病毒的傳分析ppt課件-文庫吧在線文庫
【正文】 主菌基因型 su su+amb su+och su+op 野生型 sus amber sus ochre sus opal + + + + + + + + （ 2）噬菌體的抑制因子敏感突變型類型及表現(xiàn) 琥珀型（ amber） UAG 赭石型（ ocher） UAA 乳白型（ opal） UGA sus突變分為三類； 無義抑制基因 （ su＋ ） 實質(zhì) ： tRNA基因發(fā)生了突變，例如琥珀型抑制基因‘ su3＋ ’在 UAG密碼于上插入了一個酪氨酸，這是因為 tRNA加基因的反密碼子的一個突變， tRNATry，正常的反密碼于是 GUA，它按擺動規(guī)則譯讀酪氨酸密碼子 UAU(C)。 部分溶菌 條件致死突變體 所謂 條件致死突變型 ，就是在某些條件下，這些突變型是致死的，那么這些條件就稱為 限制條件 (restrictive condition)；而在另一些條件下仍可進行繁殖，從而得以擴增進行研究，所以這些條件稱為 許可條件 (permissive condition)。 ? 快速溶菌突變體 ? (1)野生型 r+形成小的噬菌斑 1mm，周邊有朦朧的光環(huán)。 原噬菌體：整合到宿主基因組中的噬菌體。 二、噬菌體的繁殖 ? 1．烈性噬菌體（ virulent phages） ? 概念： 感染細(xì)菌后立即在菌體內(nèi)復(fù)制和合成蛋白質(zhì)外殼，重新組裝成噬菌體顆粒，并導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞解體，釋放出噬菌體。 可用作研究高等生物的簡單模型 。 病毒一小時可繁殖百個。盡管病毒能形成晶體，自身不能進行代謝等，但仍將病毒視為生物，因為它們能夠繁殖。細(xì)菌病毒又稱噬茵體 (phage)。 易于獲得大的數(shù)量用于分析。 （ 1） 噬菌體 DNA復(fù)制。 整合到細(xì)菌染色體的噬菌體 DNA隨細(xì)菌的染色體復(fù)制而復(fù)制。 P1和 λ噬菌體的生活周期特性 ? 溶源性： 有些細(xì)菌帶有某種噬菌體，但并不立即導(dǎo)致溶菌，這種現(xiàn)象稱為 溶源性 ，具有溶源性的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌 （ lysogenic bacteria），受溫和噬菌體感染的細(xì)菌，幾乎都成為溶源菌。 ? 原因： 無溶菌阻礙現(xiàn)象。 原因：溫度敏感性幾乎總是一種突變的結(jié)果，基因突變后所編碼的蛋白質(zhì)中有一個氨基酸的替換，而這種蛋白質(zhì)在 “ 限制溫度 ” 下不穩(wěn)定而喪失活性。 無義抑制突變： 指能抑制無義突變表現(xiàn)的突變。 r： 快速溶菌，噬菌斑大，邊緣清楚。 h r1 r7 r13 二、 T4噬菌體突變型的三點測交 噬菌體也能進行三點測交（ 06A/9/4） 突變型：小噬菌斑 (m)、快速溶菌 174。這是由于在Hfr（ λ） F－ 的雜交中，原噬菌體進入無阻遏物的受體細(xì)胞質(zhì)中，進行大量復(fù)制使受體細(xì)胞裂解，因此不易得到重組子，此現(xiàn)象就稱為合子誘導(dǎo)。 2 末端重復(fù)的實驗證據(jù) 圖 511 3 基因呈環(huán)狀排列的實驗證據(jù) P138 圖 512 二 環(huán)狀排列與末端重復(fù)的形成 1 基因的環(huán)狀排列 圖 513（ A） 2 末端重復(fù)雜合子的形成 圖 513（ B） 環(huán)狀排列與末端冗余 ? 環(huán)狀排列： T2或 T4 DNA分子的核苷酸排列雖然是不變的，但從哪一個核苷酸開始則有種種可能。③右臂：長約 10kb，是調(diào)控區(qū)，控制溶菌和溶原生長最重要的調(diào)控基因和序列、以及 λDNA復(fù)制起始均在這區(qū)域內(nèi)。 第三節(jié) 噬菌體突變型的互補試驗 一 ?X174條件致死突變型的互補測驗 (一 ) ?X174 DNA結(jié)構(gòu)復(fù)制 圖 51 (二 ) ?X174的突變型與互補測驗 1 互補測驗原理 在限制條件下 ， 能長出噬菌斑： 說明： 兩個突變型能發(fā)生功能互補 ， 是兩個基因 。 mixed infection experiments 混合感染（ mixed infection） B/2 T2 phage （ 5） 雜交結(jié)果 在 B和 B/2混合菌苔上出現(xiàn)了 4種噬菌斑。 （ 2） Hershey和 Luria的發(fā)現(xiàn) 1946年第 11屆冷泉港會議上 Hershey和Luria宣布發(fā)現(xiàn)噬菌體 r、 h突變，Delbruck和 Hershey發(fā)表了噬菌體重組。 sus突變不像“宿主范圍突變”那樣影響噬菌體對宿主的吸附，這種突變的噬菌體能正常地吸附、注入自身的 DNA，殺死宿主細(xì)胞，但不產(chǎn)生子代。 ? (4)噬菌體與細(xì)菌的關(guān)系 — 侵染與抗性。 三、噬菌體的突變型 噬菌斑 （ plaque）：由于噬菌體的侵染，使細(xì)菌細(xì)胞裂解，有菌落上出現(xiàn)的一些園形而清亮的小洞。 ? ② P1噬菌體：不整合到細(xì)菌的染色體上，而是獨立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。 10年后終于搞清了溶源化的實質(zhì)。 便于研究基因的作用 。 Phage T4 研究最為廣泛的是 T噬菌體： ?Viruses nonliving particles reproduce only within a host ?Virus has protein coat + nucleic acid core ? ssDNA, dsDNA, ssRNA, dsRNA ? may be lin
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