【正文】 =4550ml 酒精+45ml水75959575=2075ml 酒精+20ml水85959585=1085ml 酒精+10ml水（四）固定液配制1． F．A．A固定液 又稱標(biāo)準(zhǔn)固定液、萬能固定液。鐵礬蘇木精染液為染細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)最好的染色劑，但要注意甲液與乙液在任何情況下決不能混合。配方很多，現(xiàn)僅舉海氏(Heidenhain’s)蘇木精染色液，又稱鐵礬蘇木精染色液。為酸性染料，能將細(xì)胞質(zhì)，纖維素細(xì)胞壁染成鮮艷綠色，著色很快，故要很好的掌握著色時(shí)間。配方：橘紅G 1 g； 95％酒精100 ml12. 番紅(Safranin O) 番紅為堿性染料，適用于染木質(zhì)化、角質(zhì)化、栓質(zhì)化的細(xì)胞壁，對細(xì)胞核中染色質(zhì)、染色體和花粉外壁等都可染成鮮艷的紅色。配方：龍膽紫1 g ； 蒸餾水100 ml9．苯胺蘭(Aniline blue)溶液 為酸性染料，對纖維素細(xì)胞壁、非染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)、鞭毛等，尤其是染絲狀藻類效果好。配方： g。山梨醇為助滲劑，兼有穩(wěn)定染色液的作用，假如沒有山梨醇也能染色，但效果較差。原液C：．取原液B 55 ml，加入6 ml 冰醋酸和6 ml 福爾馬林(38％的甲醛)。4．卡寶染色液(Carbol fuchsine) 即石炭酸一品紅染色液(核染色劑)。配方：碘化鉀3g； 蒸餾水100ml； 碘1g 先將碘化鉀溶于蒸餾水中，待全溶解后再加碘，振蕩溶解，將此液保存在棕色玻璃瓶內(nèi)。此液呈紅色，盛人玻璃缸中，加蓋以防氧化變質(zhì)，反復(fù)使用直至變成藍(lán)黑色為止。(二)玻片清洗新蓋玻片和載玻片分別放在鹽酸酒精(70％～95％工業(yè)酒精100 ml，加濃鹽酸2 ml)中浸4h，流水沖凈，蒸餾水蕩滌、晾干，置于95％酒精的玻璃缸中加蓋備用。四、學(xué)生常用實(shí)驗(yàn)用品：繪圖鉛筆兩支(2H3H)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙、橡皮、直尺、鑷子、刀片等。4．積極開展第二課堂的教學(xué)活動(dòng)。2，必須仔細(xì)聽取教師對實(shí)驗(yàn)課要求、操作中的重點(diǎn)、難點(diǎn)和應(yīng)注意問題的講解。嚴(yán)格按規(guī)定使用酸、堿等藥品每次實(shí)驗(yàn)后。損壞物品時(shí)應(yīng)主動(dòng)向教師報(bào)告并及時(shí)登記。1．學(xué)生應(yīng)提前5—10min進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作。0 植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物系植物教研室緒 論一、實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的目的與意義“植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”是高等院校生物科學(xué)專業(yè)、生物技術(shù)專業(yè)和生態(tài)學(xué)專業(yè)開設(shè)的一門重要的理論聯(lián)系實(shí)際的課程。2．按號使用顯微鏡和解剖鏡，使用前要檢查，如果發(fā)現(xiàn)損壞或發(fā)生故障，要及時(shí)報(bào)告指導(dǎo)教師，不可自行修理或拆卸顯微鏡的任何部件。4．保持實(shí)驗(yàn)室安靜、整潔。各實(shí)驗(yàn)小組輪流打掃實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生。3．