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正文內(nèi)容

細(xì)胞生物學(xué)研究對(duì)象與任務(wù)-wenkub

2023-04-19 23:50:04 本頁面
 

【正文】 水面,在水相中,可形成團(tuán)?;蚱瑺铍p層。 第三章 細(xì)胞膜與細(xì)胞表面第一節(jié) 細(xì)胞膜的化學(xué)組成和分子結(jié)構(gòu)細(xì)胞膜的概念(cell membrane,cytomembrane): 生物膜(biomembrane),單位膜(unit membrane),細(xì)胞內(nèi)膜,細(xì)胞膜一、細(xì)胞膜的化學(xué)組成: (一)膜脂:   在真核細(xì)胞膜中主要有磷脂、膽固醇、糖脂等,其中以磷脂為最多。DNA與RNA區(qū)別復(fù)習(xí)思考題 名詞:細(xì)胞、原核細(xì)胞、真核細(xì)胞、生物大分子 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的不同點(diǎn)?! ×硗膺€有ATP,三磷酸腺苷,是細(xì)胞內(nèi)化學(xué)能的載;cAMP,環(huán)磷酸腺苷,細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)分子。細(xì)菌真核細(xì)胞?真核細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)體系?細(xì)胞的大小及其分析?原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的比較 第二節(jié) 生命現(xiàn)象的載體——蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)(protein) H2N-CH-COOH組成單位:氨基酸(Amino Acid) 分子結(jié)構(gòu)(1) 一級(jí)結(jié)構(gòu)(primary structrure):蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定了蛋白質(zhì)的多樣性。存在于一切細(xì)胞內(nèi)。?細(xì)胞具有獨(dú)立的、有序的自控代謝體系,是代謝與功能的基本單位?細(xì)胞是有機(jī)體生長(zhǎng)與發(fā)育的基礎(chǔ)?細(xì)胞是遺傳的基本結(jié)構(gòu)單位,細(xì)胞具有遺傳的全能性?沒有細(xì)胞就沒有完整的生命生物大分子:蛋白質(zhì)和核酸等分子,分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜,分子量巨大,分子中載有生命活動(dòng)的信息,是一切生命機(jī)體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能的最重要的物質(zhì)基礎(chǔ),在生命機(jī)體中擔(dān)負(fù)著各種各樣的生理功能,故稱為生物大分子細(xì)胞的基本共性:所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)構(gòu)成的生物膜,即細(xì)胞膜。二、細(xì)胞和亞細(xì)胞組分測(cè)定的技術(shù)與方法(一)細(xì)胞化學(xué)免疫熒光技術(shù):快速、靈敏、有特異性,但其分辨率有限⑴蛋白電泳(SDSPAGE)與免疫印跡反應(yīng)(WesternBlot)⑵免疫電鏡技術(shù): 應(yīng)用:通過對(duì)分泌蛋白的定位,可以確定某種蛋白的分泌動(dòng)態(tài);胞內(nèi)酶的研究;膜蛋白的定位與骨架蛋白的定位等(二)細(xì)胞顯微分光光度測(cè)定技術(shù)(Microspectrophotometry)利用細(xì)胞內(nèi)某些物質(zhì)對(duì)特異光譜的吸收,測(cè)定這些物質(zhì)(如核酸與蛋白質(zhì)等)在細(xì)胞內(nèi)的含量??