【正文】 平均 ③ 350ug/ml ④ 400ug/ml ⑤ 450ug/ml ⑥ 500ug/ml 9 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分 析 不同濃度鐵離子對(duì)杏鮑菇菌絲的生長速度和長勢(shì)有不同的影響。 將接種后的平板置 25℃ 恒溫培養(yǎng)箱中，避光靜置培養(yǎng) 10 天。然后趁熱分裝入試管，每管大約 15ml，每個(gè)濃度裝 3 支試管。 由測(cè)得的數(shù)據(jù)可以分別求出每組培養(yǎng)皿在不同培養(yǎng)時(shí)期時(shí)的平均直徑，并填入表內(nèi)，可以看出：在一定范圍內(nèi)，不同濃度的鐵離子加入 PDA 培養(yǎng)基內(nèi)都可以使杏鮑菇菌絲菌落直徑增大，當(dāng)鐵離子濃度為 1150ug/ml 時(shí)，這種作用效果最明顯，當(dāng)超過這個(gè)濃度時(shí)作用效果變?nèi)酢? 接種： 在超凈工作臺(tái)內(nèi)，無菌操作，將活化好的實(shí)驗(yàn)菌種用直徑為 的打孔器沿同心圓打塊 [14]，用接種鏟定量接種于實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基平板中央。 不同濃度鐵元素培養(yǎng)基的制作： 分別用移液管取 1ml 各濃度的氯化鐵溶液和蒸餾水于貼好標(biāo)簽的燒杯中，加培養(yǎng)基至 50ml,調(diào) pH 值 5～ 。 在無菌操作下，在超凈工作臺(tái)內(nèi)將滅好菌的試管冷卻至 50～ 60℃時(shí)倒入冷卻后的培養(yǎng)皿內(nèi)（實(shí)驗(yàn) 所用平板采用直徑 9cm 的培養(yǎng)皿，裝量 15ml/皿），冷卻靜置待用。（斜面培養(yǎng) 4 基最好提前幾天制作，防止水蒸氣過重影響菌絲生長） 無菌接種及培養(yǎng) 無菌條件下，在超凈工作臺(tái)上從斜面母種中取黃豆粒大小的菌種塊（帶原培養(yǎng)基），在酒精燈下接種于用 PDA 培養(yǎng)基制作的斜面培養(yǎng)基中，置 25℃恒溫培養(yǎng)箱中，避光靜置培養(yǎng)，培養(yǎng) 2 天后菌絲萌發(fā)，約 15 天后試管內(nèi)長滿菌絲， 檢查有無雜菌 [11]。放回內(nèi)層鍋 ,并裝入待滅菌物品，旋緊滅菌鍋上的螺栓 ,使螺栓松緊一致 ,勿使漏氣。 通過研究 Fe、 Ca兩種金屬元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長的影響，得到最適合杏鮑菇菌絲生長的含 Fe、 Ca金屬元素濃度的培養(yǎng)基對(duì)提高杏鮑菇的產(chǎn)量具有重要意義，另外將為進(jìn)一步優(yōu)化杏鮑菇菌絲培養(yǎng)基的研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。如鈣可與產(chǎn)生的草酸形成草酸鈣結(jié)晶 , 避免草酸過多的不良影響 [7]。鈣離子能降低原生膠體的分散度 , 調(diào)節(jié)原生質(zhì)的膠體狀態(tài) , 使細(xì)胞 充水度、粘滯性、彈性以及滲透性等適合于正常作物生長。固氮酶在固氮微生物中處于 N2固定過程中心，在大豆中 ,鐵也能部分取代鉬作硝酸還原酶的金屬輔助因子 [6]。 植物中大部分鐵是以鐵磷蛋白的形式儲(chǔ)存 ,稱為植物鐵蛋白。 金屬元素 2 鐵元素在生物體中的作用 鐵氧化還原蛋 白屬于穩(wěn)定的鐵 硫蛋白 ,存在于葉綠體中 ,是光合電子傳遞鏈中第一個(gè) 穩(wěn)定氧化還原化合物 ,是最初的電子受體。 杏鮑菇營養(yǎng)豐富，每 100g杏鮑菇 干物質(zhì)中含粗蛋白 ，含粗脂肪，符合高蛋白低脂肪的營養(yǎng)食品要求。 杏鮑菇的肉質(zhì)肥厚 , 質(zhì)地脆嫩 , 特別是菌柄色澤雪白 , 粗長 , 組織極其致密 , 結(jié)實(shí) , 脆感強(qiáng) , 其口感獨(dú)具一格 , 是味道最好的 菇類之一 , 被稱為“平菇王”、“干貝菇”。 Cailleux (1974) 用菌褶分離到杏鮑菇的菌株 , 并試驗(yàn)栽培成功 。菌柄偏生至側(cè)生，中實(shí)，棒狀到球莖狀，表面平滑，淺黃白色，無菌環(huán)，孢子橢圓至紡錘形 法國、意大利、印度都先后進(jìn)行過杏鮑菇的栽培研究。 when the concentration of calcium ions 350ug/ml, the mushroom mycelium fastest increasing trend in the diameter of colony. Through the research Fe, Ca two metal elements of Pleurotus, the influence of hypha growth for further optimization Pleurotus hyphae medium research provides reliable experimental data. Key words: Iron ion, Calcium ions, PDA medium， Pleurotuseryngii 1 1 引言 杏鮑菇 杏鮑菇 (Pleurotus eryngii) 是歐洲南部、非洲北部以及中亞地區(qū)高山、沙 漠地帶的一種品質(zhì)優(yōu)良的大型肉質(zhì)傘菌 , 屬于傘形花科、刺芹屬、刺芹枯死的植株上，所以又稱為刺芹側(cè)耳。 