實(shí)驗(yàn)時(shí)，學(xué)生應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)教材獨(dú)立操作，仔細(xì)觀察，隨時(shí)作好記錄。學(xué)生除了在實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)外，還應(yīng)以整個(gè)校園或公園、植物園中的植物作為學(xué)習(xí)的目標(biāo)，理論聯(lián)系實(shí)際進(jìn)行學(xué)習(xí)。 目 錄緒 論植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室一般操作和常用藥品基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡的構(gòu)造和使用方法,植物生活細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)二、植物細(xì)胞內(nèi)質(zhì)體和液泡的觀察實(shí)驗(yàn)三、植物細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)藏物質(zhì)和細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分的觀察鑒定實(shí)驗(yàn)四、植物的組織：分生組織、基本組織、保護(hù)組織實(shí)驗(yàn)五、植物的組織：輸導(dǎo)組織、機(jī)械組織、分泌組織實(shí)驗(yàn)六、植物的根： 初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)七、植物的莖： 初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)八、植物的葉： 中生葉、旱生葉和水生葉實(shí)驗(yàn)九、植物的繁殖： 雄蕊、雌蕊、胚和胚乳的發(fā)育實(shí)驗(yàn)十、菌類和地衣植物： 鞭毛菌、接合菌、子囊菌、擔(dān)子菌、地衣實(shí)驗(yàn)十一、苔蘚植物： 苔綱和蘚綱實(shí)驗(yàn)十二、蕨類植物： 松葉蕨、石松、木賊、真蕨實(shí)驗(yàn)十三、裸子植物： 蘇鐵、銀杏、松柏、買麻藤實(shí)驗(yàn)十四、被子植物：（木蘭亞綱、金縷梅亞綱、石竹亞綱）實(shí)驗(yàn)十五、被子植物：（五椏果亞綱、薔薇亞綱）實(shí)驗(yàn)十六、被子植物：（薔薇亞綱）實(shí)驗(yàn)十七、被子植物：（菊亞綱）實(shí)驗(yàn)十八、被子植物：（鴨跖草亞綱、百合亞綱）綜合實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一 植物形態(tài)解剖基本技能的綜合訓(xùn)練徒手切片法、石蠟制片法實(shí)驗(yàn)二、湖泊藻類植物觀察實(shí)驗(yàn)三、種子植物系統(tǒng)分類研究法附錄I 中國珍惜瀕危植物名錄（部分）附錄II 內(nèi)蒙古珍惜瀕危植物名錄學(xué)生自選設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浄N子植物分類教學(xué)實(shí)習(xí)主要參考文獻(xiàn)植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室一般操作和常用藥品 一、玻璃器皿的清潔(一)器皿的清洗新器皿必須洗滌才能使用。(三)舊玻片、封膠玻片清洗在洗衣粉水中煮沸15min除去樹膠和臟物，或浸入廢二甲苯中脫膠，分開載、蓋玻片，清水沖凈，清水沖凈，蒸餾水蕩滌，置于95％酒精的玻缸中浸泡加蓋備用。二、常用實(shí)驗(yàn)藥劑配制(一)藥品的規(guī)格(表1—1)(二)染色液1．碘一碘化鉀(I—KI)(Iodine potassium iodide)溶液能將淀粉染成藍(lán)紫色，蛋白質(zhì)染成黃色，也是植物組織化學(xué)測定的重要試劑。