細(xì)胞生物學(xué)實驗-wenkub
2023-04-19 23:49:44 本頁面
【正文】 一．教學(xué)目標(biāo)：1深刻理解被動運(yùn)輸、主動運(yùn)輸和內(nèi)吞外排的概念，以及物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)闹匾饬x；2． 理解細(xì)胞信號傳遞的主要特點(diǎn)，掌握甾類激素信號通路、cAMP信號通路、磷脂酰肌醇信號通路和EGF受體信號通路的主要環(huán)節(jié)。五．教學(xué)內(nèi)容: 細(xì)胞膜是細(xì)胞與細(xì)胞外環(huán)境之間的一種選擇性通透屏障，物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸對細(xì)胞的生存和生長至關(guān)重要。u類型：簡單擴(kuò)散（simple diffusion）、協(xié)助擴(kuò)散（facilitated diffusion）u膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：178。 又稱通透酶，與運(yùn)輸物質(zhì)的結(jié)合與酶的動力學(xué)相似。壓力激活通道：壓力變化,啟動通道開放。細(xì)胞耗能。質(zhì)子泵：P型質(zhì)子泵、V型質(zhì)子泵、H+ATP酶u協(xié)同運(yùn)輸（cotransport）由Na+K+泵（或H+泵）與載體蛋白協(xié)同作用，靠間接消耗ATP所完成的主動運(yùn)輸方式u物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)與膜電位進(jìn)行主動運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)：l各種離子（如鈉離子、鉀離子、氯離子、碳酸根離子、鈣離子等）。鈉鉀泵的組成：l大亞基（100000DN）：外側(cè)：鉀結(jié)合位點(diǎn)；鳥苯苷結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)側(cè)：鈉結(jié)合點(diǎn)；ATP結(jié)合點(diǎn)l小亞基（45000DN）：與大亞基結(jié)合，作用不明。 3 Na+釋放到細(xì)胞外 174。Na+K+泵的作用l產(chǎn)生和維持膜電位；l為葡萄糖、氨基酸的主動運(yùn)輸創(chuàng)造條件；l維持細(xì)胞的滲透壓，例如：當(dāng)腎小管細(xì)胞間隙鈉過高時會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水分外滲，細(xì)胞內(nèi)缺水，人會感到口渴而飲水多。提高細(xì)胞質(zhì)中的pH和細(xì)胞器內(nèi)的酸度。協(xié)同運(yùn)輸兩種物質(zhì)同時相向轉(zhuǎn)運(yùn)，稱對向運(yùn)輸（逆向協(xié)同運(yùn)輸）?！癜套饔谩癜伦饔冒套饔谩癜嬜饔茫╬inocytosis）與吞噬作用（phagocytosis）?！窠M成型的外排途徑（constitutive exocytosis pathway）所有真核細(xì)胞連續(xù)分泌過程用于質(zhì)膜更新（膜脂、膜蛋白、胞外基質(zhì)組分、營養(yǎng)或信號分子）default pathway：除某些有特殊標(biāo)志的駐留蛋白和調(diào)節(jié)型分泌泡外，其余蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→分泌泡→細(xì)胞表面 ●調(diào)節(jié)型外排途徑（regulated exocytosis pathway）特化的分泌細(xì)胞儲存——刺激——釋放產(chǎn)生的分泌物（如激素、粘液或消化酶）具有共同的分選機(jī)制，分選信號存在于蛋白本身，分選主要由高爾基體TGN上的受體類蛋白來決定 ●膜流：動態(tài)過程對質(zhì)膜更新和維持細(xì)胞的生存與生長是必要的●囊泡與靶膜的識別與融合胞吞作用途徑 膜上糖蛋白或糖脂識別 與膜接觸 膜內(nèi)陷包圍物質(zhì) 膜融合去封口 囊泡 進(jìn)入細(xì)胞胞內(nèi)體：是動物細(xì)胞內(nèi)由膜包圍的細(xì)胞器，其作用是傳輸由胞吞作用新攝入的物質(zhì)到溶酶體被降解。●細(xì)胞通訊方式：u分泌化學(xué)信號進(jìn)行通訊 178。178。細(xì)胞接受外界信號，通過一整套特定的機(jī)制，將胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)信號，最終調(diào)節(jié)特定基因的表達(dá)，引起細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng)，這種反應(yīng)系列稱之為細(xì)胞信號通路。 u細(xì)胞表面受體:為胞外親水性信號分子所激活 細(xì)胞表面受體分屬三大家族： 178?！竦诙攀梗╯econd messenger）cAMP、cGMP、三磷酸肌醇（IP3），二?；视停―G）●分子開關(guān)（molecular switches）細(xì)胞內(nèi)信號傳遞中起舉足輕重作用的一類蛋白質(zhì)，通過磷酸化或結(jié)合GTP而活化，開啟信號通路，通過去磷酸化或結(jié)合GDP而失活，關(guān)閉信號通過。 ●一氧化氮介導(dǎo)的信號通路三、通過細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號跨膜傳遞親水性的化學(xué)信號分子一般不能直接進(jìn)入細(xì)胞，而是通過與細(xì)胞表面特異受體的結(jié)合，進(jìn)行信號傳導(dǎo)，進(jìn)而對靶細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)?？缒ば盘栟D(zhuǎn)導(dǎo)無需中間步驟178。具有結(jié)合GDP或GTP的能力，有GTP酶活性；可激活效應(yīng)蛋白，實現(xiàn)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。 l大多數(shù)常見的神經(jīng)遞質(zhì)受體和激素受體是屬于G蛋白偶聯(lián)型受體。u受體絲氨酸/蘇氨酸激酶 如TGF的作用u受體酪氨酸磷酸酯酶 受體蛋白酪氨酸殘基去磷酸化u受體鳥苷酸環(huán)化酶（ANPssignals） 合成cGMPu酪氨酸蛋白激酶聯(lián)系的受體 cAMP信號通路u反應(yīng)鏈：激素→G蛋白偶聯(lián)受體→G蛋白→腺苷酸環(huán)化酶→cAMP→ cAMP依賴的蛋白激酶A→基因調(diào)控蛋白→基因轉(zhuǎn)錄 u組分及其分析 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白活化與調(diào)節(jié)G蛋白的效應(yīng)蛋白（酶）主要有
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