【正文】 菌屬發(fā)酵濾液中提取，能與細菌核糖體30S亞基發(fā)生不可逆的結合，抑制MRNA的轉錄和蛋白質合成，導致細菌死亡，同時該類抗生素還能依靠其離子的吸附作用，吸附在菌體的表面，造成細胞膜的損傷，導致膜的滲漏使胞內(nèi)的K+ 、嘌呤等重要生命物質外漏，為殺菌類抗生素。他唑巴坦也是半合成酶抑制劑，其抑酶作用范圍廣，抑制作用優(yōu)于克拉維酸和舒巴坦。34．常用β內(nèi)酰胺酶抑制劑有哪些？又有何區(qū)別？β內(nèi)酰胺酶抑制劑與β內(nèi)酰胺酶有較高的親和性，以競爭性和不可逆的抑制方式發(fā)揮作用，與β內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)用能增強后者的抗菌活性。③質粒介導的AMPC酶，常見于克雷伯菌、弗勞地枸椽酸桿菌、陰溝桿菌、奇異變形和蜂房哈夫尼菌等，表現(xiàn)對一代至三代頭孢菌素、頭霉素類、氨基糖苷類耐藥，但對碳青霉烯類、四代頭孢菌素和喹諾酮類敏感。④D群β內(nèi)酰胺酶為苯唑西林酶。31．β內(nèi)酰胺酶的分類及作用機制是什么？β內(nèi)酰胺酶是一群酶，根據(jù)分子學結構可將其分為四群。③抗生素作用靶位的改變。?①細菌產(chǎn)生可破抗生素或使之失去抗菌作用的酶。④穿刺接種法：本法多用于雙糖、半固體或明膠等高層培養(yǎng)基的接種，由培養(yǎng)基中央刺到距管底約半厘米處，然后沿穿刺線退出接種針。常用指示劑有酚紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍、溴酚紅、中性紅、中國藍、甲基紅、酸性復紅等。27．常用培養(yǎng)基有哪幾種？其成分主要是什么？常用培養(yǎng)基有普通培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和增菌培養(yǎng)基。如果生態(tài)平衡失調，以至機體某一部位的正常菌群中各細菌的比例關系發(fā)生數(shù)量和質量上的變化，稱為菌群失調。例如皮膚粘膜受傷（特別是大面積燒傷）、身體受涼、過度疲勞、長期消耗性疾病等，可導致正常菌群的自身感染；②由于正常菌群寄居部位的改變，發(fā)生了定位轉移，也可引起疾病。②刺激免疫應答：正常菌群釋放的內(nèi)毒素等物質可刺激機體免疫系統(tǒng)保持活躍狀態(tài)，是非特異免疫功能的一個不可缺少的組成部分。正常菌群大部分是長期居留于人體的又稱為常居菌，也有少數(shù)微生物是暫時寄居的，稱為過路菌。最后，在已鑒定的細菌中確定哪種要進行抗微生物敏感性試驗。核心多糖具有細菌屬和組的特異性，同一屬和組的細菌，其核心多糖均相同。L型細菌的主要意義在于仍有致病性，能引起間質性炎癥。菌毛分為普通菌毛及性菌毛兩種，普通菌毛能與宿主細胞表面的菌毛受體相結，發(fā)揮粘附作用，而性菌毛中空呈管狀，能在細菌之間通過接合傳遞遺傳物質，故性菌毛與細菌的遺傳變異有關。不含有芳香氨基酸和含硫氨基酸。細菌的基本結構包括細胞壁、細胞膜、細胞漿、核質和胞漿顆粒等。標本采集后應盡快送到實驗室，最遲不超過半小時。③疑產(chǎn)婦有宮腔感染，待胎兒娩出后取宮腔分泌物，并同時取嬰兒耳拭子一同送檢。采集標本時應清洗尿道口，再用無菌拭子擦取尿道口膿性分泌物或深入尿道內(nèi)24厘米取分泌物，檢查精液患者應禁欲5天以上，采用體外排精法射精于滅菌容器送檢。②腹瀉病人應盡量在急性期采集標本（3天以內(nèi)），以提高陽性率。當疑為細菌性痢疾、腸炎、腸結核和頑固性腹瀉時，應在急性期采集，亦最好在用藥之前，以提高檢出率。注意事項：①盡可能在用藥前采集標本，采集前一定要作好清洗、消毒工作。13．創(chuàng)傷和化膿性標本采集方法是什么？軟組織的急性化膿性炎癥、化膿性疾病、膿腫和創(chuàng)傷感染等疾病可根據(jù)臨床要求取標本送檢。注意事項：①標本采集應在用藥之前。在正常人體中，上述體液均是無菌的，有感染的情況下檢出的細菌，應視為病原菌，應給予及時正確的治療。