病毒的傳分析ppt課件-wenkub
2023-01-20 14:11:12 本頁面
【正文】 c bacterium），失去原噬菌體的細(xì)菌和為非溶源性細(xì)菌 （ non－ lysogenic bacterium）。 ? 快速溶菌突變體 ? (1)野生型 r+形成小的噬菌斑 1mm，周邊有朦朧的光環(huán)。 ? (3)鑒別：噬菌斑大小。 部分溶菌 條件致死突變體 所謂 條件致死突變型 ，就是在某些條件下，這些突變型是致死的，那么這些條件就稱為 限制條件 (restrictive condition)；而在另一些條件下仍可進(jìn)行繁殖，從而得以擴增進(jìn)行研究，所以這些條件稱為 許可條件 (permissive condition)。 （ 2） “抑制因子敏感”突變 (suppressorsensitive mutation, sus)： 實質(zhì)是原來正常的密碼子變成了終止密碼子，因而翻譯提前終止，不能形成完整肽鏈而產(chǎn)生有活性的蛋白質(zhì)，屬于 無義突變 （ nonsence mautation）。 （ 1）抑制因子敏感突變的概念： 例如：噬菌體 mRNA基因 細(xì)菌 tRNA基因反密碼子 正常 突變 突變 正常 基因： 5`TAC 3`?5`TAG 3` 3`ATC 5`?3`ATG 5` ? ? ? ? mRNA 5`UAC 3` 5`UAG 3` 3`AUC 5` 3`AUG 5` ? ? 表型：酪氨酸 終止 5`UAG 3` ?酪 氨酸 ?酪 氨酸 3`AUC 5` ?酪 氨酸 表 52攜帶不同專一性抑制基因宿主中 sus突變噬菌體的表現(xiàn) 噬菌體基因型 宿主菌基因型 su su+amb su+och su+op 野生型 sus amber sus ochre sus opal + + + + + + + + （ 2）噬菌體的抑制因子敏感突變型類型及表現(xiàn) 琥珀型（ amber） UAG 赭石型（ ocher） UAA 乳白型（ opal） UGA sus突變分為三類； 無義抑制基因 （ su＋ ） 實質(zhì) ： tRNA基因發(fā)生了突變，例如琥珀型抑制基因‘ su3＋ ’在 UAG密碼于上插入了一個酪氨酸，這是因為 tRNA加基因的反密碼子的一個突變， tRNATry，正常的反密碼于是 GUA，它按擺動規(guī)則譯讀酪氨酸密碼子 UAU(C)。 表 53 5種琥珀抑制基因的性質(zhì) 琥珀型抑 插入的 合成的蛋白質(zhì) 赭石型抑 制基因 氨基酸 占野生型 % 制基因 su1+ 絲氨酸 28 su2+ 谷氨酰胺 14 su3+ 酪氨酸 55 su4+ 酪氨酸 16 + su5+ 賴氨酸 5 + 四、噬菌斑分析（ The plaque assay） 1. 噬菌斑（ plaque） 噬菌體感染固體培養(yǎng)基上的菌苔（ lawn），溶菌后形成的圓形清亮的斑。 三人獲 1969年 Nobel prize（生理或醫(yī)學(xué)） ① 噬菌斑的形態(tài)： ② 宿主范圍： h：噬菌體能在 B和 B/2品系上生長 h+：只能在 B品系上生長。 噬菌斑小，邊緣模糊。 噬菌斑表型 推測基因型 親本型 透明 小 h r+ 半透明 大 h+ r 重組型 半透明 小 h+ r+ 透明 大 h r 半大 半小 透小 透大 （ 6） 重組機理 h+r h+r h+r h r+ h r+ h r+ h+r h+r h+r hr+ hr+ h r+ 噬菌體染色體在細(xì)菌體內(nèi)復(fù)制 不同的噬菌體染色體在細(xì)菌體內(nèi)交換重組 h+r+ h+r h+r hr+ hr+ h r h+r+ h+r h r+ h r 釋放出的 4種子代噬菌體 部分噬菌體DNA重組 （ 7）噬菌體重組值與基因作圖 ① 重組值的計算 重組噬菌體的噬菌斑數(shù) 總噬菌斑數(shù) 100% ② 基因圖距 用兩個基因的重組值表示基因間的遺傳距離。、渾濁溶菌班 (tu) 往往 M R tu 三 ?X174突變型的兩點和三點測交 P127 (一 ) ?X174的兩點測交 —— 兩個琥珀突變型間雜交 amA x amB ? su+ su+: amA、 amB su 基因型： amA amB+ amA+ amB amA+ amB+ amA+ amB+ amA amB
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