動物試驗的影響 Ringtail: Low environmental humidity, high temperatures, and drafts predispose young rats and mice to develop annular constrictions of the tail and occasionally feet or digits. Localized edema can lead to dry gangrene and tissue sloughing. 通風換氣 （ Gas ponents in air and ventilation） 飼養(yǎng)間空氣的好壞通常進入房間的人有最直接的感受。當然，應用其它物質也可能獲得相反的結果，亦即動物在熱穩(wěn)定區(qū)的耐受性最小。 如果環(huán)境溫度降至低于熱平衡區(qū)溫度的下限，動物的代謝率將呈線性增長。 ? 動物實驗 在實驗前和實驗中控制各種環(huán)境因素十分重要。s do not mount an antibody response to challenge by immunoge