焖倮鋬錾疃任g刻技術(shù)(quick freeze deep etching)⑶超薄切片技術(shù)超薄切片技術(shù) 用于電鏡觀察的樣本制備示意圖 ⑷電鏡三維重構(gòu)技術(shù)電子顯微術(shù)、電子衍射與計(jì)算機(jī)圖象處理相結(jié)合而形成的具有重要應(yīng)用前景的一門新技術(shù)。細(xì)胞工程第二節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史一、細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)和細(xì)胞學(xué)說的建立 二、經(jīng)典細(xì)胞學(xué)發(fā)展階段三、實(shí)驗(yàn)細(xì)胞學(xué)發(fā)展階段四、分子生物學(xué)發(fā)展階段第三節(jié) 醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)在醫(yī)學(xué)教育中的地位一、醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)是醫(yī)學(xué)科學(xué)的重要理論基礎(chǔ)之一 二、細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的發(fā)展相互影響,相互促進(jìn)。細(xì)胞增殖及其調(diào)空 191。細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞重要生命活動(dòng): 191。第一章 緒論第一節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)研究對(duì)象與任務(wù)細(xì)胞生物學(xué)(Cell Biology)及其研究的主要內(nèi)容:生命體是多層次、非線性、多側(cè)面的復(fù)雜結(jié)構(gòu)體系,而細(xì)胞是生命體的結(jié)構(gòu)與生命活動(dòng)的基本單位,有了細(xì)胞才有完整的生命活動(dòng)。細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究 191。細(xì)胞分化及其調(diào)控 191。第四節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)常用的研究技術(shù)和方法一、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的技術(shù)和方法(一)細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)研究的技術(shù)與方法⑴光鏡樣本制作⑵分辨率是指區(qū)分開兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)間的最小距離(Fluorescence Microscopy)◆原理◆應(yīng)用:⑴直接熒光標(biāo)記技術(shù)⑵間接免疫熒光標(biāo)記技術(shù)⑶在光鏡水平用于特異蛋白質(zhì)等生物大分子的定性定位:如綠色熒光蛋白(GFP)的應(yīng)用(Laser Confocal Microscopy)◆原理◆應(yīng)用:排除焦平面以外光的干擾,增強(qiáng)圖像反差和提高分辨率(—),可重構(gòu)樣品的三維結(jié)構(gòu)。電鏡三維重構(gòu)技術(shù)與X射線晶體衍射技術(shù)及核磁共振分析技術(shù)相結(jié)合,是當(dāng)前結(jié)構(gòu)生物學(xué)(Structural Biology)——主 要研究生物大分子空間結(jié)構(gòu)及其相互關(guān)系——的主要實(shí)驗(yàn)手段。包括:紫外光顯微分光光度測(cè)定法;可見光顯微分光光度測(cè)定法(三)流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)(Flow Cytometry)主要應(yīng)用:用于定量測(cè)定細(xì)胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量;測(cè)定細(xì)胞群體中不同時(shí)相細(xì)胞的數(shù)量;從細(xì)胞群體中分離某些特異染色的細(xì)胞;分離DNA含量不同的中期染色體。