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dna復(fù)制ppt課件(2)-wenkub

2023-01-21 14:02:11 本頁面
 

【正文】 續(xù)復(fù)制、 DNA的先導(dǎo)鏈、 DNA的后隨鏈、岡崎片段; ② 不同生物基因組復(fù)制子數(shù)目; ③ 線性 DNA復(fù)制末端問題的提出及解決方案; ④ θ復(fù)制、滾環(huán)復(fù)制及 D環(huán)復(fù)制的機制; ⑤ 大腸桿菌 DNA聚合酶 I、 II、 III 的性質(zhì)比較, DNA聚合酶 Ⅰ 與缺口平移法制備探針; ⑥ DNA復(fù)制的起始、延伸及終止。 (2) 復(fù)制過程完成前,細胞是不會發(fā)生分裂的。 注: 在每個細胞周期中,每個復(fù)制子發(fā)生一次復(fù)制,且只發(fā)生一次。如果一個脈沖比另一個脈沖強,我們可以用相對的標(biāo)記強度來區(qū)分,這些可用放射自顯影觀察。 復(fù)制能在新合成鏈的 3`端結(jié)束,它如何在 5`端啟動呢? 線性 DNA復(fù)制時末端問題的解決方案 (1) 通過將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子。 使分子沒有游離末端。 The A protein is cisacting Phage φX174 The replication by rolling cycle structure D環(huán)復(fù)制 Replication by displacement loop structure D環(huán)復(fù)制 ( Replication by displacement loop structure) 4 DNA聚合酶 大腸桿菌 DNA聚合酶的種類及其功能 真核生物 DNA聚合酶的種類及其功能 DNA聚合酶所具有的共同結(jié)構(gòu) 大腸桿菌 DNA聚合酶的種類及其功能 SOS 修復(fù) 性 質(zhì) 聚合酶 I 聚合酶II 聚合酶 III 3`→ 5`外切 + + + 5` → 3`外切 + 新生鏈的合成 + 生物學(xué)活性 1 15 生物學(xué)功能 切除引物 修復(fù) DNA 修復(fù)DNA 復(fù) 制 大腸桿菌 DNA聚合酶 I、 II、 III 的性質(zhì)比較 ( 1) DNA聚合酶 I 103 kDa的單鏈多肽,可以被蛋白酶切成兩段,C端的 2/3包括聚合酶活性位點; N端的 1/3包含核酸外切酶校正活性(一次可切除 110個堿基)。 作用是暫時切斷一條 DNA鏈,形成酶 DNA共價中間物而使超螺旋 DNA松弛,然后再將切斷的單鏈 DNA連接起來。廣泛存在于各種生物中。SSB包繞單鏈形成穩(wěn)定的單鏈形式。 半保留復(fù)制合成兩條新的 DNA鏈 (2)半保留復(fù)制實驗證據(jù)( MeselsonStahl) 1958年 Meselson amp。 兩條新鏈具有不同的特征 The two new DNA strands have different features Okazaki fragment 連接酶( Ligase)將 Okazaki fragment連接在一起 前導(dǎo)鏈 (Leading strand))和后隨鏈 (lagging strand)的協(xié)調(diào)合成 DNA聚合酶控制復(fù)制的忠實性 ?DNA聚合酶造成的復(fù)制錯誤可分為兩類: 移碼( frameshift): 指一個核苷酸的插入或缺失。 6 真核生物 DNA復(fù)制 P4748 7 DNA復(fù)制的調(diào)控 P4850 8 小 結(jié) ?
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