分子生物學(xué)實驗項目三-wenkub
2023-04-22 03:16:52 本頁面
【正文】 新鮮葉片，在液氮中充分研磨成粉末狀（越細越好）。EDTA抑制DNA酶的活性。實驗三 植物基因組DNA的提取實驗?zāi)康?通過本實驗學(xué)習(xí)從植物組織中提取DNA的方法。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白，得到的DNA溶液經(jīng)乙醇沉淀。2 將研磨好的粉末轉(zhuǎn)移至50mL的離心管中，加入16mL細胞提取液，充分混勻，65℃水浴保溫20min。6 加等體積的酚/氯仿混勻，12000 r/min離心5min，取上清。10加入500μLTE緩沖液，溶解DNA。3) 加入700μL氯仿，充分混勻，12000rpm(13,400хg)離心5分鐘。6) 向吸附柱CB3中加入500μL去蛋白液GD（用前已加入無水乙醇），12000rpm(13,400хg)離心30秒，棄掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在20℃，以防DNA降解）。1OD260=50μg/mL雙鏈DNA或40μg/mL單鏈DNA。若RNA未除凈，會在電泳前緣出現(xiàn)斑點。5）DNA中含有多糖或鹽類 將DNA用100%的乙醇或異丙醇沉淀出來，離心，沉淀用70%的乙醇清洗兩次獲更多次，吹干后重溶于TE中（注意乙醇一定要吹干，否則電泳點樣時，樣品上漂）。擬南芥簡介擬南芥（Arabidopsis thaliana）十字花科。長角果線形，長1～。擬南芥的基因組是目前已知植物基因組中最小的。由于有上述這些優(yōu)點，所以擬南芥是進行遺傳學(xué)研究
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