2．蘇丹Ⅲ(Sudan?、?或 Ⅳ) 能使木栓化、角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪、揮發(fā)油、樹脂等染成紅色或橙紅色。配制步驟： 先配成三種原液，再配成染色液。(原液A和原液C可長期保存，原液B限兩周內(nèi)使用)。5. 中性紅(Neutral red)溶液 用于染細(xì)胞中的液泡，可鑒定細(xì)胞死活。 95％酒清100 ml .(也常用于95％酒精脫水時(shí)，加入少量曙紅溶液，其目的是在包埋、切片、展片、鏡檢時(shí)便于識別材料)。還多用于與真曙紅作雙重染色，對于高等植物多用于與番紅作雙重染色。并能與固綠、苯胺蘭等作雙重染色，與橘紅G、結(jié)晶紫作三重染色。配方：(1)固綠酒精液 固綠1 g； 95％酒精100 ml(2)苯胺固綠酒精液 固綠 1 g, 95％酒精40 ml,苯胺10 ml配后充分搖勻，過濾后使用。配方：甲液(媒染劑)，硫酸鐵銨（鐵礬）２～４g， 蒸餾水100 ml.　　　　　 必須保持新鮮，最好臨用之前配制 乙液(染色劑)，蘇木精 g，95％酒精 10 ml，蒸餾水 100 ml.配制步驟：(1)將蘇木精溶于酒精中，瓶口用雙層紗布包扎，使其充分氧化(通常在室內(nèi)放置兩個(gè)月后方可使用)。(三)各級酒精(脫水劑)配制由于無水酒精價(jià)格較高，故常用95％的酒精配制。適用于一般根、莖、葉、花藥、子房組織切片。．A好。常用的透明劑有以下兩種：1．二甲苯(Xylol) 是目前應(yīng)用最廣的透明劑，它作用迅速，能與酒精混合，溶解石蠟，又可與封藏用的樹膠混合，但使用時(shí)必須脫凈水分，否則發(fā)生乳狀混濁。由于氯仿能破壞染色，因此染色后不宜用氯仿作透明劑。2．蛋清甘油 將雞蛋一端打開一個(gè)小孔，只讓蛋白慢慢流人燒杯內(nèi)。將樹膠溶人二甲苯即配成。2．甘油膠 優(yōu)質(zhì)白明膠1g，溶于6 ml蒸餾水中(40～50℃)，加7 ml甘油后，滴人2—3滴石炭酸防腐，過濾，可長期貯存。(八)解離液常用于根尖等細(xì)胞的涂片，它能使細(xì)胞壁中層(果膠質(zhì))溶解，而使細(xì)胞分開。（九）預(yù)處理液用于根尖壓片的前處理，能使細(xì)胞有絲分裂染色體縮短。離析液種類很多，現(xiàn)介紹最常用的兩種1．鉻酸一硝酸離析液配方：10％ 鉻酸液+10% 硝酸液，等量混合而成。用于擦拭顯微鏡鏡頭上的油跡和污垢等(注意：瓶口必須塞緊，以免揮發(fā))。(一)防腐液浸制標(biāo)本浸制標(biāo)本供形態(tài)解剖觀察用。為防止材料變脆，可加入少量甘油。有些葉、花、花序也可壓制成臘葉標(biāo)本，裝訂在臺(tái)紙上，外面再用塑料薄膜套好加以保護(hù)。(二)常用玻璃器皿：培養(yǎng)皿、滴瓶及滴管(少量為棕色)、燒杯、樹膠瓶、標(biāo)本瓶、酒精燈、量筒、玻棒、載玻片、蓋玻片、表面皿。三、 通過觀察植物細(xì)胞，基本掌握顯微鏡的使用方法。我們實(shí)驗(yàn)課用的是光學(xué)顯微鏡中最常用的復(fù)式顯微鏡。具一定形狀，如馬蹄形、橢圓形、三角形等。（4）載物臺(tái)（鏡臺(tái)）載物臺(tái)供移動(dòng)鏡檢材料之用。（5）鏡臂 直立于鏡座后側(cè)，是顯微鏡的脊梁，所有機(jī)械裝置都直接或間接地附在其上。（7）物鏡轉(zhuǎn)換器（物鏡轉(zhuǎn)換盤） 位于鏡筒下端，其上安裝物鏡。（9）鏡筒是連接目鏡和物鏡的不透光金屬園筒，鏡筒下端具固定的螺絲。上面一塊與眼球接觸的叫接目透鏡；下面一塊靠近視野的叫會(huì)聚透鏡（或叫視野透鏡）。（光學(xué)成象原理圖略）目鏡的放大：目鏡的放大倍數(shù)通?？淘谀跨R上，以5X、8X、10X等數(shù)字表示。主要功能為聚集來自標(biāo)本的光線，使物體做第一次造象。倍數(shù)在4X以下，100X以上用的不多。物鏡的放大倍數(shù)愈大，其工作距離愈小。物鏡倍數(shù)愈大，焦點(diǎn)深度愈淺。分辨力與波長和鏡囗率（）有關(guān)。