【正文】 與蛋白質(zhì)相互作用 ②反式作用因子作用方式：成環(huán)；扭曲；滑動(dòng)；Oozing③反式作用因子的組合式調(diào)控：基因表達(dá)的調(diào)控不是由單一的反式作用因子完成而是幾種因子組合，發(fā)揮特定的作用。(1)順式作用元件(cis—acting element)指某些能影響基因表達(dá)但不編碼新的蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，按照功能分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、負(fù)調(diào)控元件(沉默子等)。(1)DNA識(shí)別結(jié)合域：鋅指結(jié)構(gòu)、堿性亮氨酸拉鏈、同源結(jié)構(gòu)域、螺旋環(huán)螺旋結(jié)構(gòu)、堿性α螺旋。16. 簡述反式作用因子的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。(5)不存在超基因式操縱子結(jié)構(gòu)：真核生物基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子，一條mRNA只翻譯一種蛋白質(zhì)。13. 簡述真核基因表達(dá)的特點(diǎn) 答：(1)細(xì)胞的全能性：所謂全能性是指同一種生物的所有細(xì)胞都含有相同的基因組DNA。 答：編碼β半乳糖苷酶、半乳糖苷通透酶和硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙酰基酶的基因Z、Y、A稱為結(jié)構(gòu)基因，結(jié)構(gòu)基因加上調(diào)控元件：啟動(dòng)子P和操縱基因O及CAP結(jié)合位點(diǎn)，lac阻遏蛋白基因I，即構(gòu) 成乳糖操縱子。 答：(1)6因子含有識(shí)別啟動(dòng)區(qū)的結(jié)構(gòu)域調(diào)控RNA聚合酶與．DNA結(jié)合，確保RNA聚合酶與特異啟動(dòng)區(qū)而不是其他位點(diǎn)的穩(wěn)定結(jié)合(2)6因子使得RNA聚合酶選擇一套特定啟動(dòng)區(qū)起始轉(zhuǎn)錄。(3)轉(zhuǎn)錄和翻譯是偶聯(lián)進(jìn)行的。順式作用元件主要包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、負(fù)調(diào)控元件等。4. 真核生物基因組有哪些特點(diǎn)? 答：每一種真核生物都有一定的染色體數(shù)目；遠(yuǎn)大于原核基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大；真核生物基因轉(zhuǎn)錄為單順反子；有大量重復(fù)序列；真核基因?yàn)閿嗔鸦?；非編碼序列多于編碼序列；功能相關(guān)基因構(gòu)成各種基因家族。1. 什么是轉(zhuǎn)座? 轉(zhuǎn)座因子在一個(gè)DNA分子內(nèi)部或者兩個(gè)DNA之間不同位置間的移動(dòng)。5. 基因重疊有什么意義?答：利用有限的核酸儲(chǔ)存更多的遺傳信息，提高自身在進(jìn)化過程中的適應(yīng)能力。8. 簡述原核基因表達(dá)的特點(diǎn)。(4)mRNA：翻譯起始部位有特殊的堿基序列SD序列。一旦一種6因子被另一種代替，即引起原來一套基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)閉和新的一套基因轉(zhuǎn)錄的開屆。12. 原核生物可以通過哪幾個(gè)層次的表達(dá)調(diào)控以適應(yīng)環(huán)境的改變？ 答：(1)轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控：①6因子調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始；②轉(zhuǎn)錄起始的負(fù)調(diào)控；③轉(zhuǎn)錄起始的正調(diào)控；④轉(zhuǎn)錄起始的復(fù)合調(diào)控。(2)基因表達(dá)的時(shí)間性和空間性：高等生物的各種不同細(xì)胞具有相同的基因組，但在個(gè)體發(fā)育的不同階段，基因表達(dá)的種類和數(shù)量是不同的，在不同組 織和器官中，基因表達(dá)的種類和數(shù)量不同。(6)部分基因多拷貝。答：一個(gè)完整的反式作用因子通常含有三個(gè)主要功能結(jié)構(gòu)域，分別為DNA識(shí)別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄活化域和結(jié)合其他蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域。(2)轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域：酸性α螺旋、富含谷氨酰胺的結(jié)構(gòu)域、富含脯氨酸結(jié)構(gòu)域。