③多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此，無論用何種方法采集尿液均宜在用藥之前進行。如反復檢查為同一細菌，也應考慮為病原菌。采集標本前，女性先以肥皂水清洗外陰部，再以滅菌水或1：1000高錳酸鉀水溶液沖洗尿道口，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)，立即加蓋送檢。④約有1／4～1／2肺部感染患者可能發(fā)生菌血癥，應同時作血培養(yǎng)。為了避免污染菌的干擾，最好連查3次。④如不能及時送檢應于室溫存放，切勿放冰箱存放。如不能及時送檢，應將已注血的培養(yǎng)瓶在室溫存放，并不得超過12小時。若已用抗菌藥物或療效不佳時，在可能條件下停藥24小時后再做血培養(yǎng)。對于不能及時送檢的要用專用運送培養(yǎng)基運送，而對一些含有脆弱細菌的標本，需加入特別的保存劑。目前，微生物學標本最常用的抗凝劑是多聚茴香腦磺酸鈉SPS（Sodium polyanethol sulfonate），%(W/V)，否則會抑制一些奈瑟菌和厭氧性鏈球菌的生長。⑤標本采集、運送過程中要有專人負責，避免人為操作失誤。6． 臨床標本采集的一般原則是什么？①在最適宜的時間收集標本，最好在使用抗生素之前或感染急性期采集。②正確及時的采集標本，按要求及時送檢微生物實驗室檢查。④微生物的正確鑒定和藥物敏感性試驗結果。別外，臨床上抗生素的大量濫用，引起了正常菌群失調和大量耐藥菌株的出現(xiàn)，從而加重了機體的內(nèi)源性感染機率，這一定程度又加重了感染性疾病的發(fā)生。②對標本中分離到的微生物進行培養(yǎng)、鑒定。1． 臨床微生物學的概念是什么？臨床微生物學是研究微生物的形態(tài)、結構、分類、生命活動規(guī)律的一門科學，包括細菌學、病毒學、真菌學等。③進行藥物敏感性試驗，解釋和預報結果。4． 臨床醫(yī)師主要需要從臨床微生物學實驗室得到什么？①能為臨床提供醫(yī)學決策的相關信息。⑤能快速地報告實驗結果，并做出相關的結果解釋。③重視實驗室的鑒定及藥敏結果，結合臨床患者病情合理使用抗生素。②采集標本要有代表性和針對性，不同情況應區(qū)別對待，適宜地采取相應的方法收集標本，如尿液標本疑為厭氧菌感染時，應行恥骨上緣穿刺術取膀胱尿培養(yǎng)。⑥采集標本不僅要防止被污染，同時也要注意安全，防止傳播和自身感染。肝素也是常用抗凝劑之一，主要用于病毒培養(yǎng)，因為它能抑制革蘭氏陽性菌和酵母菌的生長。例如，尿液中加入硼酸能有效地抑制細菌生長，較好的保持尿液中菌落的數(shù)量；糞便中加入磷酸鹽緩沖液有助于保持糞便中像志賀菌、沙門菌等的脆弱細菌。連續(xù)做血培養(yǎng)3次，各次采血應在不同部位的血管穿刺，禁從靜脈插管內(nèi)抽血。 注意事項：①不能用碘酒消毒瓶蓋，只需70％酒精消毒瓶蓋。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　 　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　10．采集痰標本時應注意些什么？當疑為呼吸道感染性疾病時，應讓患者取晨痰送檢。注意事項：①采集標本以清晨為佳，為減少口腔正常菌群污染標本，采集前應充分漱口。⑤ 對一些特殊患者可采用支氣管鏡采集法及氣管穿刺法取痰。男性先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，就可采集中段尿。必要時可采用膀胱穿刺術取尿。④尿液中不得含有防腐劑或消毒劑。懷疑為腦膜炎的病人，用腰穿方法采集腦脊液2 ml左右，在常溫下15分鐘內(nèi)送檢。②嚴格無菌操作，避免污染。對開放性感染和已潰破的化膿灶，標本采集前先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，再用滅菌拭子采取膿液及病灶深部的分泌物。②不能立即送檢的標本，應放4℃保存；培養(yǎng)淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌的標本除外。