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20xx年醫(yī)學專題—第十六篇細胞因子及細胞粘附因子的測定(已修改)

2025-11-08 20:31 本頁面
 

【正文】 第十六章 細胞(x236。bāo)因子與細胞(x236。bāo)粘附因子的測定,第一頁,共三十八頁。,第一節(jié) 生物學測定方法 一、促進細胞(x236。bāo)增殖和抑制細胞(x236。bāo)增殖測定法 二、細胞毒活性測定法 三、抗病毒活性測定法 四、趨化活性測定法 五、生物學活性測定方法學評價,第二節(jié) 免疫測定方法 一、ELISA方法 二、流式細胞分析法 三、酶聯(lián)免疫斑點試驗(sh236。y224。n) 四、免疫學測定方法學評價,第二頁,共三十八頁。,第三節(jié) 細胞因子與細胞粘附分子測定的臨床應用 一、臨床應用原則 二、特定疾病診斷的輔助指標 三、評估機體(jītǐ)的免疫狀態(tài)、判斷治療效果及預后,思考題 小結(jié)(xiǎoji233。),第三頁,共三十八頁。,是由活化的免疫細胞及某些基質(zhì)細胞表達并分泌的活性物質(zhì),其主要(zhǔy224。o)生物學功能是介導和調(diào)節(jié)免疫應答及炎癥反應,其化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)或多肽。,細胞因子,細胞(x236。bāo)粘附因子,是介導細胞間及細胞與細胞外基質(zhì)間粘附作用的分子,其化學(hu224。xu233。)本質(zhì)為糖蛋白,可以細胞膜表面表達和可溶性兩種形式存在。,第四頁,共三十八頁。,第一節(jié) 生物學測定方法,第五頁,共三十八頁。,1.基于DNA檢測(jiǎn c232。)的分子生物學測定法: DNA擴增法 RNA印跡法 原位雜交法 核酸酶保護分析 2.生物活性測定法,生物學測定法分類(fēn l232。i),第六頁,共三十八頁。,根據(jù)細胞因子特定的生物學活性,應用(y236。ngy242。ng)相應的指示系統(tǒng),同時與標準品對比測定,從而得知樣品中細胞因子的活性水平,一般以活性單位(U/ml)表示,生物(shēngw249。)活性測定法原理,有 助 于 細 胞 因 子 檢 測 的 活 性 作 用 包 括,有助于細胞因子檢測(jiǎn c232。)的活性作用,刺激細胞增殖或集落形成的活性維持細胞生長和存活的特性 抑制細胞生長或破壞細胞的效應促進細胞趨化或抗病毒作用,第七頁,共三十八頁。,以細胞因子依賴性細胞株為靶向,通過觀察特定的細胞因子刺激或抑制依賴性細胞株增殖來評估(p237。nɡ ɡū)細胞因子的活性水平。,一、促進(c249。j236。n)細胞增殖和增殖抑制測定法,第八頁,共三十八頁。,直接計數(shù)法 簡便、直觀,但費時、主觀因素影響大、難以標準化和自動化 細胞代謝活性測定方法 3HTdR、125IUdR摻入法或MTT等比色法 細胞代謝產(chǎn)物測定法 代謝產(chǎn)物熒光(y237。ngguāng)強度測定法和指示細胞表面標記或可溶性分子測定法,細胞增殖檢測(jiǎn c232。)方法分類,第九頁,共三十八頁。,通過檢測細胞DNA合成(h233。ch233。ng)的增加或減少來判斷細胞增殖的方法。在細胞的增殖過程中,DNA合成(h233。ch233。ng)的增加使得指示細胞對核苷或堿基的需求增多,若將核苷標記上可以示蹤的同位素(3H/125I ),通過檢測細胞內(nèi)的同位素含量,則可反映細胞增殖的程度。,結(jié)果客觀易于自動化;適用(sh236。y242。ng)于大標本量的測定,優(yōu)點(yōudiǎn),缺點,方法的特異性受依賴細胞株
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