《病毒的傳分析》ppt課件-文庫吧
2024-12-21 14:11 本頁面
【正文】 原噬菌體：整合到宿主基因組中的噬菌體。僅少數(shù)基因活動，表達(dá)出阻礙物關(guān)閉其它基因。原噬菌體經(jīng)誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w 裂解途徑。 P1和 λ噬菌體的生活周期特性 ? 溶源性： 有些細(xì)菌帶有某種噬菌體，但并不立即導(dǎo)致溶菌，這種現(xiàn)象稱為 溶源性 ，具有溶源性的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌 （ lysogenic bacteria），受溫和噬菌體感染的細(xì)菌，幾乎都成為溶源菌。在細(xì)菌中處于潛伏狀態(tài)的噬菌體稱為 原噬菌體 （ prophage）或 原病毒（ provirus），帶有原噬菌體的細(xì)菌稱 溶源性細(xì)菌（ lysogenic bacterium），失去原噬菌體的細(xì)菌和為非溶源性細(xì)菌 （ non－ lysogenic bacterium）。 溶源性細(xì)菌有兩個重要特性 : (1)免疫性： 原噬菌體產(chǎn)生一種陰遏蛋白，抑制同類噬菌體DNA的復(fù)制，因而能抵抗同類噬菌體的超感染。 (2)可誘導(dǎo)性： 自發(fā) ――萬分之一； 紫外線或絲裂霉素 90%。 三、噬菌體的突變型 噬菌斑 （ plaque）：由于噬菌體的侵染，使細(xì)菌細(xì)胞裂解，有菌落上出現(xiàn)的一些園形而清亮的小洞。 ? 快速溶菌突變體 ? (1)野生型 r+形成小的噬菌斑 1mm，周邊有朦朧的光環(huán)。 ? 原因 ： 有兩個以上的噬菌體侵染一個細(xì)菌時，出現(xiàn) 溶菌阻礙現(xiàn)象 ，混有裂解和未裂解的細(xì)胞。 ? (2)快速溶菌突變體 r（ rapid lysis）形成大的噬菌斑 2mm，邊緣清晰。 ? 原因： 無溶菌阻礙現(xiàn)象。 ? (3)鑒別：噬菌斑大小。 寄主范圍突變體 ? (1)野生型 h+ 能感染野生型的大腸桿菌 Ttos，但不能感染 Ttor ? (2)突變型 h 對 Ttos 和Ttor都能感染。 ? (3)鑒別 ：混合 Ttor 和 Ttos ，野生型 h+出現(xiàn)混濁噬菌斑，突變型出現(xiàn)清亮噬菌斑。 ? (4)噬菌體與細(xì)菌的關(guān)系 — 侵染與抗性。 部分溶菌 條件致死突變體 所謂 條件致死突變型 ，就是在某些條件下，這些突變型是致死的，那么這些條件就稱為 限制條件 (restrictive condition)；而在另一些條件下仍可進(jìn)行繁殖，從而得以擴(kuò)增進(jìn)行研究，所以這些條件稱為 許可條件 (permissive condition)。 常用的有兩大類條件致死突變： （ 1） “ 溫度敏感 ” 突變 (temperature sensitive mutation) （ 2） “ 抑制因子敏感 ” 突變 (suppressorsensitive mutation, sus) （ 1） “ 溫度敏感 ” 突變 (temperature sensitive mutation)： 野生型噬茵體能在很大的溫度范圍內(nèi)感染宿主并進(jìn)行 繁殖。 ① 熱敏感突變型 (heat sensitive mutants， ts)：通常在 30℃ (許可條件 )感染宿主進(jìn)行繁殖，但在 40一42℃ (限制條件 )條件下就是致死的，不能形成噬菌斑； ② 冷敏感突變型 (cold sensitive mutation， cs)：在較低溫度下就是致死的。 原因：溫度敏感性幾乎總是一種突變的結(jié)果，基因突變后所編碼的蛋白質(zhì)中有一個氨基酸的替換，而這種蛋白質(zhì)在 “ 限制溫度 ” 下不穩(wěn)定而喪失活性。 （ 2） “抑制因子敏感”突變 (suppressorsensitive mutation, sus)： 實質(zhì)是原來正常的密碼子變成了終止密碼子，因而翻譯提前終止，不能形成完整肽鏈而產(chǎn)生有活性的蛋白質(zhì)，屬于 無義突變 （ nonsence mautation）。帶有 sus突變的噬菌體在感染一種帶有 抑制基因(suppressor, su＋ )(許可條件 )的宿主菌時能產(chǎn)生子代，但在感染另一種沒有抑制基因 (su－ )(限制條件 )的宿主菌時，不能產(chǎn)生子代。野生型噬菌體在這兩種宿主中都能產(chǎn)生子代。 sus突變不像“宿主范圍突變”那樣影響噬菌體對宿主的吸附，這種突變的噬菌體能正常地吸附、注入自身的 DNA，殺死宿主細(xì)胞，但不產(chǎn)生子代。 （ 1）抑制因子敏感突變的概念： 例如：噬菌體 mRNA基因 細(xì)菌 tRNA基因反密碼子 正常 突變 突變 正常 基因： 5`TAC 3`?5`TAG 3` 3`ATC 5`?3`ATG 5` ? ? ? ? mRNA 5`UAC 3` 5`UAG 3` 3`AUC 5` 3`AUG 5` ? ? 表型：酪氨酸 終止 5`UAG 3` ?酪 氨酸 ?酪 氨酸 3`AUC 5` ?酪 氨酸 表 52攜帶不同專一性抑制基因宿主中 sus突變噬菌體的表現(xiàn) 噬菌體基因型 宿主菌基因型 su su+amb su+och su+op 野生型 sus amber sus ochre sus opal + + + + + + + + （ 2）噬菌體的抑制因子敏感突變型類型及表現(xiàn) 琥珀型（ amber） UAG 赭石型（ ocher） UAA 乳白型（ opal） UGA
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