【正文】 DNA片段，并通過(guò)交換把它整合到自己的基因組中，從而獲得了供體細(xì)胞的某些遺傳性狀的現(xiàn)象。 三、采用接合技術(shù)育種 Hfr細(xì)菌和 F－ 細(xì)菌接觸帶來(lái)兩個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的接合和染色體從 Hfr細(xì)菌向 F－ 細(xì)菌轉(zhuǎn)移。 （三）放線菌的致育因子 經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)在 Scp1的致育因子。 二、放線菌的接合作用 （一）放線菌基因重組的發(fā)現(xiàn) 1955年， Sermonti夫婦在天蘭色鏈霉菌（ streptomyces coelicoler） ISS株中首次發(fā)現(xiàn)通過(guò)遺傳性交換而產(chǎn)生的重組，接著， Hopwood也用 A 3(2)發(fā)現(xiàn)了同樣的重組。 供體菌 Hfr， 受體菌 F－ thr－ leu－ lac－ gal－ azir tonr strr， 將大約 10倍的 F－ 菌和 Hfr對(duì)數(shù)期菌混合，輕輕振蕩培養(yǎng)，在不同時(shí)間間隔取樣，在組織攪拌器中劇烈振蕩后，將培養(yǎng)物經(jīng)適當(dāng)稀釋后，涂布在含鏈霉素且以葡萄糖作為碳源的基本培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇。 （ 3） F ′菌的最大特點(diǎn)是能構(gòu)建穩(wěn)定的部分二倍體。（ conjugant） F ′ F－ 2F ′ Hfr菌株的 F因子的反常切除所形成的 F因子有兩種類型： I 型：包含了染色體一個(gè)區(qū)域和不完全的 F ′因子。在形成接合對(duì)以后， F＋ 菌的 F因子進(jìn)行 DNA滾環(huán)復(fù)制。 Hfr（ high frequency of rebination） : F因子在細(xì)胞中以整合狀態(tài)存在。 F性菌毛分布在大腸桿菌的表面，數(shù)目與 F因子相當(dāng)，長(zhǎng)度為 1～ 20um。其中， tra J、 A、 L、 E、 N、 B、 W、 V、 C、 U、F、 H這些基因與性菌毛的合成與裝配有關(guān)； tra Y、 Z、M、 I、 G、 D等基因產(chǎn)物與 DNA的轉(zhuǎn)移有關(guān)； traG和traN的基因產(chǎn)物與細(xì)菌結(jié)合有關(guān)； traS和 traT的基因產(chǎn)物與表面排斥有關(guān)。 大小約是細(xì)菌基因組 DNA的 2％，分子量為 106d、 。 F因子的存在 （ 1） 的某些種（如品系 A） 記為 F＋ ， 帶有一個(gè)性因子，或致育因子 F（ fertility factor）， 而另一個(gè)不育型品系記作 F－ ， 記不帶有性因子； （ 2）雜交 F＋ F－ 是可育的，雜交 F－ F－ 是不育的； （ 3） F因子可以傳遞，從 F＋ 到 F－ 細(xì)菌，但必須通過(guò)細(xì)胞接觸； （ 4） F因子能夠自發(fā)喪失，一旦喪失就不再恢復(fù)，除非通過(guò)另一個(gè) F＋ 細(xì)胞在傳遞過(guò)來(lái)。 （三 ） 接合的機(jī)制 接合作用中兩菌株性別的存在 Lederberg 和 Tatum認(rèn)為在兩個(gè)細(xì)菌的親本細(xì)胞在接合過(guò)程中起同等作用 — 即 的性系統(tǒng)被認(rèn)為是同宗配合。 Lederberg 和 Tatum將培養(yǎng)過(guò)一種營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)菌的培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)滅菌、過(guò)濾，然后加入到另一營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌培養(yǎng)物中。結(jié)果在單獨(dú)培養(yǎng)的平板上無(wú)菌落，而在混合培養(yǎng)的平板上長(zhǎng)出了原養(yǎng)型菌落。 重組是分子水平上的概念，而雜交是細(xì)胞水平上的概念。第三章 基因重組與育種 引言 基因重組（ Gene rebination）： 凡把兩個(gè)不同性狀個(gè)體內(nèi)的遺傳基因轉(zhuǎn)移到一起，經(jīng)過(guò)遺傳分子間的重新組合，形成新遺傳個(gè)體的方式，稱遺傳重組（ Geic rebination）。 