一般情況常用平面鏡，在光線較暗的條件下可用凹面鏡取光。也是由一組透鏡組成。（4）使用電源的顯微鏡無反光鏡。取鏡要右手緊握鏡臂，左手托穩(wěn)鏡座，鏡體保持垂直平衡不得震動(dòng)，嚴(yán)防目鏡，反光鏡（均為插入式安裝）甩落地面和粗調(diào)節(jié)器的脫口等損傷。如鏡頭特別污濁，則需要用二甲苯清潔鏡頭，這時(shí)用擦鏡紙蘸二甲苯少許來擦拭鏡頭，但為了防止溶解鏡頭貼膠，用二甲苯一定要少。4．對焦（調(diào)焦）：將制好的切片，置鏡臺(tái)上，使材料對準(zhǔn)鏡臺(tái)孔中央位置，用壓片夾固定住切片。觀察完，取片前一定將鏡頭換到低倍鏡后再抽片，以防磨損鏡頭。7. 歸還顯微鏡之前，做到鏡頭、鏡臂、聚光鏡、反光鏡退回原來的位置。如若看不清結(jié)構(gòu)，可將制片取下，從一側(cè)滴一滴稀碘液，從另一側(cè)用吸水紙將水吸去，再進(jìn)行觀察。用于計(jì)算數(shù)目和測量面積的為網(wǎng)格標(biāo)尺，由縱橫交錯(cuò)的網(wǎng)格組成。確定目鏡測微尺的格值后，去掉臺(tái)式測微尺，把需觀察的樣品制片，置載物臺(tái)上，即可用目鏡測微尺測量樣品實(shí)際的長度，如被測細(xì)胞直徑為目鏡測微尺2格，該細(xì)胞則為10μm。因此，繪圖必須把實(shí)驗(yàn)材料觀察清楚，選出典型部位后再畫。2．掌握所繪圖中各部分比例，力求真實(shí)反映觀察到的材料。4．植物學(xué)繪圖常分詳圖和輪廓圖二種，一般結(jié)構(gòu)比較簡單的如表皮細(xì)胞構(gòu)造繪詳圖。用解剖針、鑷子移至載玻片水滴中，左手拇指和食指沿窄面夾住載玻片，右手用鑷子輕輕夾起蓋玻片，以其一邊緩緩蓋下，注意勿急促過猛產(chǎn)生氣泡。按要求備好的實(shí)驗(yàn)材料切片應(yīng)具備以下條件：①創(chuàng)造最好的光學(xué)環(huán)境條件。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法：一、質(zhì)體的觀察：質(zhì)體是植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器，也是在光學(xué)顯微鏡下所能觀察到的細(xì)胞器。實(shí)驗(yàn)材料是紫鴨趾草葉，用鑷子撕取鴨趾草葉近中脈下表皮一小塊，用蒸餾水封片觀察。一般存在于植物的花、果實(shí)、根等器官的細(xì)胞內(nèi)，呈現(xiàn)紅、桔紅、黃色。2．晶體：液泡內(nèi)含有各種鹽類，其中草酸鈣和碳酸鈣晶體常見。切片前，先將要切的新鮮材料浸入水中，將刀片醮水增加刀片光滑，再切材料，切片時(shí)選取浸入水中材料，夾在左手拇指和食指之間，使材料保持豎直，切面要平坦，再用右手拇指和食指持刀片，刀刃要鋒利，切時(shí)刀口向內(nèi)平行置于材料平面，手腕穩(wěn)定不動(dòng)，而用胳膊滑動(dòng)，由刀尾向刀頭移動(dòng)切下材料厚薄均勻，切忌切斜。實(shí)驗(yàn)三 植物細(xì)胞內(nèi)貯藏物質(zhì)和細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分的觀察鑒定實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私饧?xì)胞內(nèi)貯藏物質(zhì)形態(tài)特點(diǎn)和化學(xué)鑒定方法，了解細(xì)胞壁的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，并用化學(xué)方法鑒定細(xì)胞壁的不同成分。另外取燕麥種子壓碎后用蒸餾水（以下蒸餾水略為水）封片。取蓖麻種子胚乳石蠟制片觀察，可看到近于球形染成紅色顆粒即為糊粉粒，它的外面包被一層膜，內(nèi)充滿有無定形膠質(zhì)包埋著擬晶體和無定數(shù)的球晶體。脂肪：多為油滴狀態(tài)分布在某些植物種子子葉或胚乳細(xì)胞質(zhì)中。1．中層：主要成分為果膠質(zhì)，具粘性和彈性。