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周德慶微生物學(xué)筆記2-wenkub

2023-04-22 03:21:12 本頁(yè)面
 

【正文】 態(tài)不是一成不變的,受環(huán)境條件影響(如溫度、培養(yǎng)基濃度及組成、菌齡等)      異常形態(tài)     一般,幼齡,生長(zhǎng)條件適宜,形狀正常、整齊。是細(xì)菌中種類(lèi)最多的?!   ?細(xì)菌是單細(xì)胞的,大小在1um左右,1000倍以上顯微鏡才能看到其形狀。 近年來(lái),采用紅外、核磁、電鏡等新技術(shù)越來(lái)越廣泛?!   ?每一菌株為一操作單位,確定很多特征(5060 個(gè))     比較菌株間的最大相似性     陽(yáng)性和陰性符合的總和     100%     總的測(cè)定數(shù) 無(wú)效測(cè)定數(shù)     85%為同種,65%為同屬     據(jù)數(shù)值繪出矩陣圖并轉(zhuǎn)換成樹(shù)狀譜?!   ?生活史     血清學(xué)反應(yīng)     近年又發(fā)展了紅外光譜,GC含量,DNA雜交等?!   ?未確定種名或不指特定的種時(shí)?!   ?(二)命名     命名按照《國(guó)際細(xì)菌命名法規(guī)》,采用林奈氏雙名法。   抗生素工業(yè)   酶制劑工業(yè)   氨基酸工業(yè)   酵母工業(yè)   多糖工業(yè):黃原膠、右旋糖苷、等等  石油發(fā)酵   1生物活性物質(zhì):核酸類(lèi)、維生素等   1其它:微生物農(nóng)藥、沼氣發(fā)酵、生物制品(菌苗、疫苗)     4節(jié):微生物分類(lèi) Microbial taxonomy     分類(lèi)主要是探索生物之間的親緣關(guān)系,把它們歸納為互相聯(lián)系的不同類(lèi)群。 1953,Watson amp。 Ivanovsky 發(fā)現(xiàn)煙草花葉病毒?!   ?其他人     Serge Winogradsky,18561953,發(fā)現(xiàn)微生物的自養(yǎng)生活?!   ?柯赫準(zhǔn)則     某一種微生物,當(dāng)被懷疑是病原體時(shí),它一定伴隨著病害而存在?!   ?觀察丁酸發(fā)酵時(shí),發(fā)現(xiàn)厭氧生命,提出好氧、厭氧術(shù)語(yǔ)?!   ?Pasteur 1877研究了雞霍亂、炭疽病和恐水病,發(fā)現(xiàn)鈍化病原體可以誘發(fā)免疫性和預(yù)防疾病。 加熱過(guò)的空氣通入汁液(煮沸過(guò))并不導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)。     已進(jìn)行的實(shí)驗(yàn):1665年,F(xiàn)racesco Redi 腐肉生蛆實(shí)驗(yàn),否定了動(dòng)物自生說(shuō)?!   ?微生物學(xué)的奠基生理學(xué)時(shí)期     Louis Pasteur,18221895     他的一生給人類(lèi)生活帶來(lái)了史無(wú)前例的影響。 歌德     中國(guó)古代     酒文化,儀狄作酒,禹飲而甘之。遺傳物質(zhì)易變異?!   ?生長(zhǎng)旺、繁殖快     極高生長(zhǎng)繁殖速度,如E. coli 2030分鐘分裂一次,若不停分裂,1043 . 菌數(shù)增加,營(yíng)養(yǎng)消耗,代謝積累,限制生長(zhǎng)速度。     這一特點(diǎn)也是微生物與一切大型生物相區(qū)別的關(guān)鍵所在。四、微生物特點(diǎn)     生命基本特征:     生命通過(guò)它的耐久性、適應(yīng)性、它的生長(zhǎng)及修復(fù)的能力和它的繁殖而延續(xù)下去,這是生命的基本的和普遍的特征。隨后他又對(duì)包括某些真核生物在內(nèi)的大量菌株進(jìn)行了16Sr RNA(18SrRNA)序列的分析比較,又發(fā)現(xiàn)極端嗜鹽菌和極端嗜酸嗜熱菌也和產(chǎn)甲烷細(xì)菌一樣, 具有既不同其他細(xì)菌也不同于其核生物的序列特征,而它們之間則具有許多共同的序列特征。植物界 Plantae:具有細(xì)胞壁,不運(yùn)動(dòng),可行光合作用。周德慶微生物學(xué)筆記第一節(jié):微生物學(xué)的研究對(duì)象與任務(wù) 一、微生物的含義(什么是微生物)非分類(lèi)學(xué)上名詞,來(lái)自法語(yǔ)Microbe一詞。