dna復(fù)制是半保留式的-wenkub
2023-05-11 08:46:15 本頁面
【正文】 現(xiàn)的 DNA聚合酶就是現(xiàn)在的 DNA聚合酶 I， 是分子量為 109,000的一條多肽鏈 ， 具有聚合活性及 3ˊ 5ˊ 外切酶活性 ， 還有 5ˊ 3ˊ 核酸酶活性 。 實驗結(jié)果充分說明 DNA復(fù)制是半保留復(fù)制。 將生長在 15NH4Cl培養(yǎng)基的 氮源，但密度較低的 14N （ 14NH4Cl） 培養(yǎng)基中培養(yǎng)。培養(yǎng)兩代，并分別取每一代的 DNA進行密度梯度離心。 兩種復(fù)制模式 （ a）單向復(fù)制模式 （ b）雙向復(fù)制模式 DNA復(fù)制是雙向進行的 大腸桿菌染色體DNA雙向復(fù)制模式 復(fù)制起點 復(fù)制叉 復(fù)制叉 真核生物 DNA復(fù)制有多個復(fù)制起點，同時雙向復(fù)制 DNA合成時 ， 核苷酸是通過酶催化加到一個正在延伸的DNA鏈上 ， 這種酶要求一條完整的 DNA鏈作為模板 ， 去合成一條互補鏈 ， 所以這樣的酶叫做 DNA指導(dǎo)的 DNA聚合酶 。 以后又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了功能不同的另外幾種 DNA聚合酶 ， 下表歸納了到目前為止從大腸桿菌和哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的 DNA聚合酶的基本特征 。 [詳見 P414— 415] 由于 DNA的兩條模板鏈是反平行的 ， 又因為 DNA總是沿5ˊ→ 3ˊ方向合成 ， 即兩條新鏈是沿著相反方向合成 。 DNA聚合酶 III同時催化兩條鏈的合成 崗崎片段 復(fù)制叉移動方向 先導(dǎo)鏈 滯后鏈 DNA聚合酶 III同時催化兩條鏈的合成 前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成 每個崗崎片段的合成開始于一個 RNA引物 不連續(xù)合成解釋了滯后鏈是怎樣合成的 ， 但不能解釋每個崗崎片段是怎樣開始合成的 。 RNA引物是通過 引發(fā)酶 合成的 ， 引發(fā)酶 是一個稱為 引發(fā)體的大的復(fù)合物 中的成分 ， 引發(fā)體還包括使 DNA解旋的 解旋酶和其它的一些輔助蛋白 。 然后 5ˊ→ 3ˊ外切酶活性催化第 1個 RNA核苷酸水解 ， 而 5ˊ→ 3ˊ聚合酶活性將一個脫氧核苷酸加到新 DNA鏈的 3ˊ端 ， 這種同時降解和合成的過程稱為 切口平移 。 引發(fā)體 引物酶 DNA聚合酶 III DNA聚合酶 I DNA連接酶 滯后鏈 前導(dǎo)鏈 單鏈結(jié)合蛋白 解旋酶 復(fù)制叉移動需要多蛋白復(fù)合體 復(fù)制叉的移動除了需要用于聚合反應(yīng)的 DNA pol III以外，至少還需要四種其它蛋白質(zhì)。 DnaB使復(fù)制叉前面的雙螺旋 DNA解旋 ，解旋過程是與核苷三磷酸水解過程相偶聯(lián)的 。 單鏈結(jié)合蛋白 （ SSB） ：其 作用是當(dāng)解旋酶作用后 ， 它可以防止解開的螺旋恢復(fù)原來狀態(tài) 。 RNA引物可以被 DNA pol I除去 ， 然后用互補的脫氧核苷酸填上 。 大腸桿菌和其它細菌的 DNA連接酶要求 NAD+提供能量，在高等生物和噬菌體中，則要求 ATP提供能量。 ， 是位于稱為 oriC遺傳位點的單一一個起點 。 (見 P422表 344) 富含 AT重復(fù)區(qū)的部位起著使復(fù)制泡中心定位的作用。 ter序列排列在染色體上制造了一個復(fù)制叉 “ 陷井 ” 區(qū) ， 復(fù)制叉可以進入但不能出來 。 一旦形成 Tuster復(fù)合物 ， 就可以通過阻止解旋酶解旋 DNA來封閉復(fù)制叉的通路 。 箭頭表示為每個復(fù)制體設(shè)置的可能的終止部位 真核生物染色體一般都比細菌染色體大得多，如 E,coli基因組是由 103kb組成的單一染色體，而真核生物通常含有一個以上的染色體，一般在 20至 30對染色體之間。 ? 真核生物也象 ，復(fù)制是雙向的。 真核生物染色體在全部復(fù)制完之前起點不再重新開始復(fù)制；而在快速生長的原核中，起點可以連續(xù)發(fā)動復(fù)制。由 端粒酶 負責(zé)新合成鏈 5?RNA引物切除后的填補，亦保持 端粒的一定長度 。 DNA復(fù)制的其它方式 線粒體 DNA的復(fù)制采取的是一種特殊的 D環(huán) 復(fù)制方式： 環(huán)狀雙螺旋 DNA在某一點解旋，開始復(fù)制。當(dāng)前導(dǎo)鏈合成到某一點時， 露出滯后鏈的起點 ，滯后鏈開始復(fù)制。 該酶具有 RNase H活性 （ 降解 RNA活性 ） 和DNA聚合酶活性 。 據(jù)估計人體內(nèi)細胞中每天每 109堿基對就有多達 103堿基對發(fā)生脫嘌呤 。 一個胸腺嘧啶的 C C6與相鄰胸腺嘧啶上同樣位置的碳之間形成一個 環(huán)丁基環(huán) ， 結(jié)果使得 DNA骨架的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變 ， 有可能引起與互補鏈上的相應(yīng)的腺嘌呤殘基之間的氫鍵斷裂 。 DNA損傷之一的胸腺嘧啶二聚體可以通過直接修復(fù)機制修復(fù)。 首先 ABC切除核酸酶從損傷部位的兩側(cè)切去含有損傷的 DNA鏈， 結(jié)果都出現(xiàn)一個單鏈缺口。 每種 DNA糖基化酶通常對一種類型的堿基損傷特異。 尿嘧啶糖基化酶系統(tǒng)的修復(fù)過程 D. 錯配修復(fù) 偶爾錯誤的 DNA復(fù)制會導(dǎo)致新合成的鏈與模板鏈之間的一個錯誤的堿基配對 。 這一區(qū)別很重要 ， 因為修復(fù)酶需要識別兩個核苷酸殘基中的哪一個是錯配的 ，否則如果將
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