所有的細(xì)胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA。所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂原核細(xì)胞基本特點(diǎn):遺傳的信息量小,一個(gè)環(huán)狀DNA構(gòu)成;細(xì)胞內(nèi)沒有分化為以膜為基礎(chǔ)的具有專門結(jié)構(gòu)與功 能的細(xì)胞器和細(xì)胞核膜。(2)二級(jí)結(jié)構(gòu)(second structure):一級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上借氫鍵使分子折曲(3)三級(jí)結(jié)構(gòu)(tertiary structure):在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步盤旋折疊產(chǎn)生特定的、不規(guī)則的球狀構(gòu)像 (4)四級(jí)結(jié)構(gòu)(quaternary structure):指各個(gè)亞基的空間排布和相互作用?!『怂岬姆N類結(jié)構(gòu) DNA:脫氧核糖核苷酸,兩條走向相反的互補(bǔ)核苷酸鏈組成的雙螺旋,互補(bǔ)的雙鏈之間通過堿基間形成的氫鍵而結(jié)合在一起。? 。 (phospholipid):主要是磷酸甘油脂和鞘磷脂 (cholesterol):是膜中的中性脂,在動(dòng)物的真核細(xì)胞膜中含最高,與磷 脂的碳?xì)滏溝嗷プ饔?增加質(zhì)膜的強(qiáng)度,降低膜的流動(dòng)性 (glycolipid):含有糖的脂類,糖共價(jià)地與脂結(jié)合在一起。(二)膜蛋白   膜蛋白是膜功能主要的承擔(dān)和執(zhí)行者。或通過與內(nèi)在蛋白相互作用,間接與膜結(jié)合。 (fluid mosaic model)    該模型的主要論點(diǎn)是:流動(dòng)的脂雙層構(gòu)成膜的連續(xù)主體,球形的膜蛋白質(zhì)以各種鑲嵌形式與脂雙分子層相結(jié)合。 (lattice mosaic model)  1975年提出,該模型認(rèn)為細(xì)胞膜所以具有流動(dòng)性是由于脂類可逆地進(jìn)行無序(液態(tài))和有序(晶態(tài))的相變過程,鑲嵌蛋白對(duì)脂類分子的運(yùn)動(dòng)有控制作用,可使其周圍的脂質(zhì)分子形成界面脂,而不發(fā)生單獨(dú)活動(dòng),兩者合在一起構(gòu)成膜中晶態(tài)部份(晶格)。(一)膜的不對(duì)稱性::   (二)膜的流動(dòng)性:   (1)脂肪酸鏈的長(zhǎng)短不飽和程度:  (2)膽固醇與鹼脂的比例:  (3)卵鹼脂與鞘鹼脂的比值  (4)膜蛋白的影響  (5)其他:環(huán)境溫度、pH、離子強(qiáng)度、金屬離子等   膜流動(dòng)性具有十分重要的生理意義,可以說一切膜的基本活動(dòng)均在細(xì)胞膜的流動(dòng)狀態(tài)下進(jìn)行。   (3)易化擴(kuò)散(Facilitated Diffusion),又稱幫助擴(kuò)散 (Active Transport)   細(xì)胞具有逆濃度梯度運(yùn)輸物質(zhì)的能力,在這種轉(zhuǎn)運(yùn)過程中,除了需要借助膜上載體蛋白外,還要消耗代謝謝能(分解ATP)、細(xì)胞這種利用代謝能未驅(qū)動(dòng)物質(zhì)逆濃度梯度轉(zhuǎn)運(yùn)的運(yùn)輸,稱為主動(dòng)運(yùn)輸。   (1)吞噬作用:phagocytosis 過程和作用  (2)胞飲作用Pinocytosis過程和作用  (3)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞(ReceptorMediated Endocytosis) 這是專一性很強(qiáng)的內(nèi)吞,大部分動(dòng)物細(xì)胞通過名次免體介導(dǎo)的內(nèi)容作用,使一些特定的大分子進(jìn)入細(xì)胞。