次生壁是有些植物細(xì)胞停止生長以后，在初生壁內(nèi)側(cè)繼續(xù)積累壁物質(zhì)形成。（示范）4．細(xì)胞壁性質(zhì)變化的觀察鑒定：有些植物細(xì)胞在生長過程中細(xì)胞壁內(nèi)由于滲入角質(zhì)、栓質(zhì)（均為脂肪物質(zhì)）和木質(zhì)素（苯基丙烷聚合物）物質(zhì)，使細(xì)胞壁發(fā)生角質(zhì)化、栓質(zhì)化、木質(zhì)化的變化過程。角質(zhì)的化學(xué)鑒定：取橡皮樹葉做徒手切片，置于載玻片上，加蘇丹Ⅲ液染色15－30分鐘，然后用水洗去染料，再用水封片觀察，葉最外邊表皮細(xì)胞的角質(zhì)膜被染成桔紅色。木質(zhì)素的化學(xué)鑒定：取丁香莖，去掉樹皮，徒手橫切面，選取最薄的材料置載玻片上，先加一滴間苯三酚，然后再加一滴25%HCL，封片觀察木質(zhì)化的細(xì)胞壁被染成玫瑰紅色。具緣紋孔：觀察松莖三切面石蠟切片。同時(shí)明確各類組織形態(tài)結(jié)構(gòu)特征的不同生理分工的結(jié)果，即建立細(xì)胞結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和生理功能相適應(yīng)的概念。這是一群由胚胎保留下來的細(xì)胞。原分生組織和初生分生組織都位于器官頂端，統(tǒng)稱為頂端分生組織。側(cè)生分生組織包括形成層和木栓形成層，其細(xì)胞特點(diǎn)在橫切面上看細(xì)胞為扁平狀，細(xì)胞核相當(dāng)大，液泡化較明顯。最外方幾層排列規(guī)則的方形細(xì)胞，這些細(xì)胞由內(nèi)層向外層原生質(zhì)體逐漸消失，細(xì)胞壁逐漸栓質(zhì)化，最后變成死細(xì)胞，稱木栓細(xì)胞；在木栓層內(nèi)有1—2層扁平狀、體積較小、核較明顯、細(xì)胞質(zhì)較濃的細(xì)胞是木栓形成層。貯藏組織：主要在種子、果實(shí)和塊根、塊莖內(nèi)大量存在。實(shí)驗(yàn)觀察：取芹菜葉柄，做徒手橫切面，水封片或稀I－K I液染色封片觀察，掌握基本組織的共同結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。2．氣孔：正面觀由兩個(gè)半月形保衛(wèi)細(xì)胞凹面相對形成，兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞之間空隙為氣孔，保衛(wèi)細(xì)胞和氣孔統(tǒng)稱為氣孔器，保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)含有葉綠體。2．玉米葉（單子葉植物）表皮，方法同上。2．皮孔：先在氣孔下方位置的木栓形成層，由于額外產(chǎn)生大量的補(bǔ)充細(xì)胞，局部膨大，破裂而形成皮孔，流通空氣。木栓層內(nèi)側(cè)有1—2層細(xì)胞扁平，細(xì)胞質(zhì)較濃，細(xì)胞核較明顯，這是木栓形成層，木栓形成層內(nèi)側(cè)是生活的薄壁細(xì)胞為栓內(nèi)層。實(shí)驗(yàn)五 植物的組織：輸導(dǎo)組織、機(jī)械組織、分泌組織實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法：一、輸導(dǎo)組織是植物體內(nèi)運(yùn)輸水分、無機(jī)鹽和各種營養(yǎng)物質(zhì)的組織。根據(jù)導(dǎo)管發(fā)育和側(cè)壁增厚花紋不同分為環(huán)紋、螺紋、梯紋、網(wǎng)紋和孔紋導(dǎo)管。實(shí)驗(yàn)觀察：用松莖三切面石蠟切片和松莖木質(zhì)部浸介材料的觀察，來了解管胞三切面的細(xì)胞特征。3．篩管及伴胞：是被子植物韌皮部內(nèi)輸導(dǎo)同化產(chǎn)物的輸導(dǎo)組織。每個(gè)篩管分子旁有1—多個(gè)伴胞。4．篩胞：是裸子植物和蕨類植物韌皮部內(nèi)輸導(dǎo)養(yǎng)料的