結(jié)果表明：當(dāng)鐵離子的濃度在1150ug/ml 時(shí)，杏鮑菇的菌絲菌落的直徑最大；當(dāng)鈣離子的濃度 350ug/ml 時(shí)，杏鮑菇的菌絲菌落的直徑最大。 10 參考文獻(xiàn) 3 菌種 3 主要的玻璃儀器及其他實(shí)驗(yàn)用具 3 基本試劑和藥品 2 主要儀器與試劑 2 2 實(shí)驗(yàn)部分 1 杏鮑菇 I ABSTRACT II 1 引言 1 金屬元素 3 菌種的純化 4 鐵元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長的影響 4 鈣元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長的影響 6 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 9 不同濃度鐵元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長的影響 9 不同濃度鈣元素對(duì)元素杏鮑菇菌絲生長的影響 12 致謝 通過研究 Fe、 Ca 兩種金屬元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長的影響，為進(jìn)一步優(yōu)化杏鮑菇菌絲培養(yǎng)基的研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。該菌隸屬于真菌門、真擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳屬。 Kalmar (1958) 第一次進(jìn)行栽培實(shí)驗(yàn) []。 Ferri (1977) 首先進(jìn)行商業(yè)化栽培 , 但只得到有限的成功。前蘇聯(lián)的瓦西爾柯夫 (1955) 稱它為“草原的美味牛肝菌” , 可見味道鮮美之極 ,目前在國際市場(chǎng)上是人工栽培的食用菌中數(shù)量稀少 , 價(jià)格最高的菇類。杏鮑菇子實(shí)體的氨基酸已知含有 17種，其中人體必需的 8種氨基酸占氨基酸總量的 ﹪。鐵氧化還原蛋白具有很高的負(fù)氧化還原電位 ,能還原多種物質(zhì) ,如 NADP+、 O2，亞硝酸、硫酸鹽和血紅蛋白 [6]。細(xì)胞中約 75 %的鐵與葉綠體結(jié)合 ,葉片中高達(dá) 90 %的鐵與葉綠 體和線粒體膜的脂蛋白結(jié)合。 鈣元素在生物體中的作用 鈣是植物結(jié)構(gòu)組分元素。 鈣與環(huán)狀多肽結(jié)合而成的化學(xué)物質(zhì)鈣調(diào)素 , 在控制植物細(xì)胞膜的功能和酶的活性方面起重要作用。 鈣對(duì)植株挺立和莖桿硬度起作用 , 也影響籽粒形成 , 許多種子中有肌醇六磷酸鈣鎂。 2 實(shí)驗(yàn)部分 3 主要儀器與試劑 主要儀器 立式壓力蒸汽滅菌器 上海博迅實(shí)業(yè) 有限公司醫(yī)療設(shè)備廠 ,220V 無菌操作工作臺(tái) 上海亞榮生化儀器廠 電子萬用爐 北京市永光明醫(yī)療儀器廠 DL1 型 ,1000W,220V 電子分析天平 中國輕工業(yè)機(jī)器總公司常熟衡天 DF110 型 干燥箱 上海市實(shí)驗(yàn)儀器總廠 2022 型 ,220V,300℃ 恒溫生化培養(yǎng)箱 上海綠宇生物科技有限公司 RXZ300D 型 220V 0～ 50℃ 基本試劑和藥品 氯化鐵 分析純 ,含量大于 99% 北京化學(xué)試劑公司 無水氯化鈣 分析純， 含量大于 99% 北京化工廠 葡萄糖 分析純 ， 含量大于 % 天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心 瓊脂 上海化學(xué)試劑站分裝廠 馬鈴薯 郴州市場(chǎng)購買 主要的玻璃儀器及其他實(shí)驗(yàn)用具 燒杯 ,試管 ,玻璃棒 ,容量瓶（ 1000ml， 100ml） ,錐形瓶 ,移液管（ 100ml， 10ml） ,漏斗 ,紗布 ,接種針 ,酒精燈 ,標(biāo)簽紙 ,培養(yǎng)皿 ,棉花塞 ,牛皮紙， 直徑為 的打孔器 。接通電源加熱 ,同時(shí)打開排氣閥 ,幾分鐘后排氣閥內(nèi)有冷空氣排出 ,待冷空氣完全排盡后 , 關(guān)閉排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。選擇生長良好，生物特征明顯，無雜菌的菌種用于接下來的實(shí)驗(yàn) [12]。 接種及培養(yǎng) 在超凈工作臺(tái)中，從純化后的斜面菌種中，無菌操作，取黃豆粒大小的菌種塊，無菌操作，接于活化菌種所用平板中，置 25℃恒溫培養(yǎng)箱中，避光倒置培養(yǎng) 10 天，作為實(shí)驗(yàn)菌種。然后趁熱分裝入試管，每管大約 15ml，每個(gè)濃度裝 3 支試管。 5 將接種后的平板置 25℃恒溫培養(yǎng)箱中，避光靜置培養(yǎng) 10 天。 培養(yǎng)皿編號(hào) 菌落直徑長度（ cm） 3d 6d 9d 12d 15d 7 8 9 平均 培養(yǎng)皿編號(hào) 菌落直徑長度（ cm） 3d 6d 9d 12d 15d 1 2 3 平均 培養(yǎng)皿編號(hào) 菌落直徑長度（ cm） 3d 6d 9d 12d 15d 4 5