腸熱癥患者應在兩周以后采集。③雖糞便含有多種雜菌，但應盡量采用無菌容器。對于女性患者，先用窺器擴張陰道，然后用滅菌棉拭子取陰道后穹隆處或宮頸分泌物作培養(yǎng)或涂片鏡檢。④沙眼衣原體在宿主細胞內(nèi)繁殖，采集時盡可能多的取上皮細胞。標本不應放在冰箱里，因為低溫對一些厭氧菌有害。除動物細胞無細胞壁外，各類生物的細胞具有不同的細胞壁。革蘭氏陰性細菌的細胞壁薄，除少量肽聚糖構成細胞壁的內(nèi)層外，由大量脂多糖構成其外層，并有脂蛋白形成鑲嵌結構，其中含有芳香氨基酸和含硫基酸。莢膜是細胞壁外的一層多糖物質具有抗原性，能抵抗機體吞噬細胞的吞噬作用。而且是臨床上感染漏診的主要原因之一。特異性多糖是脂多糖的最外層，構成重要的菌體表面抗原，從而決定了種或型的特異性。22．正常菌群的含義是什么？人自出生后，外界的微生物就逐漸進入人體。23．正常菌群的生理作用是什么？①生物拮抗作用：正常菌群通過粘附和繁殖能形成一層自然菌膜,是一種非特異性的保護膜,可促機體抵抗致病微生物的侵襲及定植,從而對宿主起到一定程度的保護作用。③合成維生素：有些微生物能合成維生素，如核黃素、生物素、葉酸、吡哆醇及維生素K等，供人體吸收利用。例如大腸桿菌進入腹腔或泌尿道，可引起腹膜炎、泌尿道感染。25．引起菌群失調的原因有哪些？ 菌群失調的常見誘因主要是抗生素、同位素、激素的不合理使用，另外患有慢性消耗性疾病時腸道、呼吸道、泌尿生殖道的功能失常也是重要原因。培養(yǎng)基的主要成分有氮源、碳源、無機鹽、水分及一些生長因子，它們主要為細菌的生長繁殖提供營養(yǎng)和生長環(huán)境。29．標本接種技術有幾種？①平板接種法：初次接種成功后，連繼劃線或分四區(qū)劃線接種。⑤傾注培養(yǎng)法：該法常用液體標本的細菌定量計數(shù)。如β內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷類鈍化酶、拓撲異構酶等。如細菌的青霉素結合蛋白改變，導致對β內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥。①A群β內(nèi)酰胺酶為絲氨酸蛋白酶，主要作用于青霉素類藥物，編碼基因位于染色體或質粒上，可從一個細菌轉移至另一個細菌。大量試驗證實，β內(nèi)酰胺類抗生素和細胞壁前體的存在都可以誘導β內(nèi)酰胺酶的合成，其作用機制為β內(nèi)酰胺酶與催化細菌細胞壁肽聚糖合成的青霉素結合蛋白空間結構相似，可競爭性水解藥物β內(nèi)酰胺環(huán)使酰胺鍵斷裂而失去抗菌活性，其水解效率是細菌耐藥性的主要決定因子。④水解碳青霉烯類的β內(nèi)酰胺酶，常見銅綠、鮑曼等非發(fā)酵菌屬，表現(xiàn)以碳青霉烯類和單環(huán)β內(nèi)酰胺類抗生素為代表的多重耐藥。常用β內(nèi)酰胺酶抑制劑有克拉維酸、舒巴坦和他唑巴坦。35．β內(nèi)酰胺類抗生素的作用機制是什么？青霉素類乃至整個β內(nèi)酰胺類抗生素的作用機制是阻斷肽聚糖合成的最后階段即肽聚糖鏈的組裝和三維結構的構建。與細胞壁合成抑制藥物聯(lián)合使用時可產(chǎn)生協(xié)同作用，破壞細胞壁完整性，使藥物易于進入菌體而達到核糖體作用靶位。作用機制是與肽聚糖合成中間產(chǎn)物D丙氨酰D丙氨酸末端形成復合物，可阻斷肽聚糖合成過程中轉糖基酶、轉肽酶及羧肽酶的作用，從而阻止了細胞壁的合成。②指導臨床醫(yī)生合理選擇抗生素，可依據(jù)實驗結果調整經(jīng)驗性治療于靶向治療。④最低殺菌濃度的測定。大的變異是一大段DNA作為一個整體重新排列，這種變化常由在染色體中可以獨立移動的特殊基因單位，即轉座子或插入序列產(chǎn)生。其中SCCmec可稱為抗生素耐藥島：它包含對甲氧西林產(chǎn)生耐藥的mecA基因，有的SCCmec還包含對非β內(nèi)酰胺抗生素和重金屬產(chǎn)生耐藥的質粒和轉座子。② 高壓（） 滅菌15 分鐘，備用。