熒光定量pcr在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用-wenkub
2023-01-21 08:24:25 本頁(yè)面
【正文】 % ? 先后感染了不同的 HBV亞型 ? HBV病毒 S基因變異 如何診斷血清 HBsAg陰性的 HBV感染？ ? 提高 檢測(cè)敏感性 ? 采用針對(duì)變異抗原的檢測(cè)試劑 ?HBV DNA的檢測(cè)！ HBeAg與抗 HBe ? HBeAg的存在表示病毒復(fù)制活躍且有較強(qiáng)的傳染性。 ? 抗 HBs為保護(hù)性抗體，陽(yáng)性表示對(duì) HBV有免疫力。 ? 九十年代中期 PCR臨床應(yīng)用在國(guó)內(nèi)全面開展， 1998年，熒光定量 PCR技術(shù)開始在中國(guó)應(yīng)用于臨床檢測(cè)。熒光定量 PCR在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 內(nèi)容提要 一、基因診斷技術(shù)簡(jiǎn)介 二、乙型肝炎的病原檢測(cè) 三、丙型肝炎的病原檢測(cè) 四、性病相關(guān)病原體的檢測(cè) 基因診斷技術(shù)簡(jiǎn)介 4 基因診斷 3 免疫學(xué)診斷 臨床診斷 細(xì)胞膜 細(xì)胞核 DNA 轉(zhuǎn)錄 mRNA 翻譯 蛋白質(zhì) 1 形態(tài)學(xué)診斷 2 生化診斷 概念 PCR與基因診斷技術(shù) ? 基因診斷即通過核酸的分子生物學(xué)檢測(cè)直接檢測(cè)基因的存在狀態(tài)或缺陷對(duì)疾病作出診斷的方法。 熒光定量 PCR技術(shù) ? 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)，是指在反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)檢測(cè)整個(gè) PCR過程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì) PCR終產(chǎn)物的分析，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)未知的起始模版進(jìn)行定量分析的一種技術(shù)，是迄今對(duì)已知基因序列的核酸測(cè)定中最靈敏的方法。 HBsAg和抗 HBs同時(shí)陰性： 即所謂窗口期，此時(shí) HBsAg和抗 HBs都未產(chǎn)生。 HBeAg消失而抗 HBe產(chǎn)生稱為血清轉(zhuǎn)換。 ? “攜帶者”、“大三陽(yáng)”、“小三陽(yáng)”等免疫學(xué)指標(biāo)不能反應(yīng)體內(nèi)病毒復(fù)制水平與感染程度。 HBV DNA拷貝數(shù)＝乙肝病毒載量 HBV DNA檢測(cè)的臨床意義 ? HBV DNA是 HBV存在最直接的依據(jù) ? HBV DNA是 HBV復(fù)制的標(biāo)志 ? HBV DNA是患者具有傳染性的標(biāo)志 ? HBV DNA對(duì)乙肝兩對(duì)半起補(bǔ)充作用 ? HBV DNA是目前判斷乙肝抗病毒藥物療效最敏感的指標(biāo) ? HBV DNA可檢測(cè)出隱匿性慢性乙型肝炎 提供直接證據(jù)縮短“窗口期” PCR檢測(cè) “ 窗口期” 核酸檢測(cè)縮短的“窗口期”的天數(shù) HBV 56 615 HCV 70 4160 HIV 22 1015 有利于獻(xiàn)血員窗口期病毒核酸的篩查和早期診斷 HBV DNA檢測(cè)的臨床意義 HBV DNA檢測(cè)的臨床意義 調(diào)查表明并不是所有“大三陽(yáng)”的病人都處于 HBV復(fù)制期，具有傳染性；也不是所有“小三陽(yáng)”的病人 HBV都無復(fù)制。 ? 病毒 DNA整合于宿主肝細(xì)胞染色體而血中游離 HBV DNA很少或缺乏。 乙肝的治療 主要包括 抗病毒 、免疫調(diào)節(jié)、抗炎保肝、抗纖維化等 對(duì)于 HBV DNA≥105的患者應(yīng)進(jìn)行抗病毒治療 拉米夫定 ? 可迅速降低 HBV DNA的濃度，改善肝臟組織的病變，還可能阻斷肝纖維化的進(jìn)程，終止肝硬化的發(fā)展。 ? 用藥 4周開始下降， 12至 16周約半數(shù)以上的病例血清 HBV DNA降到可檢測(cè)水平以下。 ? 抗 HCV IgM在發(fā)病后即可檢
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