雜交中必然含有重組，但重組則不限于雜交這一種形式。 對(duì)接合現(xiàn)象的解釋： （ 1）可能是細(xì)菌接合后發(fā)生基因重組的結(jié)果； （ 2）細(xì)菌并沒(méi)有接合，而是交換了 DNA（ 轉(zhuǎn)化）； （ 3）細(xì)菌細(xì)胞并沒(méi)有接合，而是通過(guò)培養(yǎng)基交換了養(yǎng)料，即互養(yǎng)； （ 4）細(xì)菌細(xì)胞并沒(méi)有接合，而是親本細(xì)菌發(fā)生了回復(fù)突變的結(jié)果； （ 5）雖經(jīng)接合而未發(fā)生基因重組，只是形成異核體或雜合二倍體。即使前一種菌在培養(yǎng)、滅菌、過(guò)濾之前曾發(fā)生過(guò)裂解，也不能是后一種菌產(chǎn)生原養(yǎng)型。 1952年， W. Hayes利用 Lederberg 和 Tatum所做的雜交實(shí)驗(yàn)，對(duì)（ A） Met－ Bio－ （ Sms或 Smr）（ B）Thr－ Leu－ B1－ （ Smr或 Sms） 進(jìn)行研究。 F＋ 細(xì)胞經(jīng)低濃度的吖啶橙處理后喪失 F因子，也會(huì)偶爾自發(fā)地或經(jīng)紫外線處理喪失。 整個(gè)基因組編碼 94個(gè)蛋白質(zhì)，其中 1／ 3的基因與接合作用有關(guān)。 B. 復(fù)制區(qū)（ replicationregion）： 位于 F因子結(jié)構(gòu)圖譜的 40～ 49kb， 包含一個(gè)特異的 復(fù)制蛋白基因 frp（ F replication proteins）、 決定不相容性基因 inc（ inpatibility） 和一個(gè) 復(fù)制起始點(diǎn)oriV（ vegetative origin of replication）。 性菌毛的功能： A. 是兩性細(xì)胞接合時(shí)轉(zhuǎn)移DNA的通道，又叫性纖毛橋（ sex pili bridge）；B. 又是特異 phage吸附的部位。 Hfr與 F＋ 的異同： （ 1） F＋ 與 Hfr均能與 F－ 菌株雜交； （ 2） F＋ 與 Hfr均能合成細(xì)胞表面附屬物 — 性菌毛； （ 3） Hfr菌株總是從 F＋ 菌株中得到，而 F＋ 卻從未在 Hfr菌株中得到過(guò)； （ 4） Hfr經(jīng)吖啶橙處理后性質(zhì)不變，而 F＋ 經(jīng)吖啶橙處理后失去 F因子； （ 5） Hfr與 F－ 雜交后， F－ 性質(zhì)一般不會(huì)變；而 F＋ 與 F－ 雜交后， F－ 變?yōu)?F＋ 。單鏈轉(zhuǎn)入 F－ 菌，并合成新的互補(bǔ)鏈。 II型：帶有完整的 F因子 DNA和位于 F因子插入兩端的染色體基因。 F因子轉(zhuǎn)導(dǎo) ：通過(guò) F ′因子的轉(zhuǎn)移而使受體菌改變 它的遺傳性狀的現(xiàn)象稱為 F因子轉(zhuǎn)導(dǎo)或 或性因子轉(zhuǎn)導(dǎo)或簡(jiǎn)稱性導(dǎo)（ F duction 或 sex duction） 擬表型菌 ：指表型上屬于 F ′而遺傳性上仍是 F＋ 的菌，也就是說(shuō)表面沒(méi)有性菌毛，因而 喪失了表面排斥性。 中斷雜交實(shí)驗(yàn) 中斷雜交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果： 基因是以 ori、 thr、 leu、 azi、 ton、 lac、 gal的順序連續(xù)轉(zhuǎn)移的。 （二）放線菌的性別 三種性別 原始致育型（ IF， initial fertility）： 相當(dāng)于 F＋ 正常致育型（ NF， normal fertility）： 相當(dāng)于 Hfr 超致育型（ UF， ultra fertility）： 相當(dāng)于 F－ 認(rèn)為 IF相當(dāng)于 F＋ 、 UF相當(dāng)于 F－的理由 （ 1） IF以 ％的頻率轉(zhuǎn)變?yōu)?UF， 在經(jīng) uv處理的 IF群體中曾經(jīng)得到作為受體高度可育的 UF菌株，這種情況類似于從 F＋ 菌株中得到 F－ 菌株； （ 2） IF UF雜交中， UF受體菌株全部轉(zhuǎn)變?yōu)?IF， 而染色體基因重組頻率大約為 10－ 4，兩者相差萬(wàn)倍。 Scp1和 F因子一樣也是一種質(zhì)粒，具有轉(zhuǎn)移性，在自身轉(zhuǎn)移的同時(shí)還能夠帶動(dòng)染色體進(jìn)行轉(zhuǎn)移。因此，接合雜交是確定特