（二） 氧化－發(fā)酵（O －F） 培養(yǎng)基（1）成分蛋白胨 2g氯化鈉 5gK2HPO4 葡萄糖 10g2g／L 溴麝香草酚藍溶液12 ml水1000 ml（2）制法① 將蛋白胨、鹽類加水溶解后，校正pH 。（三） 克氏鐵瓊脂（1）成分蛋白胨或多胨　20g牛肉膏 3g酵母浸膏 3g乳糖 10g葡萄糖 1g氯化鈉 5g拘櫞酸鐵銨 硫代硫酸鈉 瓊脂 14g酚紅 水1000 ml（2）制法① 將上述各成分（酚紅除外） 混合，加熱溶解，校正p H ，加入酚紅。加熱溶解，校正p H ，加入酚紅。（五） 胰蛋白胨水（1）成分胰胨或其他含色氨酸豐富的胨 1g氯化鈉 水100 ml（2）制法① 將胰胨、氯化鈉加入水后，加熱溶解，校正pH ～ ，分裝試管。② 高壓（） 滅菌15 分鐘即成。（3）用途 細菌構櫞酸鹽及無機銨利用試驗用。（3）用途 鑒別腸桿菌科及弧菌科細菌用。（十）Thornley 精氨酸培養(yǎng)基（1）成分L －蛋白胨 氯化鈉 K2HPO4 水100 ml（2）制法① 將上述成分（酚紅除外） 混合加熱溶解后，校正pH ～ ，加入酚紅混勻，分裝小試管。（十一） 甘油品紅培養(yǎng)基（1）成分牛肉膏10g蛋白胨20g水1000 ml甘油1 ml100g／L ml100g／L 無水亞硫酸鈉水溶液（新鮮配制） ml（2）制法① 將牛肉膏、蛋白胨、水加熱溶解后，校正pH ，加入甘油混勻。（十二） 馬尿酸鈉培養(yǎng)基（1）成分馬尿酸鈉　1g肉浸液（）100 ml（2）制法① 將馬尿酸鈉溶于肉浸液內(nèi)，分裝于小試管內(nèi)。細菌分解糖類后形成的代謝產(chǎn)物隨細菌種類而異，有的產(chǎn)酸，有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣。雙糖類有乳糖、麥芽糖、蕈糖等。（4）結果能分解糖產(chǎn)酸的細菌，培養(yǎng)基中指示劑是否呈現(xiàn)酸性反應?？梢罁?jù)細菌分解糖的能力各異而區(qū)分和識別不同的細菌。能在無氧環(huán)境中不能分解葡萄糖，稱為氧化型。不分解葡萄糖的細菌稱產(chǎn)堿型。兩管培養(yǎng)基均變黃色為發(fā)酵型，若加液體石蠟的一管顏色不變而另一管變黃色為氧化型，兩管均不變色為產(chǎn)堿型。（三） 七葉苷水解試驗（1）原理七葉苷經(jīng)細菌水解生成七葉素，七葉素能與培養(yǎng)基中構櫞酸鐵的二價鐵離子結合生成黑色的化合物，使培養(yǎng)基變黑。也可用于革蘭氏陰性桿菌和厭氧菌的鑒別試驗。試劑可用盧戈碘液或革蘭染液中的碘液。（五）β半乳糖苷酶試驗（1）原理某些細菌具有β半乳糖苷酶，該酶可分解鄰－ 硝基苯－β－D － 半乳糖苷(ONPG)，生成黃色的鄰硝基酚。（4）應用此試驗是測定不發(fā)酵或遲發(fā)酵乳糖的細菌是否產(chǎn)生半乳糖苷酶。迅速及遲緩分解乳糖的細菌ONPG 為陽性，如埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬。某些細菌雖能分解葡萄糖，但產(chǎn)酸量少，培養(yǎng)基酸堿度在pH 以上，加入甲基紅指示劑呈黃色。（3）結果紅色為陽性，橘紅色為弱陽性,黃色為陰性。（七） VP 試驗（4）原理某些細菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，并進一步脫羧成為乙酰甲基甲醇。（3）試劑 ：氫氧化鉀40g 溶于水10 ml ，加肌酸0．3g 。在培養(yǎng)液2 ml ml ，置50℃水浴中2小時或37 ℃4小時，充分振搖，觀察結果。（5）結果 呈紅色為陽性。大腸埃希菌VP陰性而產(chǎn)氣腸桿菌陽性。將未接種的培養(yǎng)基在35℃培養(yǎng)，作為對照。（2）試劑柯凡克（Kovac）試劑：對二甲基氨基苯甲醛5g ，戊醇75 ml ，濃鹽酸50 ml 。（3）方法將細菌接種于蛋白陳水培養(yǎng)基中，置35℃培養(yǎng)1 ～2 天， ml ，試劑浮于培養(yǎng)基之上，使成兩層，即刻觀察結