二、細(xì)胞連接的類型●閉鎖連接,=緊密連接(tight junction)●錨著連接(anchoring junction)●通訊連接,其中有 縫隙連接(gap junction)緊密連接位置:管腔和腺體上皮細(xì)胞側(cè)壁近頂端 (臨腔面)形態(tài)和結(jié)構(gòu) :相鄰細(xì)胞的跨膜蛋白互相對(duì)接,分布呈網(wǎng)狀,在細(xì)胞側(cè)壁上環(huán)繞一圈作用:封閉細(xì)胞間隙 (相對(duì)性)錨著連接類型:粘合連接(adherens junction)橋粒(desmosome)半橋粒(hemidesmosome)以橋粒為例:位置:管腔和腺體上皮細(xì)胞側(cè)壁縫隙連接作用和特點(diǎn):介導(dǎo)細(xì)胞間電和化學(xué)的偶聯(lián)。復(fù)習(xí)思考題:名詞:?jiǎn)挝荒?、主?dòng)運(yùn)輸、被動(dòng)運(yùn)輸、胞吞作用、胞吐作用、細(xì)胞連接細(xì)胞膜分子結(jié)構(gòu)模型種類、主要論點(diǎn)有何異同點(diǎn)。? 透明質(zhì)酸:組成:由N乙酰氨基葡萄糖和D葡萄糖醛酸組成二糖單位。? (二).蛋白聚糖:? 1).組成:除透明質(zhì)酸外各種(幾百條)氨基聚糖鏈(每鏈300個(gè)糖基以下)與核心蛋白的絲氨酸殘基共價(jià)連接,形成各種形式的蛋白聚糖分子(單體)。? 二、膠原和彈性蛋白? (一).膠原:是動(dòng)物細(xì)胞外的基質(zhì)中,一個(gè)高度特化的纖維蛋白家族,是動(dòng)物體內(nèi)含量最多(30%)的蛋白質(zhì),分布于各種組織、細(xì)胞間。? 2).膠原產(chǎn)生Ⅰ、Ⅲ型膠原由:成纖維細(xì)胞產(chǎn)生;Ⅱ型膠原由:軟骨細(xì)胞產(chǎn)生;Ⅳ型膠原由:上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生。4/.前膠原合成后,分泌進(jìn)入細(xì)胞間隙中,切去前肽,、長(zhǎng)300nm的膠原分子。? 3).在成熟的骨骼、角膜和橫膈肌腱中,形成有序的膠合板樣結(jié)構(gòu)。? :? Cu2+影響膠原分子的交聯(lián)。? (二).彈性蛋白:是彈性纖維的主要成份,不形成螺旋結(jié)構(gòu)。無糖基化。亞單位約2500個(gè)氨基酸,羧基末端二硫鍵形成二聚體,V字型。參與血凝、創(chuàng)傷愈合,增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的功能。? 3).基質(zhì)纖粘連蛋白:高度不溶,分布與基質(zhì)中,主要由間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生。? 功能:介導(dǎo)細(xì)胞粘著于膠原,促進(jìn)細(xì)胞增長(zhǎng)和分化。而線粒體雖然是膜相結(jié)構(gòu),但整個(gè)膜的動(dòng)態(tài)關(guān)系不屬于這連續(xù)統(tǒng)一體中的成員,因此,不包括在內(nèi)膜系統(tǒng)中。蛋白質(zhì)糖基化作用。三、高爾基體的功能:蛋白質(zhì)的糖基化及糖鏈的修飾。 ?。ǘ﹥?nèi)容物的變化  如:脂肪肝時(shí),高爾基體中的含脂蛋白顆粒消失。第三節(jié) 溶酶體(Lysosome) 溶酶體(Lysosome)為細(xì)胞內(nèi)的另一種細(xì)胞器,外被以單位膜,內(nèi)含多種酸性水解酶,能分解各種內(nèi)源性或外源性物質(zhì),被稱為細(xì)胞內(nèi)的消化裝置。此時(shí)小泡中缺乏水解底物,小泡中的酶亦無活性。(二)作用底物來自細(xì)胞外的異噬性溶酶體   異噬性溶酶體的作用底物是經(jīng)由細(xì)胞的吞飲或吞噬而被攝入細(xì)胞內(nèi)的外源性物質(zhì),包括一些大分子物質(zhì)和細(xì)胞,如:細(xì)菌、紅細(xì)胞、鐵蛋白酶和酶原顆粒等,異噬性溶酶體見于單核━巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞、白細(xì)胞、肝細(xì)胞和腎細(xì)胞等。三、溶酶體與某些人類疾病的關(guān)系(一)溶酶體的破裂是形成矽肺的原因   矽肺是一種職業(yè)病,其形成原因主要是溶酶體的破裂。   黑蒙性癡呆:由于細(xì)胞內(nèi)先天性缺乏一種溶酶體酶━━氨基已糖酶A,使腦組織中積累了大量的神經(jīng)節(jié)苷脂M2。 (四) 溶酶體與癌癥   致癌物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞后,先貯存于溶酶體,再與染色體整合,溶酶體損傷后釋放出來的水解酶,可能是致癌物引起染色體異常和細(xì)胞分裂失控的有關(guān)因素。 形態(tài):光鏡下呈粒狀、線裝,但形態(tài)隨各種環(huán)境條件和生理狀態(tài)不同而變,如低滲或PH為酸性時(shí),線粒體膨脹為顆粒裝;人胚肝細(xì)胞的線粒體在早期為短棒狀,晚期為長(zhǎng)棒狀等?! ?一)外膜(outer membrane) 單位膜:,與線粒體內(nèi)膜不連續(xù),脂類和蛋白質(zhì)的組成與內(nèi)膜不同?! ⌒螒B(tài):2種  版層狀嵴:人、高等動(dòng)物細(xì)胞絕大部分為此形狀,與長(zhǎng)軸呈直角、相互平行,當(dāng)代謝增高,也可變化為鋸齒狀,也有與長(zhǎng)軸平行排列,即縱行嵴,如神經(jīng)細(xì)胞。   :對(duì)寡霉素敏感蛋白,對(duì)酶活性的抑制先作用于基片再由其傳遞到頭部。三、線粒體的化學(xué)組成及酶系的分布(一)線粒體的化學(xué)組成   水、蛋白(占線粒體蛋白總量的5070%),主要分布在內(nèi)膜上。膜基底部各種傳遞氫、傳遞電子酶,稱為電子傳遞酶系,能接受底物氧化分解脫下的氫與電子,并把它們傳遞,它們?cè)趦?nèi)膜上有序地排列成鏈狀,故又稱呼吸鏈,其標(biāo)志酶是細(xì)胞色素氧化酶。膜間腔 第二節(jié) 線粒體的功能一、線粒體的功能:氧化磷酸化 線粒體的主要功能是通過氧化磷酸化反應(yīng)合成ATP,為細(xì)胞提供能量。 2. 由丙酮酸形成乙酰輔酶A:在基質(zhì)中進(jìn)行  丙酮酸進(jìn)入線粒體后,在內(nèi)膜上丙酮酸脫氫酶系的作用下,氧化(脫氫)、脫羧后與輔酶A(CoA)結(jié)合轉(zhuǎn)化成乙酰CoA,這是葡萄糖、氨基酸、脂肪代謝的共同中間產(chǎn)物。這便形成了由H+濃度梯度及膜電位組成的質(zhì)子動(dòng)力。2、出芽:先從線粒體上生出小芽,然后與母體分離,逐漸發(fā)育成線粒體。研究表明,雖然線粒體有自己的 DNA,并能進(jìn)行表達(dá),但由線粒體DNA編碼的蛋白質(zhì)僅占線粒體總蛋白的10%,其余90%的蛋白質(zhì)(包括線粒體基因組復(fù)制與表達(dá)所需要的各種酶)是由核基因編碼,在細(xì)胞質(zhì)合成后輸入至線粒體的。所以,往往把線粒體作為對(duì)疾病診斷和測(cè)定環(huán)境因素的敏感指標(biāo)。為什么說線粒體是動(dòng)力工廠?為什么說線粒體是個(gè)半自主性細(xì)胞器?第七章 核 糖 體第一節(jié) 核糖體的類型核糖體是合成蛋白質(zhì)的細(xì)胞器,其唯一的功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精確地合成多肽鏈。第二節(jié) 核糖體的結(jié)構(gòu)與功能一、核糖體的結(jié)構(gòu):RNA的結(jié)構(gòu):5′端結(jié)構(gòu)域;中心結(jié)構(gòu)域;3′端結(jié)構(gòu)域;最后一個(gè)結(jié)構(gòu)域;蛋白質(zhì)在核糖體結(jié)構(gòu)中的地位核糖體的重要活性部位:mRNA結(jié)合位;氨酰tRNA結(jié)合位和肽基tRNA結(jié)合位;轉(zhuǎn)肽酶部位;中央管與出口位。多聚核糖體的生物學(xué)意義178。復(fù)習(xí)思考題: 核糖體的化學(xué)組成。包括:微管、微絲和中間纖維三種類型。第一節(jié) 微絲一、微絲的化學(xué)組成基本單位:肌動(dòng)蛋白,有六種不同的亞型,分為α、β和γ三類。三、微絲的功能1、構(gòu)成細(xì)胞的支架,維持細(xì)胞的形態(tài):微絨毛2、作為肌纖維的組成成分,參與肌肉收縮。2、二聯(lián)管:由A、B兩根單管組成,主要分布于纖毛個(gè)鞭毛內(nèi)。二、中間纖維的形態(tài)結(jié)構(gòu)是一種直徑為10nm的纖維狀蛋白,介于微
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