三界:原生生物界 Protista:(E. H. Haeckel, 1866年提出) 五界系統(tǒng) R. H. Whitakker, Science, 163: 150160, 1969原核生物界 Monera:細(xì)菌、放線菌等原生生物界 Protista:藻類(lèi)、原生動(dòng)物、粘菌等真菌界 Fungi:酵母、霉菌動(dòng)物界 Animalia:植物界 Plantae:五界系統(tǒng)是以細(xì)胞結(jié)構(gòu)分化的等級(jí)以及和光合、吸收、攝食這三種主要營(yíng)養(yǎng)方式有關(guān)的組織類(lèi)型為基礎(chǔ)的。于是提出將生物分成為三界(Kingdom)(后來(lái)改稱(chēng)三個(gè)域):古細(xì)菌、真細(xì)菌( Eubacteria)和真核生物(Eukaryotes)?!   ?新陳代謝,包括外部的和內(nèi)部的,是一切生命的另一基本特征?!   ?特點(diǎn)1舉例     乳酸桿菌:120,000     雞蛋:     人(200磅):      吸收多、轉(zhuǎn)化快     這一特性為高速生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)生大量代謝物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ)。 這一特性可在短時(shí)間內(nèi)把大量基質(zhì)轉(zhuǎn)化為有用產(chǎn)品,縮短科研周期?!   ?分布廣、種類(lèi)多     分布區(qū)域廣,分布環(huán)境廣。《書(shū)經(jīng)》若作酒醴,爾惟曲蘗(nie)《齊民要術(shù)》提倡輪作制?!   ?(1)證實(shí)了微生物活動(dòng)和否定了微生物自然發(fā)生學(xué)說(shuō)?!   ?Spallanzani實(shí)驗(yàn),充分加熱的有機(jī)汁液中長(zhǎng)出微生物原因是由于空氣將微生物帶進(jìn)了汁液,因而采取完全密封隔絕的封閉法。 在一封閉容器內(nèi),對(duì)完全滅菌的汁液加上一些收集到的微生物,無(wú)例外地引起微生物生長(zhǎng)?!   ?發(fā)酵研究     相信一切發(fā)酵作用都和微生物的存在及繁殖有關(guān)?!   ?Robert Koch 18431910     建立微生物學(xué)研究基本技術(shù)     (1)分離和純化細(xì)菌:劃線法,混合倒平板法。 必須能自原寄主分離出這種微生物,并培養(yǎng)成為純培養(yǎng)。 Beijerinck M. W.,18511931,發(fā)現(xiàn)了非共生固氮菌。 P. Ehrlich 現(xiàn)代化療的開(kāi)始     現(xiàn)代微生物學(xué)發(fā)展分子生物學(xué)階段     現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)的形成:1941,F(xiàn)lorey amp。 Crick 提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)以及半保留復(fù)制假說(shuō)?!   ?具體任務(wù)就是分類(lèi)、鑒定和命名?!   ?屬名 + 種名 +命名人     如大腸桿菌: Escherichia coli (Migula) Castellani amp?!   ?舉例     真菌界 Fungi 真菌門(mén) Eumycophyta 子囊菌綱 Asycetes     原子囊亞綱 Protoasycetes 內(nèi)孢霉目 Endomycetales  內(nèi)孢霉科 Endomycetaceae     酵母亞科 Sacchromycetoideae 酵母屬 Sacchromyces 釀酒酵母 S. cerevisiae Hansen     二、分類(lèi)依據(jù)     形態(tài)特征(個(gè)體和群體)      細(xì)胞形態(tài):形狀、大小、排列、染色反應(yīng)等?!   ?三、分類(lèi)方法     (一)經(jīng)典分類(lèi)法     隨機(jī)地和不系統(tǒng)地根據(jù)一些特征進(jìn)行分類(lèi)?!   ?(三)分子與遺傳方法     DNA堿基組成:GC%     相同不能說(shuō)明是同種,但不同則肯定不是同種。     四、分類(lèi)系統(tǒng)     原核生物:     《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》第8版,1973《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》第9版,1984     真菌:Ainsworth (1973)系統(tǒng) 酵母:Lodder分類(lèi)系統(tǒng)     菌種鑒定工作三部曲     獲得該微生物的純培養(yǎng) 測(cè)定一系列必要的鑒定指標(biāo) 查找權(quán)威性鑒定手冊(cè)     一章:微生物類(lèi)群與形態(tài)結(jié)構(gòu)     非細(xì)胞型:病毒     細(xì)胞型:原核微生物:細(xì)菌、放線菌等,     無(wú)明顯核,也無(wú)核膜、核仁?!   ?一、細(xì)菌的形態(tài)和大小     (一)基本形態(tài)     球菌 Coccus:球形或近球形,根據(jù)空間排列方式不同又分為單、雙、鏈、四聯(lián)、八疊、葡萄球菌?!   ?螺旋菌 Spirillum:是細(xì)胞呈彎曲桿狀細(xì)菌統(tǒng)稱(chēng),一般分散存在。老齡,不正常,異常形態(tài)?!   ?細(xì)胞重量10131012g ,每g細(xì)菌二、細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)     研究細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)是分子生物學(xué)重要內(nèi)容之一,有了電子顯微鏡才有可能?!   ?(一)基本結(jié)構(gòu)     細(xì)胞壁 cell wall:位于細(xì)胞表面,較堅(jiān)硬,略具彈性結(jié)構(gòu)。 凡是經(jīng)乙醇脫色,呈復(fù)染劑顏色,稱(chēng)為革蘭氏陰性菌 G.     結(jié)果不同主要是細(xì)胞壁組成及結(jié)構(gòu)差異造成的。1,4糖苷鍵相連而成。根據(jù)多元醇不同,有甘油型、核糖醇型等5種類(lèi)型。     與G+區(qū)別:交聯(lián)低;DAP取代 LLys;肽橋?!   ?脂多糖 lipopolysaccharide LPS     G特有成分。     (3)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌   原生質(zhì)體protoplast:人工條件下用溶菌酶除去細(xì)胞壁或用青霉素抑制細(xì)胞壁合成后,所留下的部分。 特點(diǎn):對(duì)滲透壓敏感;長(zhǎng)鞭毛也不運(yùn)動(dòng);對(duì)噬菌體不敏感;細(xì)胞不能分裂等。厚78nm?!   ?間體 mesosome(中質(zhì)體)     細(xì)胞膜內(nèi)陷形成。 特點(diǎn):無(wú)核膜、核仁、固定形態(tài),結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,細(xì)胞分裂前核分裂?!   ?原核:游離態(tài)、多聚核糖體,70S     真核:游離態(tài)、結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,70、80S     多聚核糖體:一條mRNA與一定數(shù)目的單個(gè)RS結(jié)合而成。     不同細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),含不同內(nèi)含物,是細(xì)胞的貯藏物質(zhì)或代謝產(chǎn)物。 成分:90%以上為水,余為多糖(肽)。電鏡或特殊染色法觀察,懸滴法觀察運(yùn)動(dòng)?!   ?趨性運(yùn)動(dòng):栓菌實(shí)驗(yàn)     菌毛fimbria (pilus ):許多G尤其是腸道菌,表面有比鞭毛更細(xì),數(shù)目多, ,長(zhǎng)23um?!?芽孢結(jié)構(gòu)、形成、萌發(fā)(自學(xué))     伴孢晶體     孢囊 cyst,等等。     純培養(yǎng):克隆clone     菌苔lawn     四、常見(jiàn)常用細(xì)菌     細(xì)胞結(jié)構(gòu)、菌落特點(diǎn)、代謝產(chǎn)物等。突出特性是產(chǎn)各種抗生素。     孢子形成方式:橫隔分裂     孢囊孢子     放線菌生活史(發(fā)育周期)     三、代表屬及常見(jiàn)菌     (一)鏈霉菌屬 Streptomyces     90%抗生素,菌絲發(fā)育良好?!   ?(五)鏈孢囊菌屬Streptosporangium     形成孢子囊,孢囊孢子。細(xì)胞球狀或桿狀,不運(yùn)動(dòng)。G,可濾過(guò)??蔀V過(guò),專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生。由于抵抗力和固氮能力,可在貧瘠沙灘荒巖上生長(zhǎng),稱(chēng)為      先鋒生物 。第一種 家養(yǎng)微生物 ,與人類(lèi)關(guān)系密切。 大小在15um X 530um之間。