[自然科學(xué)]免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)-wenkub
2023-03-07 05:20:35 本頁(yè)面
【正文】 量、稀釋（ 10~20mg/ml） . ? ② FITC按蛋白量的 1/80－ 1/100加入。 標(biāo)記抗體 技術(shù) = 抗原抗體反應(yīng) 示蹤物標(biāo)記 靈敏性 特異性 免疫標(biāo)記技術(shù)的主要特點(diǎn)： 高特異性 、 高靈敏性 免疫技術(shù) +標(biāo)記技術(shù) 常用的免疫標(biāo)記物質(zhì) 類別 標(biāo)記物 用途 熒光素 FITC、 RB200等 免疫組化 免疫分析測(cè)定 酶 HRP、 AP 免疫組化 免疫分析測(cè)定 金屬顆粒 膠體金、鐵蛋白 免疫組化 免疫分析測(cè)定 放射性核素 3H、 14C、 32P、 57Gr、 125I、 131I 免疫分析測(cè)定 熒光抗體 ? ： 熒光素在紫外線照射下可發(fā)出肉眼可見(jiàn)的熒光，其與抗體結(jié)合后仍保持其本身的特性。 免疫電泳技術(shù) 將瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)與電泳技術(shù)結(jié)合起來(lái)的一種免疫檢測(cè)技術(shù)。單價(jià)抗體只有一個(gè)抗原結(jié)合部位，不會(huì)產(chǎn)生凝集反應(yīng)，當(dāng)加入抗球蛋白抗體后，可以將兩個(gè)各連結(jié)一個(gè)抗原決定簇的單價(jià)抗體再連結(jié)起來(lái)，出現(xiàn)凝集。 ? 常用的微載體： 致敏紅細(xì)胞、聚苯乙烯乳膠、炭粉顆粒 Ag + （紅細(xì)胞、乳膠、炭） 載體 載體 Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag Ag 間接凝集反應(yīng) Ag ?將抗原結(jié)合在微載體上進(jìn)行的凝集試驗(yàn)叫 “ 正向間接凝集試驗(yàn) ” ； 將抗體結(jié)合在微載體上進(jìn)行的凝集試驗(yàn)叫 “ 反向間接凝集試驗(yàn) ” 。 二、 免疫血清學(xué)技術(shù) 凝集試驗(yàn) 沉淀試驗(yàn) 補(bǔ)體參與的 試驗(yàn) 標(biāo)記抗體技術(shù) 中和試驗(yàn) 直接凝集試驗(yàn) 間接凝集試驗(yàn) SPA協(xié)同凝集試驗(yàn) 橋梁凝集試驗(yàn) 絮狀沉淀試驗(yàn) 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 免疫電泳 火箭免疫電泳 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 免疫熒光抗體技術(shù) 免疫酶技術(shù) 同位素標(biāo)記技術(shù) 中和試驗(yàn) 用 途 定性 定量 定位 種 類 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 一、 免疫血清學(xué)技術(shù) ? 種類： 1. 凝集試驗(yàn) 細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，當(dāng)與相應(yīng)抗體特異結(jié)合后，在適量電解質(zhì)存在的條件下可逐漸凝集，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象稱為凝集反應(yīng)（直接凝集試驗(yàn)） 。 ? SPA協(xié)同凝集試驗(yàn) 葡萄球菌 A蛋白（ staphylococal protein A,SPA)是葡萄球菌的特異性表面抗原，能與多種動(dòng)物 IgG的 Fc片段結(jié)合。 ? 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所發(fā)生的沉淀反應(yīng) (precipitation)。 在 Ag、 Ab在凝膠中擴(kuò)散的同時(shí)加入電場(chǎng)作用，使 Ag、 Ab的擴(kuò)散速度加快，同時(shí)限制了擴(kuò)散的方向，增加了試驗(yàn)的敏感性。 ? 熒光抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，（
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