(2)反式作用因子(trans—acting factor)指能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各順式作用元件812bp核心序列上，參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組蛋白質(zhì)，也稱序列特異性DNA結(jié)合蛋白(sequence specific DNA binding protein，SDBP)，這是一類細(xì)胞核內(nèi)蛋白質(zhì)因子。18. 簡述基因表達(dá)調(diào)控的意義及基本調(diào)節(jié)層次。(2)基因表達(dá)的調(diào)控是一個(gè)十分復(fù)雜的過程。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因與核糖體蛋白基因等。答：(1)翻譯起始的調(diào)控：①翻譯起始因子的功能調(diào)控：eIF2是蛋白質(zhì)合成過程中重要的起始因子。由于存在一些特定的翻譯抑制蛋白可以與一些mRNA的5’端結(jié)合，從而抑制了蛋白質(zhì)翻譯。AUG。因此，若從5’AUG開始翻譯，就會(huì)翻譯出無活性的短肽。當(dāng)5’端非編碼區(qū)的長度在17—80核苷酸之間時(shí)，體外翻譯效率與其長度成正比。(3)小分子RNA對(duì)翻譯的調(diào)控作用：如lin4 RNA由lin4基因編碼，可阻抑lin14蛋白質(zhì)(一種核蛋白)，從而調(diào)控生長發(fā)育的時(shí)間選擇。22. 簡述真核和原核基因表達(dá)調(diào)控共同的要素。24. 請(qǐng)解釋正性調(diào)節(jié)在真核基因表達(dá)調(diào)控中的普遍意義。換言之：真核基因表達(dá)以正性調(diào)控為主導(dǎo)。DNA復(fù)制產(chǎn)生的誤差；(2)物理因素引起的DNA損傷：①紫外線照射引起的DNA損傷；②電離輻射引起的DNA損傷。28. 簡述物理因素引起的DNA損傷。29. 簡述電離輻射可導(dǎo)致的DNA分子變化。射線的直接和間接作用都可能使脫氧核糖破壞或磷酸二酯鍵斷開而致DSIA鏈斷裂。目前，已在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了四個(gè)較為完善的DNA修復(fù)通路，分別是核苷酸切除修復(fù)(nucleotide．excision repair，NER)、堿基切除修復(fù)(base—excision repair，BER)、 重組修復(fù)(rebination repair)和錯(cuò)配修復(fù)(mismatch repair)31. 答：，錯(cuò)配修復(fù)蛋白MutS二聚體沿著DNA運(yùn)動(dòng)，能夠發(fā)現(xiàn)DNA骨架因非互補(bǔ)堿基對(duì)之間的不對(duì)稱而產(chǎn)生的變形，從而識(shí)別錯(cuò)配核苷酸。特異識(shí)別的異常堿基包括：胞嘧啶脫氨基產(chǎn)生的尿嘧啶、氧化的鳥嘌呤、脫氨基的腺嘌呤、開環(huán)堿基以及碳原子之間雙鍵變成單鍵的堿基等。兩個(gè)UvrA分子和一個(gè)UvrB分子組成復(fù)合物結(jié)合于DNA，并消耗ATP沿著DNA鏈移動(dòng)，UvrA能夠發(fā)現(xiàn)損傷造成的DNA雙螺旋變形，由UvrB負(fù)責(zé)解鏈，在損傷部位形成單鏈區(qū)，并使之彎曲約130度，接著UvrB募集內(nèi)切核酸酶UvrC，在損傷部位的兩側(cè)切斷DNA鏈，其中一個(gè)切點(diǎn)位于損傷部位5’側(cè)八個(gè)核苷酸處，而另一個(gè)切點(diǎn)位于3’側(cè)四或五個(gè)核苷酸處。這一片段被釋放后，產(chǎn)生的缺口由DNA聚合酶和連接酶填補(bǔ)。答：人全基因組與轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)核苷酸切除修復(fù)的基本過程相同，即都有發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤，解鏈并募集內(nèi)切核酸酶，切割損傷部位，解旋去除損傷位點(diǎn)，DNA聚合酶和連接酶填補(bǔ)缺口。recB、recC、recD酶復(fù)合物兼有解旋酶和核酸酶活性，它利用ATP水解提供能量沿著DNA移動(dòng)。E．coli的recA蛋白在DNA重組中起關(guān)鍵作用。E．coli的RuvA蛋白識(shí)別Holliday結(jié)構(gòu)連接處，而RuvB蛋白具有解旋酶和ATPase活性，能驅(qū)動(dòng)分支移動(dòng)。DNA雙鏈斷裂后，細(xì)胞中存在姐妹染色體時(shí)，則通過同源重組的方式進(jìn)行修復(fù)，如細(xì)胞中不存在姐妹染色體時(shí)，則通過非同源末端連接的方式進(jìn)行修復(fù)。轉(zhuǎn)錄阻遏蛋白Lex．A抑制若干編碼參與SOS應(yīng)答蛋白質(zhì)的基因表達(dá)，具有潛在的蛋白水解酶活性，E coli的DNA損傷產(chǎn)生的單鏈DNA誘導(dǎo)recA蛋白水平提高近50倍，而recA．蛋白能激活LexA自我蛋白酶解，導(dǎo)致至少15個(gè)參與SOS應(yīng)答的損傷修復(fù)蛋白基因解除阻遏狀態(tài)而表達(dá)。這種修復(fù)帶給細(xì)胞很高的突變率。40. 何謂PCR?試述PCR技術(shù)的基本原理和影響茵素。41. PCR的基本原理是什么?用PCR擴(kuò)增某一基因，必須預(yù)先得到什么樣的信息? 答：PCR是根據(jù)DNA半保留