由于有細(xì)胞器分化,功能不及細(xì)菌多,主要是調(diào)節(jié)滲透壓、吸收營(yíng)養(yǎng)、分泌代謝物等     細(xì)胞質(zhì)及內(nèi)含物     細(xì)胞核:真核:雙層單位膜,大量核孔,可見(jiàn)染色體,一個(gè)或幾個(gè)核仁,核膜外有中心體?!   ?環(huán)狀 2um質(zhì)粒 :外源DNA載體?!   ?有性繁殖     產(chǎn)生子囊和子囊孢子。僅有一個(gè)雙倍體生活,單倍體短?!   ?一、形態(tài)和構(gòu)造     營(yíng)養(yǎng)體由菌絲(hyphae)構(gòu)成,直徑310um,菌絲再形成菌絲體(mycelium)     菌絲:無(wú)隔,多核單細(xì)胞,低等真菌     有隔,多細(xì)胞,高等真菌     菌絲體:營(yíng)養(yǎng)菌絲,伸入培養(yǎng)基吸收營(yíng)養(yǎng)     氣生菌絲,向空中生成,形成繁殖器官。子實(shí)體、子囊果     擔(dān)孢子:擔(dān)子菌特征      (二)生活史     霉菌指從一種孢子開(kāi)始,經(jīng)過(guò)一定的生長(zhǎng)和發(fā)育,最后又形成同一種孢子為止。通常栽培的僅10多種。     栽培:發(fā)展栽培同時(shí),重視采用菌絲體的深層培養(yǎng),特別是風(fēng)味特殊而鮮美的種類(lèi)。     應(yīng)用:食用子實(shí)體、菌絲體深層培養(yǎng)。目前認(rèn)為抗癌物質(zhì)主要是多糖,如香菇多糖、銀耳酸性異多糖、蕓芝多糖(PSK)、茯苓多糖、豬苓多糖、靈芝多糖等。病毒的核酸與細(xì)胞型也不同。頭部為廿面體對(duì)稱(chēng),尾部為螺旋對(duì)稱(chēng)。雙鏈DNA噬菌體三階段轉(zhuǎn)錄:     遺傳信息轉(zhuǎn)移:     成熟(裝配):潛伏期     裂解(釋放):裂解期     上述烈性噬菌體的生長(zhǎng)方式,稱(chēng)為一步生長(zhǎng)?!   ?溫和性噬菌體:噬菌體侵染宿主后,并不增殖,裂解,而與宿主DNA結(jié)合,隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制,此時(shí)細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見(jiàn)的噬菌體,這種噬菌體稱(chēng)為溫和性噬菌體?!   ?雙層平板法     單層平板法     玻片快速法     效價(jià)(titre),噬菌斑形成單位(pfu)     (二)防治措施     消滅phage,杜絕其依賴(lài)生存條件?!   ?五、亞病毒     類(lèi)病毒viroid:沒(méi)有衣殼包裹的RNA分子?!   ?HIV專(zhuān)門(mén)侵犯淋巴細(xì)胞,造成免疫缺陷。     1節(jié):營(yíng)養(yǎng)物及其功能     一、細(xì)胞化學(xué)組成     整個(gè)生物界大體相同,主要是C、H、O、N(占干重9097%),C(約50%),此外為各種無(wú)機(jī)元素,由這些元素再組成化合物?!   ?(一)碳源物質(zhì)     定義:凡能提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)源?!   ?種類(lèi):維生素、AA、base、FA等?!   ?無(wú)機(jī)元素來(lái)源與功能:     一些無(wú)機(jī)元素加入鹽:     (六)水     存在狀態(tài):游離態(tài)(溶媒)和結(jié)合態(tài)(結(jié)構(gòu)組成)     生理作用:組成成分;反應(yīng)介質(zhì);物質(zhì)運(yùn)輸媒體;熱的良導(dǎo)體。     營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型劃分不是絕對(duì)的,不同生活條件下,可相互轉(zhuǎn)變?!   ?脂溶性物質(zhì):易透過(guò)     離子化合物:弱快強(qiáng)慢(極性)     一、營(yíng)養(yǎng)物吸收     單純擴(kuò)散 simple diffusion     依靠胞內(nèi)外溶液濃度差,順濃度梯度運(yùn)輸,不消耗代謝能,無(wú)特異性。硫酸根、磷酸根、糖(真核)     主動(dòng)運(yùn)輸 active transport     吸收營(yíng)養(yǎng)物的主要機(jī)制?!   ?基團(tuán)轉(zhuǎn)位 group translocation     屬主動(dòng)運(yùn)輸,但溶質(zhì)分子發(fā)生化學(xué)修飾定向磷酸化。      二、代謝物分泌 
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