【正文】 病毒又稱噬茵體 (phage)。 病毒一小時(shí)可繁殖百個(gè)。 二、噬菌體的繁殖 ? 1．烈性噬菌體（ virulent phages） ? 概念： 感染細(xì)菌后立即在菌體內(nèi)復(fù)制和合成蛋白質(zhì)外殼，重新組裝成噬菌體顆粒，并導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞解體，釋放出噬菌體。 ? 快速溶菌突變體 ? (1)野生型 r+形成小的噬菌斑 1mm，周邊有朦朧的光環(huán)。 （ 1）抑制因子敏感突變的概念： 例如：噬菌體 mRNA基因 細(xì)菌 tRNA基因反密碼子 正常 突變 突變 正常 基因： 5`TAC 3`?5`TAG 3` 3`ATC 5`?3`ATG 5` ? ? ? ? mRNA 5`UAC 3` 5`UAG 3` 3`AUC 5` 3`AUG 5` ? ? 表型：酪氨酸 終止 5`UAG 3` ?酪 氨酸 ?酪 氨酸 3`AUC 5` ?酪 氨酸 表 52攜帶不同專一性抑制基因宿主中 sus突變噬菌體的表現(xiàn) 噬菌體基因型 宿主菌基因型 su su+amb su+och su+op 野生型 sus amber sus ochre sus opal + + + + + + + + （ 2）噬菌體的抑制因子敏感突變型類型及表現(xiàn) 琥珀型（ amber） UAG 赭石型（ ocher） UAA 乳白型（ opal） UGA sus突變分為三類； 無義抑制基因 （ su＋ ） 實(shí)質(zhì) ： tRNA基因發(fā)生了突變，例如琥珀型抑制基因‘ su3＋ ’在 UAG密碼于上插入了一個(gè)酪氨酸，這是因?yàn)?tRNA加基因的反密碼子的一個(gè)突變， tRNATry，正常的反密碼于是 GUA，它按擺動規(guī)則譯讀酪氨酸密碼子 UAU(C)。 噬菌斑表型 推測基因型 親本型 透明 小 h r+ 半透明 大 h+ r 重組型 半透明 小 h+ r+ 透明 大 h r 半大 半小 透小 透大 （ 6） 重組機(jī)理 h+r h+r h+r h r+ h r+ h r+ h+r h+r h+r hr+ hr+ h r+ 噬菌體染色體在細(xì)菌體內(nèi)復(fù)制 不同的噬菌體染色體在細(xì)菌體內(nèi)交換重組 h+r+ h+r h+r hr+ hr+ h r h+r+ h+r h r+ h r 釋放出的 4種子代噬菌體 部分噬菌體DNA重組 （ 7）噬菌體重組值與基因作圖 ① 重組值的計(jì)算 重組噬菌體的噬菌斑數(shù) 總噬菌斑數(shù) 100% ② 基因圖距 用兩個(gè)基因的重組值表示基因間的遺傳距離。左右臂包含 λDNA復(fù)制、噬菌體結(jié)構(gòu)蛋白合成、組裝成熟噬菌體、溶菌生長所需全部序列；對溶菌生長來說，中段是非必需的。他們發(fā)現(xiàn) Hfr（ λ） F－ 所得到的重組子頻率要比 Hfr F－（ λ）或 Hfr（ λ） F－ （ λ）要低得多。 能在 B和 B/2混合菌苔上產(chǎn)生半透明斑。 ① 熱敏感突變型 (heat sensitive mutants， ts)：通常在 30℃ (許可條件 )感染宿主進(jìn)行繁殖，但在 40一42℃ (限制條件 )條件下就是致死的，不能形成噬菌斑； ② 冷敏感突變型 (cold sensitive mutation， cs)：在較低溫度下就是致死的。原噬菌體經(jīng)誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w 裂解途徑。 5. 噬菌體大分子合成，細(xì)菌的核酸被降解。根據(jù)宿主細(xì)胞的不同而將病毒分為動物病毒、植物病毒和細(xì)菌茵病毒 3種。 易于培養(yǎng)化學(xué)分析 。 ? 繁殖： 吸附在特異的受體上 → 酶 → 細(xì)胞壁形成微孔 → 注入核酸→ 停止細(xì)菌的代謝 →合成 phage的成分 →裂解，釋放。 ? 原因 ： 有兩個(gè)以上的噬菌體侵染一個(gè)細(xì)菌時(shí)，出現(xiàn) 溶菌阻礙現(xiàn)象 ，混有裂解和未裂解的細(xì)胞。‘ su3＋ ’菌株的 tRNATry含有反密碼子 CUA，它識讀琥珀型密碼子 UAG，并插入酪氨酸而防止終止。 （ h+r+ + hr） total plaques 100% Hershey和 Rotman1949年的 T2雜交結(jié)果 基因型 噬菌斑 百分率 hr+ 42 76% h+r 34 h+r+ 12 24% hr 12 r h 24 （ 8）、 T2噬菌體的遺傳圖 ① Hershey的迷惑 a. Hershey后來分離出多種突變的 T2 噬菌體： r r r13 用 hr的不同突變體雜交，計(jì)算 h與不同 r之間的重組值并繪制遺傳圖。 三 原噬菌體的插入與切除 1 原噬菌體的插入與正常切除 P135 圖 57 2 原噬菌體的異常切除 P135 圖 58 （ 1） 轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體：指帶有細(xì)菌基因的噬菌體。 2 互補(bǔ)測驗(yàn)及結(jié)果 P124 表 54 ?X174突變的互補(bǔ)測驗(yàn)結(jié)果 順反子 突 變 型 A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28, B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8