金屬銅離子與蛋白(1)-wenkub
2023-05-21 22:38:22 本頁面
【正文】 結(jié)構(gòu)發(fā)生了較大變化 ,使 Trp暴露出來 ,造成 BSA的熒光猝滅 ,猝滅機(jī)理主要為靜態(tài)猝滅。能降低熒光體發(fā)光強(qiáng)度的分子稱為猝滅劑。在這些基團(tuán)中 Trp起主要作用 ,Tyr次之 ,Phe很弱可忽略，所以，一般認(rèn)為蛋白質(zhì)的熒光主要來自色氨酸的貢獻(xiàn)。 ? BSA分子由 583個(gè)氨基酸殘基組成。 銅與血清白蛋白 ? 血清白蛋白是血漿中最豐富的蛋白質(zhì) ,它可以與許多內(nèi)源性或外源性化合物結(jié)合 ,在生命體內(nèi)起著重要的儲(chǔ)存和輸運(yùn)作用。金屬銅離子與蛋白質(zhì) 內(nèi)容： ?研究的目的及意義 ?銅與血清白蛋白 ?銅與血紅蛋白 ?銅蛋白和銅酶 研究目的及意義 ? 在真核生物體內(nèi)，銅元素參與體內(nèi)的許多生化反應(yīng)，如作為電子傳遞鏈中的供體或受體；參與細(xì)胞內(nèi)的呼吸；維持鐵的代謝平衡；用于色素、神經(jīng)遞質(zhì)的合成；作為氧化還原酶參與體內(nèi)的抗氧化過程。 ? 血清白蛋白是由肝臟合成的一種簡單蛋白質(zhì)，僅由氨基酸組成，沒有修飾基團(tuán)和其他附屬物。而 HSA比BSA多 2個(gè)氨基酸，即 585個(gè)氨基酸殘基組成。 ? 當(dāng)金屬離子與血清白蛋白結(jié)合后 ,可引起蛋白質(zhì)或少數(shù)金屬離子 (稀土離子 )熒光的改變 ,由此可進(jìn)行定性、定量研究蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化。基態(tài)熒光分子與猝滅劑之間通過弱的結(jié)合生成復(fù)合物 ,且該復(fù)合物使熒光完全猝滅的現(xiàn)象稱為靜態(tài)猝滅。 ? N端三肽鏈 (HSA為 Asp1Ala2His3 ,BSA為 A sp1Thr2His3)公認(rèn)是 Cu2+(Ⅱ )的強(qiáng)結(jié)合位點(diǎn)。 ? 血紅蛋白化學(xué)式為 C3032H4816O812N780S8Fe4 其分子量約為 64500，是含有 4個(gè)肽鏈的四聚體。 血紅素與血紅蛋白結(jié)構(gòu) ? 當(dāng)血紅蛋白不與氧結(jié)合的時(shí)候，有一個(gè)水分子從卟啉環(huán)下方與亞鐵離子配位結(jié)合，而當(dāng)血紅蛋白載氧的時(shí)候，就由 氧分子 頂替水的位置。 ? 左： 2μmol/L血紅蛋白與不同濃度銅離子反應(yīng)分鐘后的紫外光譜圖 ? 右：血紅蛋白與銅離子相互作用時(shí)隨時(shí)間變化的紫外光譜圖 ? 由此推測， Cu2+的加入，破壞了血紅蛋白中芳香族的共軛結(jié)構(gòu)；而血紅素 400nm處的 soret吸收峰隨著時(shí)間的變化逐漸減弱 ,于是，在不含銅離子的 2μmol/L血紅蛋白溶液中滴加不同濃度的 Fe2+ ，發(fā)現(xiàn)隨著 Fe2+的加入， 400nm處的吸收峰增強(qiáng)。 左：銅離子、鐵離子與血紅蛋白反應(yīng)的紫外光譜圖 右：銅離子與血紅蛋白反應(yīng) 16小時(shí)的紫外光譜圖 ? 最后采用電化學(xué)微分脈沖伏安法
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